阮洋
- 作品数：5 被引量：18H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室更多>>
- 发文基金：公益性行业科研专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 小反刍兽疫病毒F、H基因的核酸疫苗及N蛋白的原核表达研究
- 小反刍兽疫(Peste des petits ruminants, PPR)是由小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus, PPRV)引起的一种急性、烈性、接触性传染病。山羊高度易...
- 阮洋
- 关键词：小反刍兽疫病毒真核表达载体N蛋白
- 文献传递
- H9亚型禽流感病毒HA基因的克隆与序列分析被引量：4
- 2011年
- 目的扩增、克隆H9N2 HA基因,并进行序列分析,为H9N2流感病毒种间及跨种传播机制研究奠定基础。方法设计特异性引物,扩增克隆H9N2亚型禽流感病毒,测序后进行序列分析。结果成功克隆出4株H9N2亚型禽流感病毒,全长均为1.7 kb,ORF为1 683 bp,编码560个氨基酸;联机检索,与参考毒株比对核苷酸和氨基酸同源性均在90%以上。结论成功克隆4株H9N2亚型禽流感病毒,序列分析显示其核苷酸和推导氨基酸与参考毒株高度同源。
- 李林桑晓宇朱晓文于志君李天松王磊黄海楠阮洋秦峻岭刘玉秀高玉伟夏咸柱胡桂学
- 关键词：H9亚型禽流感HA基因克隆
- 小反刍兽疫病毒H基因的真核表达被引量：1
- 2011年
- 目的构建小反刍兽疫病毒(PPRV)H基因真核表达载体,并对其表达能力及免疫活性进行鉴定,为后期疫苗的研制提供基础。方法根据GenBank上公布的PPRV(China/Tib/Gej/07-30株)H基因的序列进行引物设计并进行扩增,纯化回收后将其克隆到pMD-18T载体中,将测序鉴定正确的目的基因克隆到真核表达载体pCAGGS上。结果成功构建了含有PPRV H基因的真核表达载体pCAGGS-H。通过脂质体介导质粒pCAGGS-H转染DK细胞,经间接免疫荧光及Western blot证实,表达蛋白分子质量单位为68.8 ku,能与PPRV阳性血清发生特异性反应。结论 pCAGGS-H在真核细胞内可有效表达。
- 阮洋秦峻岭高玉伟黄海楠孙玮杨松涛王承宇王铁成黄耕王志亮夏咸柱
- 关键词：小反刍兽疫H基因WESTERNBLOT
- 一种表达小反刍兽疫病毒H基因的活载体疫苗及制备方法
- 本发明提供一种表达小反刍兽疫病毒H基因的活载体疫苗，同时还公开了其制备方法，制备的重组病毒具有良好的遗传稳定性，以此病毒制备的疫苗免疫山羊后，可诱导山羊产生特异的抗病毒中和抗体，具有良好的免疫保护效果，无毒副作用，制品容...
- 高玉伟秦峻岭夏咸柱阮洋侯小强杨松涛王承宇黄耕王铁成
- 文献传递
- 小反刍兽疫病毒N基因的原核表达被引量：9
- 2011年
- 目的是表达出小反刍兽疫病毒的核蛋白,并鉴定其活性。根据GenBank发表的小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列,对其进行基因优化并合成。设计引物,利用PCR的方法扩增PPRV-N基因,将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建原核表达载体pET-28a-N。阳性质粒转化原核表达宿主菌Transetta(DE3),用IPTG诱导表达并确定表达N基因的最佳诱导时间、温度。通过SDS-PAGE电泳和Western blot分析确定表达蛋白的表达量和活性。扩增出PPRV-N基因,构建的原核表达载体pET-28a-N和原核表达菌,表达了N蛋白,表达蛋白能与PPRV阳性血清发生特异性反应。
- 阮洋秦峻岭高玉伟孙玮张涛杨玉姣杨松涛王承宇王铁成黄耕夏咸柱
- 关键词：原核表达SDS-PAGE电泳WESTERN-BLOT
