李慧 作品数:109 被引量:465 H指数:11 供职机构: 天津市肿瘤医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 天津市自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 政治法律 更多>>
B7家族的新成员—B7-H1、B7-H2、B7-H3、B7-DC 被引量:5 2005年 T细胞的活化需要TCR与抗原肽 MHC的第一信号 ,以及共刺激因子的第二信号系统。B7家族是重要的共刺激分子 ,属于免疫球蛋白家族。除B7 1和B7 2外 ,近几年又发现了B7家族的新成员———B7 H1、B7 H2、B7 H3、B7 DC等 ,与T、B细胞的活化及免疫应答等有关。深入研究B7家族成员的结构和作用机制 ,有助于T、B细胞活化机制以及免疫耐受、肿瘤免疫研究的深入和发展。 李慧 任秀宝 郝希山关键词:B7家族 B7-H1 B7-H3 GM-CSF基因修饰肺癌细胞疫苗的抗肿瘤活性及其与化疗的协同作用 被引量:3 2007年 目的评价粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因修饰肿瘤疫苗的抗肿瘤活性,探讨其与化疗联合应用的抗肿瘤效果。方法以小鼠肺癌Lewis细胞系接种C57BL/6小鼠建立动物模型。利用含GM-CSF基因的重组质粒GM-CSF-pIRES2-EGFP,转染小鼠肺癌细胞系Lewis和LA795细胞,分别制备自体(Lewis细胞)和同种异体(LA795细胞)肿瘤疫苗。小鼠皮下接种Lewis细胞(1×107个)后5 d,采用GM-CSF分泌性肿瘤疫苗接种3次,同时设PBS组和单纯疫苗组作为对照,检测疫苗治疗前后脾细胞对Lewis细胞杀伤活性的变化,以及血清白介素4(IL-4)和γ干扰素(IFN-γ)的水平。观察GM-CSF分泌性肿瘤疫苗接种及联合化疗对小鼠生存期的影响。结果GM- CSF分泌性自体或同种异体肿瘤疫苗,均可诱导小鼠脾细胞对Lewis细胞杀伤活性增高,第3次接种后分别为(42.0±2.5)%和(39.6±7.3)%;同时血清中Th1类细胞因子IFN-γ的水平升高,而Th2类因子IL-4的水平无显著变化。GM-CSF分泌性肿瘤疫苗治疗组小鼠生存期与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);而化疗联合疫苗组小鼠生存期较单独治疗组及对照组明显延长(P<0.05)。结论GM-CSF基因修饰的肿瘤疫苗可刺激机体产生特异性免疫反应;化疗的联合应用有助于提高肿瘤疫苗的治疗效果。 姜宏景 任秀宝 李慧 于津浦 魏枫 马明全关键词:肿瘤疫苗 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 化疗 RT-PCR方法对检测乳腺癌干细胞富集血残存肿瘤细胞的价值 1999年 目的:旨在用敏感的RT- PCR 方法扩增目的基因,用于检测干细胞富集血中残存的肿瘤细胞。方法:应用RT- PCR 方法检测样品MUC1 、K19 基因的表达情况。结果:乳腺癌细胞系MCF- 7 中MUC1 、K19 表达阳性,而在淋巴细胞中则未见有表达。进一步用淋巴细胞稀释乳腺癌细胞来检测该方法的灵敏度。MUC1 、K19 检测残存肿瘤细胞的灵敏度均达到1/105 。在此基础上,完成了15 例乳腺癌患者干细胞富集血检测工作。结论:RT- PCR 是检测残存肿瘤细胞检测中行之有效的方法。 李慧 邵莹 张澎 安秀梅 郝希山关键词:乳腺癌 干细胞移植 RT-PCR TSLP在肺癌组织中的表达及其与调节性T细胞的相关性 被引量:6 2010年 目的:探讨胸腺基质淋巴生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)在肺癌组织中的表达及其与临床指标以及局部调节性T细胞(Regulatory T cells,Tregs)数量的相关性。