孙鹏翔
- 作品数：11 被引量：50H指数：6
- 供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高技术研究计划项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 部分引进猪种α1-岩藻糖转移酶基因多态性研究被引量：4
- 2007年
- 本研究采用PCR-RFLP技术对4个引进猪种杜洛克、约克夏、长白猪和皮特兰共计122头猪的FUT1基因进行了多态性分析。结果表明:4个猪种在该FUT1基因座位存在多态性,但抗性基因型AA仅在杜洛克和皮特兰猪中分布。卡方检验结果表明,长白猪与皮特兰间FUT1基因基因型分布差异极显著,长白猪与杜洛克猪之间差异显著,约克夏与皮特兰间差异也显著。
- 吴圣龙鞠慧萍孙鹏翔包文斌朱国强李碧春谢恺舟陈国宏
- 关键词：引进猪种PCR-RFLP
- 猪皮肤组织块冷冻保存方法的研究被引量：7
- 2008年
- 以二甲基亚砜、甘油和乙二醇为冷冻保护剂,以3种浓度(10%、20%、30%)在2种降温条件下探讨适合猪耳皮肤组织冷冻保存的最适条件和方法以及复苏后对皮肤组织生长能力的影响。结果表明:快速冷冻条件下各处理均无组织块生长。慢速冷冻条件下复苏后组织块的存活率均为100%,各冷冻保护液3种浓度的平均生长率分别为14.29%、56.52%和8.70%,差异显著。20%甘油保护液下采用慢速冷冻方法复苏后组织块的生长率达82.35%,极显著高于其他组和对照组。新鲜和冻存后的细胞培养均采用组织块培养法,EDTA-牛血浆贴覆,97.78%的新鲜样本组织块能较好生长,且扩展能力强。
- 程旭梅倪黎纲吴晓伟孙鹏翔葛剑辉戴建明李碧春
- 关键词：冷冻保存体外培养
- 鸡胚精原干细胞体外保存能力的研究被引量：7
- 2007年
- 采用二酶3步法获取孵化第19 d的鸡胚精原干细胞(SSCs),比较在快速冷冻条件下3种冷冻保护剂(DMSO、乙二醇、甘油)在3个浓度5%、10%、15%条件下对鸡胚精原干细胞的冷冻保存效果进行研究。结果显示:(1)当DMSO的浓度为5%、10%及15%时,复苏后细胞存活率分别为73.1%、88.6%和74.8%,三者差异显著(P<0.05);而10%DMSO保存精原干细胞的存活率、复苏后培养细胞生长和集落形成均显著高于其它2个浓度;当乙二醇浓度为5%、10%和15%时,复苏后细胞存活率分别为69.4%、83.1%和65.2%,三者差异显著(P<0.05);复苏后无论饲养层存在与否,SSCs均能增殖,但未有AKP阳性集落生成;当甘油浓度为5%、10%、15%时,复苏后细胞存活率均小于15%,三者差异不显著(P>0.05);复苏后细胞存活时间极短,仅存活12 h左右;(2)当在10%DMSO浓度条件,复苏后SSCs在有饲养细胞层的条件下,培养5 d形成集落,表明10%DMSO是鸡胚精原干细胞适宜的冷冻保护剂。
- 李碧春周冠月陈国宏孙国波孙鹏翔徐琪刘铁铮
- 关键词：精原干细胞冷冻保存
- 鸡胚原始生殖细胞定向诱导分化成骨细胞的研究
- 2007年
- 探讨体外培养的鸡胚胎原始生殖细胞(EPGCs)的多向分化潜能。分别从发育至19期和28期的鸡胚胎性腺中获取EPGCs,体外培养传代。通过地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C诱导EPGCs向成骨细胞分化,分别进行碱性磷酸酶改良钙钴法染色鉴定、钙结节Von Kossa's染色鉴定和免疫组化鉴定。结果表明:EPGCs被诱导21 d后,定向分化成成骨细胞,诱导率达到80%,碱性磷酸酶改良钙钴法染色、钙结节Von Kossa's染色和免疫组化鉴定均呈阳性,阳性率为75%-85%。由此可得出在诱导条件下,EPGCs体外可定向诱导分化为成骨细胞。
- 葛剑辉孙国波魏彩霞孙鹏翔李碧春
- 关键词：成骨细胞分化
- 藏猪SLA-DRB基因第2外显子PCR-RFLP多态性分析被引量：6
- 2007年
- 采用限制性内切酶RsaⅠ对藏猪SLA-DRB基因外显子2进行多态性分析。结果表明:藏猪SLA-DRB基因外显子2在RsaⅠ-RFLP位点上存在7种基因型,以杂合子BC型居多,基因型频率为0.4419,为优势基因型。χ2适合性检验结果表明,藏猪SLA-DRB基因外显子2的RsaⅠ酶切位点的χ2值为10.14,高于显著水平(P<0.05),说明藏猪SLA-DRB基因在RsaⅠ酶切位点上没有达到Hardy-Weinberg平衡状态。
