肖红冉
- 作品数:11 被引量:20H指数:3
- 供职机构:石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金新疆生产建设兵团博士基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 牛病毒性腹泻病毒纳米抗体文库的构建与鉴定
- 研究目的:牛病毒性腹泻病毒又称牛病毒性腹泻-黏膜病病毒,是黄病毒科瘟病毒属主要成员,主要引起牛的病毒性腹泻-黏膜病(BVD-MD),目前,该病尚无有效的疫苗和特异的治疗药物,研发基于抗体的诊断和治疗制剂对其防控具有重要意...
- 张国奇李尤简肖红冉黄美玲杨霞陈创夫盛金良
- 仔猪胃肠道优良性状乳酸杆菌的分离和鉴定被引量:6
- 2012年
- 从健康仔猪胃肠道不同部位(胃、十二指肠、空肠、结肠)分离乳菌杆菌,对其进行接触酶实验和革兰氏染色、API系统生化鉴定,然后对分离的乳酸杆菌进行小白鼠安全性试验、绘制生长曲线、耐酸和胆盐试验、体外抑菌试验。结果表明:应用完全选择性培养基,从仔猪胃肠道分离疑似60株乳酸杆菌,其中来源于胃部16株,空肠8株,十二指肠4株,结肠22株。经API系统生化鉴定,共有16株乳酸杆菌。其中9株嗜酸乳杆菌,5株发酵乳杆菌,2株唾液乳杆菌。经过筛选,最终确定了2株优良性状的乳酸杆菌。
- 蒋建军肖红冉张杰陈少秀孙磊孟小江王鹏雁
- 关键词:仔猪胃肠道乳酸杆菌
- 牛病毒性腹泻病毒纳米抗体文库的构建与鉴定
- 研究目的:牛病毒性腹泻病毒又称牛病毒性腹泻-黏膜病病毒,是黄病毒科瘟病毒属主要成员,主要引起牛的病毒性腹泻-黏膜病(BVD-MD),目前,该病尚无有效的疫苗和特异的治疗药物,研发基于抗体的诊断和治疗制剂对其防控具有重要意...
- 张国奇李尤简肖红冉黄美玲杨霞陈创夫盛金良
- 文献传递
- 噬菌体展示anti-BVDV纳米抗体文库的构建
- 牛病毒性腹泻/粘膜病(Bovine viral diarrhea/mucosal disease)是由牛病毒性腹泻病毒引起的、主要发生于牛的一种急性、热性传染病,其临诊特征为黏膜发炎、糜烂、坏死和腹泻。本病呈世界性分布,...
- 肖红冉郭吉星张国奇李尤简盛金良陈创夫
- 关键词:牛病毒性腹泻蛋白表达噬菌体
- 牛病毒性腹泻病毒纳米抗体文库构建与筛选被引量:4
- 2018年
- 旨在获得牛病毒性腹泻病毒(BVDV)特异性纳米抗体。通过用BVDV-E0重组蛋白对羊驼进行免疫,分离血液中的淋巴细胞。利用噬菌体展示技术,构建噬菌体展示文库,经过连续3次生物淘筛获得与BVDV-E0蛋白结合的噬菌体,对所得VHH序列进行测序和基因比对。用ELISA筛选出抗BVDV-E0的高亲和力纳米抗体,并验证纳米抗体的亲和力和活性。结果成功构建了插入率为86%、库容量为1.3×1011 cfu的噬菌体表达文库,经过筛选获得5个BVDV-E0阳性单克隆,将这些基因克隆至原核表达体系,表达和纯化后获得了高纯度的BVDV-E0纳米抗体,经亲和力的鉴定获得2个不同的高亲和力的VHH基因,并且能结合人工抗原E0,还能够被竞争抗体所阻断。研究结果为用于组装检测BVDV试剂盒和研制BVDV疫苗奠定了基础。
- 丁金花李启峰马旭升肖红冉肖盛中吴鹏盛金良陈创夫
- 关键词:噬菌体展示技术
- 牛病毒性腹泻病毒囊膜蛋白Erns/E2的原核表达及噬菌体展示anti-BVDV纳米抗体文库的构建
- 牛病毒性腹泻/粘膜病(Bovine viral diarrhea/mucosal disease)是由牛病毒性腹泻病毒引起的、主要发生于牛的一种急性、热性传染病,其临诊特征为黏膜发炎、糜烂、坏死和腹泻。本病呈世界性分布,...