方法:分别采用Q-RT-PCR和免疫组织化学染色方法检测TSLP在不同病变类型的肺组织中的表达,分析TSLP在不同病变肺组织中的表达差异;并运用免疫组化方法检测TSLP蛋白在不同病理类型的肺癌组织中的表达,分析TSLP表达与临床病理特征之间的相关性;采用免疫组化法检测肺癌组织中的Tregs细胞,分析TSLP表达与肿瘤局部Tregs细胞数量之间的关系。结果:TSLP基因在肺癌组织、癌旁组织、非肿瘤肺上皮均表达阳性,且表达差异无统计学意义;TSLP蛋白表达于胞浆中,其在肺癌组织中的阳性表达率(69.57%)显著高于肺的良性病变(13.33%)和非肿瘤肺上皮(30.00%),且TSLP表达与肿瘤大小和淋巴结转移有关;TSLP表达阳性的患者其肿瘤局部浸润的调节性T细胞数量明显高于TSLP阴性组(P<0.05)。结论:TSLP蛋白在肺癌组织中表达增加,且与肿瘤局部调节性T细胞数量增多有关,这提示TSLP可能是通过诱导Tregs增加在肺癌免疫耐受中发挥作用。 赵华 李慧 于津浦 苏延军 杨莉莉 魏枫 安秀梅 徐峰 岳东升 赵晓亮 任秀宝关键词:TSLP 调节性T细胞 FOXP3 免疫耐受 肺癌 异基因反应性NK细胞在供者淋巴细胞输注治疗单倍体相合造血干细胞移植后肺癌复发中的作用研究 2009年 本研究旨在探讨预处理中异基因反应性NK细胞(allo-reactive NK cells,Allo-NK)在供者淋巴细胞输注(DLI)治疗单倍体相合造血干细胞移植后肺癌复发中的作用。采用免疫磁珠富集F1供鼠(H-2d/b)脾脏allo-NK,流式细胞术和LDH法检测其异体反应性。建立小鼠单倍体相合造血干细胞移植后肺癌复发模型,采用放射性核素标记法追踪DLI的体内分布。比较不同处理组小鼠的肿瘤大小、淋巴细胞浸润程度,采用RayBio(小鼠细胞因子抗体芯片检测血清中22种细胞因子的变化。结果表明:在移植后24-48小时,allo-NK组的回输供者淋巴细胞在受者肺脏、脾脏、肾脏中明显蓄积,浓度最高,时间最长。化疗+DLI组与化疗+PBS组的肿瘤体积相比无明显区别,但allo-NK+DLI组的肿瘤体积显著小于化疗+DLI组(p<0.05)和allo-NK+PBS组(p<0.01)组,且镜下可观察到肿瘤局部较多的淋巴细胞浸润。allo-NK+DLI组中MCP-1、IL-17、IL-12和MCP-5较对照组分别升高1.56、1.36、1.20、1.17倍;而IL-10降低42.8%。结论:allo-NK可以延长DLI在宿主体内停留时间,促进炎性因子和Th1类细胞因子分泌,抑制肿瘤生长,提高DLI治疗移植后肺癌复发的疗效。 于津浦 孙海燕 李慧 曹水 辛宁 任秀宝关键词:单倍体相合造血干细胞移植 供者淋巴细胞输注 移植后复发 肺癌 表达可溶性TβRⅡ胞外区腺病毒载体的构建及功能试验研究 2006年 目的:探讨表达可溶性TβRⅡ胞外区片段的腺病毒载体构建,及其在肿瘤生物治疗学方面的作用机制和效果。方法:RT-PCR法克隆鼠源性TβRⅡ胞外区编码序列,采用AD-easyXLAdenovirusVectorSystem试剂盒构建表达上述基因的腺病毒载体。通过ELISA试验验证表达可溶性TβRⅡ胞外区序列的腺病毒载体转染细胞后所具有的阻断TGF-β的作用。应用于小鼠体内试验,观察该病毒载体对免疫效应细胞抗肿瘤活性的影响,从而评价其在肿瘤治疗方面的作用。结果:克隆了鼠源性TβRⅡ胞外区编码序列并成功地构建了表达这些基因的腺病毒载体。功能试验表明由腺病毒表达的TβRⅡ胞外区片段具有阻断TGF-β信号通路的作用。体内试验则表明应用于荷瘤小鼠可抑制肿瘤的发展。