顾昀
- 作品数：10 被引量：14H指数：2
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：浙江省重大科技专项基金公益性行业(农业)科研专项浙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 猪流行性腹泻病毒N重组表达蛋白间接ELISA检测方法建立与应用
- 引言2010年末至今,浙江省部分地区猪场出现暴发性新生仔猪严重腹泻,大批死亡的疫情,给养猪业带来巨大经济损失[1]。用ELISA方法检测血清中病毒抗体水平是临床上常用的方法之一,但到目前为止,ELISA抗体检测方法检测P...
- 顾昀周晓丽袁秀芳杜晓莉徐丽华李军星王一成
- 牛日本血吸虫病抗体检测试纸条的研制及初步评价被引量：6
- 2013年
- 为了建立一种检测牛日本血吸虫病的快速诊断技术,试验以乳胶微球标记的兔抗牛IgG抗体作为免疫探针,以血吸虫可溶性抗原为检测线,羊抗兔IgG为质控线,研制了牛日本血吸虫病抗体检测试纸条。对该试纸条进行了效价、敏感性、特异性、非特异性、保存期、批内批间可重复性及符合率等各项试验,结果表明试纸条的效价为1∶2;对于实验感染日本血吸虫28 d和35～56 d的病牛血清,试纸条的敏感性分别为20%(2/10—检出阳性份数/检测数)和100%(30/30);用于检测健康牛血清的特异性为100%(20/20—检出阴性份数/检测数),检测东毕吸虫、肝片吸虫、锥虫病牛血清,未见交叉反应现象;对于粪孵确诊为血吸虫病阴、阳性的牛血清,试纸条与粪孵法的阴阳性符合率均为100%;与IHA阴阳性符合率也均为100%;试纸条批内批间可重复性好,2～8℃保存的试纸条有效期达15个月。用试纸条检测实验感染血吸虫牛治疗前后体内不同时期血清抗体的水平,发现牛感染血吸虫后第5周的血清均可检测出血吸虫抗体,在治疗后第16～24周血吸虫抗体消失。
- 卢福庄俞国乔周煜阳爱国付媛顾昀董国栋
- 关键词：血吸虫病抗体
- 牛日本血吸虫病抗体检测试纸条的制备及其应用方法
- 本发明公开了一种牛日本血吸虫病抗体检测试纸条的制备及其应用方法，属于动物寄生虫病诊断技术领域。试纸条由样品垫、免疫探针干片、层析膜、吸水纸、PVC基板及箭头标签胶膜与手柄标签胶膜组合而成。免疫探针干片是以聚苯乙烯乳胶微球...
- 卢福庄张雪娟顾昀付媛季敬余冯尚连俞国乔杨玉焕周煜阳爱国董国栋郭莉毛光琼石团员
- 文献传递
- 防控猪高热综合征的中草药饲料添加剂
- 本发明公开了防控猪高热综合征的中草药饲料添加剂，属于饲料添加剂技术领域。该剂主要由当归、白芍、黄芩、艾叶、苍术、山楂、厚朴、陈皮、甘草为原料药按一定重量份配比制备而成。本发明中草药饲料添加剂通过增强猪自身免疫力、提高接种...
