宋娜
- 作品数:4 被引量:0H指数:0
- 供职机构:吉林大学畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 重组人FGF1基因乳腺特异表达载体的构建及其功能的验证
- 本实验中构建了FGF1乳腺特异表达载体,并且在人的乳腺癌细胞系(MCF-7)中验证了该载体的功能。结果表明该载体能够成功的表达人FGF1蛋白,并且表达的蛋白具有促细胞增殖的活性。此外,该载体可以通过Cre介导删除系统对筛...
- 周杨朱建国闫森王海军宋娜李莉欧阳红生逢大欣
- 关键词:基因载体功能分析人酸性成纤维细胞生长因子乳腺组织
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒受体CD163基因敲除载体的构建
- 2012年
- 为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒受体CD163基因缺失细胞系和进一步明确CD163在PRRSV感染过程中的作用,本研究以猪基因组为模板,扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒受体CD163基因同源左臂和同源右臂,并将扩增片段与pGEM-T载体连接后进行部分序列测定,同时与已知相应片段进行同源性分析,再将扩增的同源左右臂分别酶切后定向连接至pSSC-9载体中,成功构建了含Neo和Tk基因的双标记打靶载体pSSC-Larm-Sarm。
- 于飞飞陈福旺宋娜杨鑫曹宇航张娟傅震洲王安峰任林柱
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒基因敲除同源重组
- 绿色荧光小鼠胚胎干细胞的分离与培养
- 2010年
- 目的:建立绿色荧光小鼠胚胎干细胞系。方法:以ICR及GFP转基因小鼠为实验动物,冲取交配后3.5天小鼠GFP-/+囊胚,去透明带后进行完全培养,以13.5天鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为饲养层,并对细胞克隆用亚克隆的方法分离扩大培养。结果:获得了边缘清晰,表面平滑,结构致密,隆起生长的鸟巢状克隆,碱性磷酸酶染色呈强阳性,干细胞特异性的多能因子OCT4及Nanog表达呈阳性,且能稳定表达绿色荧光的雄性干细胞系。结论:本文为小鼠ES细胞系的建立提供了一种稳定而可靠的方法。
- 谭广云谢万华周焱黄永业宋红肖李栋宋娜袁婷段新平逄大欣欧阳红生
- 关键词:EGFP胚胎干细胞小鼠
- 表达Cre重组酶Cre-pCEP4载体的构建及其在Cre/loxP重组系统中的应用
- 2011年
- 目的:构建表达Cre重组酶的载体Cre-pCEP4,并验证其能够有效识别loxP位点,为人类疾病动物模型的建立提供依据。方法:构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,利用Fugene HD转染猪胚胎成纤维细胞(PEF)和MCF-7细胞系,利用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况。结果:成功构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,将2个载体瞬时共转染PEF;经潮酶素B筛选出Cre重组酶稳定表达的MCF-7细胞系瞬时转染pStop-eGFP,在荧光显微镜下观察2种细胞均有绿色荧光蛋白的表达。而单独转染pStop-eGFP的MCF-7细胞系和PEF均未见绿色荧光蛋白的表达。结论:重组载体Cre-pCEP4在细胞内能够表达Cre重组酶,并且表达的Cre重组酶能够识别loxP位点,删除两同向loxP间的DNA片段。
- 周杨朱建国唐小春闫森宋娜张明军李莉欧阳红生逄大欣
- 关键词:CRE/LOXP重组系统