结论:表达可溶性TβRⅡ胞外区片段的腺病毒载体可显著地提高免疫细胞的杀伤能力,抑制肿瘤生长,为肿瘤的生物学治疗提供了新的研究方向。 史业辉 李慧 曹水 陈鹏 刘虹 魏枫 王旭东 任秀宝关键词:腺病毒 生物治疗 IL-2+IL-15组合培养方案对乳腺癌患者外周血中NK细胞体外扩增的效果 被引量:9 2013年 目的:观察IL-2+IL-15组合体外培养方案对于NK、NKT和T细胞亚群的比例、表型、杀伤肿瘤细胞活性与黏附活性的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采集天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科2012年5月至2012年7月期间收治的5例乳腺癌患者的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),用IL-2+IL-15联合培养方案进行培养,观察培养15 d后细胞的扩增倍数和淋巴细胞亚群比例变化,流式细胞术检测细胞免疫表型、细胞表面受体的表达,LDH释放法和CD107a释放法检测不同细胞亚群对于HLA匹配或不匹配的靶肿瘤细胞系的杀伤活性,活细胞工作站检测总扩增产物对于不同靶肿瘤细胞系的黏附作用。结果:与扩增前相比,IL-2+IL-15培养方案扩增15 d后,NK细胞[(36.74±17.10)%vs(16.34±3.12)%,P<0.05]、NKT细胞[(24.88±12.34)%vs(4.06±2.05)%,P<0.05]比例显著增加,CD4+T细胞和Treg细胞比例显著降低(P<0.05),CD8+T细胞比例显著升高(P<0.05);NK细胞表面活化受体NKp30[(92.38±7.19)%vs(32.14±17.64)%,P<0.05]、NKp44[(74.26±16.28)%vs(1.94±1.60)%,P<0.05]、NKG2D[(98.58±1.28)%vs(66.50±24.84)%,P<0.05]的表达率均显著升高,CD16表达率显著降低[(85.12±7.66)%vs(95.60±2.53)%,P<0.05];NKT细胞、T细胞表面活化受体DNAM-1和NKG2D明显升高(P<0.05)。总扩增产物、NK细胞和NKT细胞对HLA不匹配的靶肿瘤细胞的杀伤率均显著高于HLA匹配靶细胞系的杀伤(P<0.05);在共孵育至84 min时,与HLA匹配的靶肿瘤细胞系相比,总扩增产物细胞与HLA不匹配的靶细胞系黏附结合数目显著增多[(4.80±0.53)vs(2.25±0.35)个,P<0.05]。结论:IL-2+IL-15组合方案在扩增NK细胞的同时,也能够有效扩增NKT细胞,即可以扩增CD56+细胞群。并且,扩增产物主要以不受HLA限制的NK细胞杀伤活性为主来杀伤肿瘤细胞。 王晓梦 于津浦 李慧 于文文 任秀宝 曹水关键词:IL-2 IL-15 NK细胞 扩增 乳腺癌 肿瘤诱导的髓系来源抑制细胞中IDO表达相关机制研究 被引量:5 2011年 目的:建立正常CD33^+细胞与肿瘤细胞共培养系统,模拟肿瘤局部髓系来源抑制细胞的诱导过程,观察吲哚胺2,3双加氧酶在MDSCs中表达及其免疫抑制作用,并探讨MDSCs中IDO表达相关机制。方法:免疫磁珠分选健康供者CD33^+细胞,体外与乳腺癌细胞系MDA-MB-231共孵育诱导MDSCs,以单独培养CD33^+细胞为对照组,培养2天后收获实验组MDSCs及对照组CD33^+细胞,流式细胞仪检测细胞表型;实时定量PCR和Western Blotting方法检测TDO和STAT3的表达与活化情况;AnnexinV-FITC的方法检测MDSCs对T细胞促凋亡作用,并观察IDO在MDSCs诱导T细胞凋亡中的作用。