张少斌
- 作品数:97 被引量:416H指数:11
- 供职机构:沈阳农业大学生物科学技术学院更多>>
- 发文基金:辽宁省教育厅科学基金国家重点实验室开放基金辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 拟南芥硝酸盐转运体基因NRT2.1及其编码蛋白与应用
- 本发明属于植物分子生物学与转基因相关技术领域。具体为拟南芥硝酸盐转运体基因NRT2.1耐低氮功能的验证,以及该基因在耐低氮和氮素营养高效植物新品种培育中的应用。本发明以模式植物拟南芥为材料,利用NRT2.1基因T-DNA...
- 徐江徐小栋张少斌东方阳鲁黎明王西瑶迟志海洪雪麻艳超赵明丁在松付金东
- 豌豆肌动蛋白异型体(PEAc1)与绿色荧光蛋白融合基因的原核表达与特性分析被引量:18
- 2004年
- 肌动蛋白普遍存在于真核生物细胞中, 并在细胞生命活动中发挥重要作用. 在细胞中, 肌动蛋白多以异型体(isoform)形式存在. 植物肌动蛋白异型体的大量获得和理化特性分析一直是一个难题. 对豌豆肌动蛋白异型体PEAc1与组氨酸标签(His-tag)、绿色荧光蛋白(GFP)进行了基因融合和原核表达. 通过脲变性、梯度脲透析复性、镍柱亲和层析的方法从包涵体中纯化出大量、高纯度的PEAc1-GFP融合蛋白(> 2 mg/L培养物). 理化特性分析表明, 它同鸡骨骼肌肌动蛋白一样, 单体PEAc1-GFP能与DNaseⅠ 结合并显著抑制后者酶活性; 单体PEAc1-GFP能聚合成带有绿色荧光的丝状结构; 聚合的PEAc1- GFP能被微丝的特异标记物鬼笔环肽(phalloidin)标记; PEAc1-GFP与鸡骨骼肌肌动蛋白的聚合曲线趋势基本一致, 聚合临界浓度为0.24 mmol/L; 聚合的PEAc1-GFP能激活肌球蛋白Mg-ATPase活性, 其激活比率随浓度的增加而增加, 在1 mg/mL浓度下, 能激活4倍以上. 上述结果表明, 带有组氨酸标签和GFP标记的PEAc1表现出和天然肌动蛋白相似的理化特性; 基因融合、原核表达、变性、复性及亲和纯化是获得大量高纯度植物肌动蛋白异型体的有效方法.
- 张少斌任东涛徐小静刘国琴
- 关键词:肌动蛋白原核表达理化性质豌豆绿色荧光蛋白
- 拟南芥硝酸盐转运体基因NRT3.1及其编码蛋白与应用
- 本发明属于植物分子生物学与转基因相关技术领域。具体为拟南芥硝酸盐转运体基因NRT3.1耐低氮功能的验证,以及该基因在耐低氮和氮素营养高效植物新品种培育中的应用。本发明以模式植物拟南芥为材料,利用NRT3.1基因T-DNA...
- 徐江徐小栋东方阳鲁黎明王西瑶张少斌迟志海洪雪麻艳超赵明丁在松付金东
- 螺旋藻藻蓝蛋白在碳酸饮料中的稳定性研究被引量:4
- 2010年
- 采用羟基磷灰石层析的方法从钝顶螺旋藻分离得到藻蓝蛋白,藻蓝蛋白在碳酸饮料中的稳定性研究表明:碳酸饮料中的藻蓝蛋白在低温,弱光,高蛋白浓度,短时间保存条件下稳定性最好。多因素分析表明,对碳酸饮料中藻蓝蛋白稳定性影响的强弱顺序为:温度>保存时间>光强。
- 张少斌梁玉金郭俊美汪澈
- 关键词:螺旋藻藻蓝蛋白碳酸饮料稳定性
- 白桦茸凝集素提取工艺的优化被引量:6
- 2009年
- 对白桦茸凝集素最佳提取工艺进行了研究。以2%兔血细胞凝血效价为指标,确定了最佳提取缓冲液。通过正交试验对料液比、提取时间、提取液pH值、NaCl浓度等因素进行了优化分析并确定了提取工艺的最佳参数组合。结果表明,以TBS和PBS为提取缓冲液所得的白桦茸凝集素凝集效价分别为64、16;最佳提取工艺:液料比为50:1,提取时间为20 h,NaCl浓度为0 mol/L,缓冲液pH值为8.0,按该最佳工艺提取白桦茸凝集素凝血效价为256。所优化的提取工艺稳定、可行,为该凝集素进一步在免疫调节方面的开发应用提供一定基础。
- 刘鹏举曹松屹唐咏苏瑛张少斌
- 关键词:凝集素
- 不同生物质炭对棕壤中磷素吸附解吸的影响被引量:2
- 2023年