- 鞠慧萍吴圣龙孙鹏翔包文斌许盛海李碧春陈国宏
- 关键词：藏猪PCR-RFLP
- 鸡胚胎原始生殖细胞转染EGFP基因的研究被引量：1
- 2007年
- 于鸡胚19期分离生殖嵴原始生殖细胞(PGCs),用于体外培养和传代扩增;对其第2代PGCs进行组织化学法鉴定,采用3种转染方法以增强型绿色荧光蛋白转染PGCs,并对电穿孔方法转染条件进行优化,荧光显微镜下计数细胞,分析PGCs转染效率,探讨有效的转染方法及其优化条件。结果表明:电穿孔方法可获得较高的转染效率,其最优化条件:电场强度为280 V,时间常数为60μs,质粒浓度为15μg.mL-1,转染后室温静置10 min。
- 孙鹏翔陈昊葛剑辉孙国波余飞陈国宏赵文明李碧春
- 关键词：鸡胚胎原始生殖细胞增强型绿色荧光蛋白转染
- 鸡胚精原干细胞定向诱导分化为成骨细胞的初探被引量：1
- 2007年
- 研究体外定向诱导鸡胚精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSCs)向成骨细胞分化的能力。采用地塞米松+β-磷酸甘油钠+维生素C组成的诱导液对鸡胚精原干细胞进行诱导,利用Von Kossa’s法、改良的钙钴法及免疫组化I型胶原(CollagenⅠ)进行成骨细胞特性鉴定。结果表明:诱导后成骨细胞形成率达到82%,诱导后的细胞经Von Kossa’s染色可见细胞间布满黑色颗粒,提示有矿化基质沉积;改良钙钴法碱性磷酸酶染色胞浆呈深棕色或深黑色,免疫组化法染色细胞呈阳性。因此可以得出:鸡精原干细胞(SSCs)具有向成骨细胞分化的能力。
- 孙国波葛剑辉魏彩霞孙鹏翔戴建明李碧春
- 关键词：精原干细胞成骨细胞分化
- 苏太猪FUT1基因多态性及其与生产性能的关联分析被引量：9
- 2007年
- 采用PCR-RFLP方法对苏太猪FUT1基因多态性进行分析。结果表明:苏太猪FUT1基因开放阅读框307位点经Hin6Ⅰ酶切后,产生GG型和AG型,不存在抗性纯合子AA型。分析这两种基因型与苏太猪生产性能间的相关性,结果表明:AG型个体平均生产性能均高于GG型个体,且AG型个体的1胎断奶窝重、2胎断奶窝重、3胎总产仔数和6胎断奶窝重显著(P<0.05)高于GG型个体,对一些生产性状而言,AG型是有益基因型。
- 孙鹏翔吴圣龙包文斌李碧春陈国宏
- 关键词：FUT1基因
- 鸡胚精原细胞体外转染EGFP方法的比较
- 2008年
- 以增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)为报告基因体外转染鸡胚胎精原细胞(Chicken embryonic spermatogonial cells,CESCs),比较磷酸钙、脂质体(梭华-Sofast)、电穿孔3种方法转染EGFP的效率,以获得高效的体外转染方法。本研究分离孵化16 d的鸡胚睾丸,获取CESCs,体外培养和传代扩增,传至第2代后进行碱性磷酸酶(AKP)活性和阶段特异性表面抗原-1(Stage specific embryonic antigen-1,SSEA-1)免疫荧光鉴定。运用磷酸钙、脂质体(梭华-Sofast)、电穿孔3种方法体外转染第2代CESCs,荧光细胞计数法分析转染效率。结果表明:与磷酸钙法、脂质体法相比,电穿孔法可获得更高的细胞成活率和转染率(68%vs39%、65%,19.70%vs2.92%、9.73%),差异显著(P<0.05)。因此得出,电穿孔法是将外源基因导入鸡胚精原细胞的适宜方法。
- 余飞孙国波孙鹏翔何先红倪黎纲李碧春
- 关键词：精原细胞增强型绿色荧光蛋白体外转染
- 肉用中型仔鹅能量和蛋白质需要量的研究被引量：9
- 2006年
- 将93只初生雏鹅（公母各半）随机分为3组，分别饲以高、中、低不同营养水平的日粮。各组的饲养管理争件一致，均以全价配合饲料舍饲，自由采食。结果表明：①各生长阶段各组平均生长速度以Ⅲ组为最优。与其它组间的差异显著，G值分别为育雏期0．317、生长期0．432、肥育期0．415；②总体上各营养水平组间料重比差异不大。约3．8～4．0：1；③屠宰性能测定。屠宰性能组间及性别间差异不显著。屠宰率：85．9％，半净膛率：82．6％，全净膛率：76．0％；④中型仔鹅营养需要。1～2周龄．ME：11．6MJ／kg，CP：19％为宜；3—4周龄，ME：11MJ／kg，CP：18％为宜；5～8周龄，ME：10．7MJ／kg，CP：15％；9-10周龄，ME：11MJ／kg，CP：14％为宜。
- 马国龙孙鹏翔
- 关键词：代谢能蛋白质营养水平