- 肖红冉
- 关键词:牛病毒性腹泻病毒囊膜蛋白E2基因原核表达
- 文献传递
- BVDV诱导MDBK细胞产生凋亡的分子机制研究
- 牛病毒性腹泻病毒(cytopathic bovine viraL diarrhea virus,BVDV)属于黄病毒科瘟病毒属。该病毒是一种世界范围内广泛分布的病原体,通常造成牛的亚临床感染或温和性临床症状,临床上主要以...
- 王讲德肖红冉张辉盛金良王鹏雁柳建新陈创夫
- 关键词:牛病毒性腹泻病毒分子机制生物治疗
- 牛病毒性腹泻病毒纳米抗体文库的构建与鉴定被引量:4
- 2015年
- 通过构建牛病毒性腹泻病毒(BVDV)驼源重链抗体文库,并鉴定抗体文库的多样性,为筛选抗BVDV特异性重链抗体奠定基础。利用灭活的BVDV免疫双峰驼,多次免疫后测定血清抗体滴度,采集免疫后的血液并分离其外周淋巴细胞,抽提RNA,用RT-PCR法扩增重链抗体可变区(VHH)片段;将其克隆至载体pCANTAB5E,电转大肠杆菌TG1获得VHH抗体基因库,检测抗体库库容量,随机挑取克隆测序验证抗体文库多样性。结果表明,所构建的抗体文库的库容量为4.32×105;测序和聚类分析表明,抗体文库多样性丰富。利用辅助噬菌体救援后,得到噬菌体展示文库,测定滴度达1.3×1012 cfu/mL。
- 张国奇李尤简肖红冉黄美玲杨霞陈创夫盛金良
- 关键词:牛病毒性腹泻病毒单域抗体VHH
- 新疆哈萨克绵羊MHCⅠ类基因第二、三外显子序列多态性分析被引量:3
- 2013年
- 为研究新疆中国哈萨克绵羊主要组织性抗原复合体Ⅰ类基因第二、三外显子的序列多态性,采用PCR和测序的方法对新疆伊犁地区36只哈萨克绵羊MHCⅠ类基因第二、三外显子进行了扩增和测序,并对序列进行了生物信息学分析。结果表明:哈萨克绵羊MHCⅠ类基因第二、三外显子序列具有丰富的多态性,碱基组成具有一定的不平衡性,并且经过了自然选择的作用,与数据库中牛的序列的进化分析显示了跨物种多态性。实验数据为深入研究绵羊MHCⅠ类基因的多态性及绵羊抗病新品种的选育提供理论依据。
- 刘志方吴长新张辉李蕊郭吉星肖红冉陈创夫
- 关键词:MHC聚合酶链式反应基因多态性
- 猪α干扰素在BHK-21细胞中的表达与生物活性分析被引量:2
- 2013年
- 为了构建猪α-干扰素(PoIFN-α)的真核表达系统,鉴定其生物学活性,分离猪的外周血淋巴细胞,提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增猪α-干扰素基因序列,克隆至pcDNA3.1(+)载体,并转染BHK-21细胞。通过G418筛选获得稳定转染的细胞株,采用real-time PCR及ELISA测定PoIFN-α基因在BHK-21细胞内的表达,利用淋巴细胞增值试验(MTT)检测表达蛋白的生物学活性。结果表明:稳定整合PoIFN-α基因的BHK-21细胞系其PoIFN-αmRNA的转录效率比阴性对照组提高1.52倍,蛋白表达量显著提高1.35倍。MTT试验表明真核表达PoIFN-α淋巴细胞增值活性与阴性对照组相比差异显著(P<0.01),表明BHK-21细胞表达的PoIFN-α具有良好的生物学活性,为开发新型抗病毒制剂奠定基础。
- 肖红冉王大伟贺志锐王鹏雁倪伟胡圣伟陈创夫
- 关键词:猪Α干扰素BHK-21细胞生物活性分析