- 为了减少土壤磷素流失,提高磷肥利用效率,探究不同生物质炭对棕壤中磷素吸附解吸行为的影响规律,以水稻秸秆、玉米秸秆和花生壳为原材料,利用限氧升温炭化法制备生物质炭,通过批量吸附试验研究了生物质炭种类和生物质炭添加量对棕壤磷吸附解吸的影响。结果表明:水稻秸秆生物质炭在添加量为4 g/kg时显著提高棕壤对磷的吸附量,花生壳生物质炭和玉米秸秆生物质炭则显著降低棕壤对磷的吸附量;吸附等温线表明,不同生物质炭均未改变吸附等温线的变化趋势,均可用Langmuir方程和Freundlich方程进行描述(R^(2)>0.93),其中Langmuir方程拟合效果更好,不同处理对磷的理论吸附量大小顺序为:水稻秸秆生物质炭+棕壤>棕壤>花生壳生物质炭+棕壤>玉米秸秆生物质炭+棕壤;吸附动力学试验表明,不同生物质炭均未改变磷吸附动力学曲线的变化趋势,在所有动力学模型中,准二级动力学模型最适合描述土壤对磷的吸附行为(R^(2)>0.99),其次为准一级动力模型(R^(2)>0.99)和Elovich动力学模型(R^(2)>0.88);3种生物质炭均显著促进棕壤对磷的解吸,当生物质炭添加量为≥2g/kg时,水稻秸秆生物质炭、玉米秸秆生物质炭和花生壳生物质炭,分别可提高棕壤对磷的解析率50%、70%和90%以上。由此可见,不同生物质炭可提高棕壤对磷素的供应和利用,水稻秸秆生物质炭在减少棕壤磷素流失、保护生态环境方面具有更大的应用价值。
- 刘慧张伟康李蒋戈野王青青承睿张少斌
- 关键词:棕壤生物质炭磷吸附解吸
- 豌豆肌动蛋白异型体PEAc3基因的克隆及生物信息学分析被引量:1
- 2012年
- 根据NCBI文库中检索到的序列,采用RT-PCR技术克隆了豌豆肌动蛋白异型体PEAc3完整编码区的cD-NA序列,基因全长1134bp,开放阅读框编码377个氨基酸。氨基酸序列分析表明,该基因的编码蛋白PEAc3为可溶性蛋白,分子量41 668.7Da,没有信号肽部分,呈酸性,PEAc3包括ACTINS_1(编号:PS00406)、ACTINS_ACT_LIKE(编号:PS01132)以及ACTINS_2(编号:PS00432)3组肌动蛋白序列指纹图谱(Signature)。序列同源性分析表明,PEAc3与其它上百种植物肌动蛋白同源性高达89.07%。并讨论了模体中可结合配体的位点与功能之间的联系。
- 张少斌王粲刘慧刘曦
- 关键词:多序列比对
- 生物化学比色法实验教学的改进被引量:4
- 2007年
- 比色法是生物化学实验的重要技术之一,广泛应用于多种物质的定量测定。针对实验原理、步骤设计及结果计算方法中存在的问题,本文提出了改进方法,以使学生更好地理解和运用该技术。
- 张少斌林英刘慧
- 关键词:生物化学比色法
- 粮用豌豆组织培养及植株再生条件优化被引量:1
- 2016年
- 为了豌豆遗传转化及优良品种快速繁殖提供借鉴,进行了豌豆组织培养及植株再生条件试验。结果表明:豌豆的叶柄是诱导愈伤组织的最佳材料,在MS培养基中添加2,4-D(1 mg/L)和BA(0.5mg/L),愈伤诱导率达100%,但愈伤组织在分化培养基中未能分化出芽;豌豆子叶节是芽分化的最佳材料,在分化培养基上可分化出丛生芽,不同激素条件下萌发率均达100%。在MS+ZT(1mg/L)条件下,丛生芽最长;而在MS+BA(10 mg/L)条件下,丛生芽最多。豌豆子叶节丛生芽在MS+IBA(0.5mg/L)培养基上生根率最高,达40%以上,试管苗的移栽成活率为90%以上。
- 刘慧赵依诗吴晨张少斌
- 关键词:豌豆植株再生
- 水通道蛋白结构与功能研究进展被引量:14
- 2007年
- 生物体的主要组成部分是水溶液,约占人体重量的70%。生物体内的水溶液主要由水分子和各种离子组成,它们在细胞膜内外穿梭中实现细胞的多种功能,故水的跨膜转运对维持细胞正常代谢具有重要作用。Agre等发现并证明了一种分子量为28kD的蛋白质是细胞膜转运水的特异性通道蛋白,并将其命名为1号水通道蛋白Aquaporin l(AQP1)。迄今为止,已在哺乳动物体内发现13中水通道蛋白(AQP0-AQP12),前11种水通道蛋白有高度保守的天冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸(Asn-Pro-Ala,NPA)特征性序列,但最近发现的AQP11的天冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸序列保守性较差。水通道的分子结构以AQP1研究最清楚。AQP1在质膜中以四聚体的形式存在,每个单体都由6个贯穿膜两面的长a螺旋构成基本骨架,其间还有两个嵌入但不贯穿膜的短a螺旋。每个单体蛋白的中空部分都形成具有高度选择性的通道,只允许水分子跨膜运输而不允许带电质子或其他离子通过,在功能上都可以作为一个独立水通道。
- 刘树荣张少斌
- 关键词:水通道蛋白生理功能分子结构