- 卢福庄张雪娟季敬余付媛冯尚连华卫东石团员楼洪兴许松顾昀吴建良周彦铨俞国乔
- 文献传递
- 几种新型安全添加剂对断奶兔的影响被引量：2
- 2012年
- 选取96只35日龄新西兰肉兔随机分为4组,每组设3个重复,每个重复8只,在相同的营养水平条件下比较益美多、抗菌肽、溶菌酶对肉兔生长性能的影响,试验期为30 d。结果显示,溶菌酶组的日增重为32.47 g,高于对照组9.81%(P<0.05),其他组间差异不显著;添加益美多、抗菌肽、溶菌酶均能改善肉兔血液生化指标,肠道pH值降低(降低8.60%～9.77%),减少盲肠内大肠杆菌数量(减少10.65%～11.22%),增加盲肠内乳酸杆菌数量(增加11.97%～13.68%);添加溶菌酶、抗菌肽可显著降低肉兔的腹泻率;溶菌酶组的死亡率为0。试验提示,溶菌酶可以作为肉兔新型安全有效的添加剂。
- 程菊芬石团员顾昀徐美英
- 关键词：抗菌肽溶菌酶新西兰肉兔
- 日本血吸虫Sj22.6-LHD-Sj23融合基因的克隆及原核表达被引量：2
- 2010年
- 为获得具有良好抗原性的日本血吸虫重组蛋白,本研究设计了两对特异性引物,以日本血吸虫mRNA为模板,RT-PCR方法分别克隆基因片段Sj22.6ku和LHD-Sj23,以重叠延伸PCR方法将两个片段连接,构建原核重组表达质粒pET28-Sj22.6-LHD-Sj23;该重组质粒在大肠杆菌Rosetta DE3中表达后所获得的融合蛋白Sj22.6-LHD-Sj23分子量约为35 ku。Western blot鉴定结果表明该重组蛋白有良好的免疫原性,为进一步研制日本血吸虫病分子诊断试剂盒奠定了基础。
- 付媛卢福庄石团员顾昀俞国乔陆国林张雪娟
- 关键词：日本血吸虫重叠延伸PCR
- 猪流行性腹泻病毒N重组表达蛋白间接ELISA检测方法建立被引量：3
- 2015年
- 为了检测猪血清中猪流行性腹泻病毒抗体水平,用纯化的猪流行性腹泻病毒N基因重组表达蛋白作为包被抗原,建立了检测猪流行性腹泻病毒抗体的间接ELISA方法。ELISA的最佳工作条件是:抗原包被浓度为0.5μg/m L,包被时间4℃过夜,5%脱脂乳的PBS封闭37℃2 h及4℃过夜。血清稀释度为1∶100;37℃作用45 min,辣根过氧化物酶标记兔抗猪Ig G稀释度为1∶10 000,37℃温育60 min,底物显色37℃15 min。抗体临界值为OD450nm≥0.30判为阳性,OD450nm≤0.27判为阴性,介于二者之间判为可疑。经重复性试验和交叉试验,结果表明,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好。用已建立的ELISA方法检测临床血清样本184份,总阳性率为68.5%。
- 顾昀周晓丽袁秀芳杜晓莉徐丽华李军星方维焕王一成
- 关键词：猪流行性腹泻病毒重组N蛋白ELISA
- 日本血吸虫22.6kD重组抗原二步金标免疫渗滤法诊断家畜血吸虫病的初步研究被引量：1
- 2011年
- 以胶体金标记的日本血吸虫重组抗原GST-Sj22.6为探针,检测家畜血吸虫抗体,建立重组抗原金标免疫渗滤法(RAg-T-DIGFA)。该法可以检测出人工感染血吸虫尾蚴28 d和21 d以上的阳性牛和兔血纸抗体,用该法检测肝片吸虫、蛔虫、弓形虫、旋毛虫病血清抗体,无交叉反应。与T-DIGFA法阳性符合率为100%,阴性符合率为100%。血吸虫抗原胶体金在4～8℃保存期可达6个月、室温保存期为3个月。重组蛋白金标免疫渗滤法具有抗原容易制备和良好的敏感性、特异性、重复性和稳定性,适合于基层单位和现场进行家畜血吸虫病抗体的快速诊断。
- 付媛何永强卢福庄顾昀石团员冯尚连张雪娟
- 关键词：日本血吸虫病
- 免疫层析试纸条监测实验感染日本血吸虫病牛治疗前后抗体消长
- 2012年
- 应用牛日本血吸虫病抗体检测免疫层析试纸条(以下简称试纸条)检测5头牛实验感染日本血吸虫(以下简称血吸虫)后0～10周和治疗后第1～24周的血清抗体。结果表明,牛在感染后第4～5周开始检测到血吸虫抗体,在感染后第8～10周抗体水平达高峰,从治疗后第6周开始,抗体水平逐渐下降,1,2,3,4和5号牛依次在治疗后第24,16,22,20和20周抗体转阴。
- 付媛卢福庄杨玉焕俞国乔顾昀冯尚连石团员贾会娟张雪娟
- 关键词：日本血吸虫黄牛抗体消长试纸条
- 防控猪高热综合征的中草药饲料添加剂
- 本发明公开了防控猪高热综合征的中草药饲料添加剂，属于饲料添加剂技术领域。该剂主要由当归、白芍、黄芩、艾叶、苍术、山楂、厚朴、陈皮、甘草为原料药按一定重量份配比制备而成。本发明中草药饲料添加剂通过增强猪自身免疫力、提高接种...
- 卢福庄张雪娟季敬余付媛冯尚连华卫东石团员楼洪兴许松顾昀吴建良周彦铨俞国乔