结果:正常CD33^+细胞与MDA-MB-231共孵育2天后,出现一群表型为Lin^-CD33^+13^+CD14^- CD15^-的MDSCs,体外诱导的MDSCs中IDOmRNA及蛋白表达增加、STAT3蛋白磷酸化增强,经过STAT3磷酸化抑制剂JSI-124预处理后,MDSCs中IDO蛋白表达明显降低并可诱导高百分比T细胞凋亡,经IDO抑制剂1-MT处理后T细胞凋亡显著降低。结论:体外将乳腺癌细胞系与正常CD33^+细胞共孵育可以诱导出具有独特表型特征和免疫抑制活性的MDSCs,而STAT3磷酸化导致的IDO表达升高可能是MDSCs抑制T细胞功能的主要机制之一。 杜伟娇 于津浦 李慧 李润美 于文文 安秀梅 张乃宁 曹水 任秀宝关键词:乳腺癌 髓系来源抑制细胞 化疗对乳腺癌患者外周血中Treg细胞数目的影响及意义 被引量:7 2008年 目的:研究化疗药物对乳腺癌患者根治术后外周血中Treg(CD4+CD25+调节性T细胞)的影响及意义。方法:采集52例乳腺癌术后患者化疗前1天及化疗后第10天外周静脉血,应用流式细胞技术检测外周血中Treg细胞以及CD3+、CD4+、CD8+T细胞占T淋巴细胞百分比,采用ELLSA法检测外周血中IL-4、IL-10、TGF-β1和IFN-γ的表达水平。结果:化疗后乳腺癌患者外周血中Treg细胞占T淋巴细胞百分比(4.75±1.60)%较化疗前(5.59±1.81)%减少(P<0.05),且与淋巴结有无转移、转移数量以及绝经状态无关(P>0.05)。化疗前后CD3+细胞占T淋巴细胞比例分别为(64.690±7.469)%,(64.357±9.356)%(P>0.05)。化疗前后CD4+T细胞占T淋巴细胞比例分别为(38.048±10.671)%,(36.536±9.664)%(P>0.05)。化疗后CD8+T细胞占T淋巴细胞比例(28.129±10.900)%较化疗前(24.876±6.631)%升高(P<0.05)。化疗后CD4+/CD8+(1.506±0.691)较化疗前(1.680±0.704)降低(P<0.05)。化疗后乳腺癌患者外周血中IL-4、IL-10、TGF-β1浓度较化疗前降低,而IFN-γ浓度增高(P均<0.05)。化疗前后Treg细胞比例变化与细胞因子IL-4、IL-10、TGF-β1和IFN-γ浓度变化无关(P>0.05)。结论:化疗可使乳腺癌患者外周血中Treg细胞占T淋巴细胞比例降低,从而达到治疗肿瘤的效果。 卢晓婷 刘俊田 任秀宝 李慧 于津浦关键词:乳腺癌 调节性T细胞 胃癌患者外周血干扰素水平的变化及其临床意义 被引量:1 2013年 目的:检测胃癌患者外周血各类干扰素(Interferon,IFN)水平,探讨其与临床病理特征的关系。方法:收集天津医科大学附属肿瘤医院胃部肿瘤科2012年3月至2012年5月收治的47例初治胃腺癌患者外周血,以同期收集的25例健康人外周血为对照,ELISA法检测血清中IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IFN-λ1以及IFN-λ2/3含量,分析各类IFN含量与患者性别、年龄、肿瘤分化程度、原发部位及各项生化指标间的相关性。结果:与健康对照相比,IFN-β在Ⅰ、Ⅱ期胃癌中表达升高(P=0.009),IFN-λ1在Ⅲ、Ⅳ期胃癌中表达下降(P<0.001),而IFN-γ和λ2/3在Ⅲ、Ⅳ期胃癌中表达升高(P=0.029;P=0.004)。IFN-α、β含量与肿瘤发生部位有密切关系(P=0.003;P=0.004);IFN-γ与LDH水平密切相关(P=0.013)。结论:胃癌患者外周血中不同IFN亚型呈现不同的表达变化,其变化与胃癌发生部位、分期及LDH水平相关,提示IFN家族成员可能对肿瘤的发生发展发挥各自的作用。 郑雅文 赵华 魏枫 于津浦 李慧 张新伟 任秀宝关键词:干扰素 外周血 胃癌 乳酸脱氢酶