张亚丽 作品数:10 被引量:49 H指数:6 供职机构: 中国农业科学院茶叶研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 浙江省“钱江人才”计划项目 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 理学 更多>>
基于表达序列标签(EST)策略的茶树分子生物学研究 表达序列标签是在人类基因组计划实施过程中,由美国国立卫生研究院生物学家Venter提出的发现基因的新战略。EST技术已被广泛应用于新基因的克隆、组织特异性基因表达谱分析以及基因组序列的功能注释等许多研究领域,它已成为大规... 陈亮 赵丽萍 马春雷 张亚丽关键词:茶树 CDNA文库 表达序列标签 基因表达谱 RACE 文献传递 茶树ACC合成酶基因全长cDNA的克隆及其生物信息学分析 被引量:6 2008年 乙烯是一种重要的植物激素,参与植物许多生理过程。ACC(1-氨基环丙烷-1-羧酸)合成酶(ACS)是植物乙烯合成过程中的限速酶,对乙烯的合成具有重要的调控作用。利用其它植物ACS基因的保守序列设计兼并引物,采用RACE(Rapid Amplificationc DNA Ends)和RT-PCR等技术,克隆得到编码茶树ACS基因的全长cDNA序列,长1579bp,编码478个氨基酸,预测分子量约为53.7kD,等电点8.039,GenBank登录为EF205149。以Neighbor-Joining法构建进化树,发现茶树ACS基因与柿树中的同类基因亲缘关系最近。茶树ACS基因的克隆为从分子水平认识乙烯在茶树上的生理作用奠定了基础。 张亚丽 乔小燕 陈亮关键词:茶树 ACC合成酶 克隆 生物信息学 茶树ACC氧化酶基因全长cDNA的克隆与表达分析 被引量:13 2008年 ACC(1-氨基环丙烷-1-羧酸)氧化酶是植物乙烯合成过程中的关键酶之一,对乙烯的合成具有重要的调控作用。在茶树新梢cDNA文库测序所获得ESTs基础上,利用RT-PCR技术,克隆得到编码ACC氧化酶基因的全长序列,GenBank登录号为DQ904328。该基因长1232bp,编码320个氨基酸残基,预测分子量为36.2kD,等电点5.41。多序列联配表明茶树ACC氧化酶具有高度保守区域,基于邻接法的进化树显示与柿树ACC氧化酶的亲缘关系最近。对经高、低温后的不同品种进行RT-PCR分析,结果发现ACC氧化酶基因的表达量与品种的抗逆性有一定的相关性。 张亚丽 乔小燕 陈亮关键词:茶树 乙烯 ACC氧化酶 基因克隆 反相高效液相色谱法测定茶叶中β-胡萝卜素含量 被引量:7 2006年 为了解茶叶中β-胡萝卜素(β-carotene)的含量,建立了用反相高效液相色谱测定茶叶中β-胡萝卜素含量的方法。样品先用丙酮浸提,真空旋转蒸干,再加乙醚和甲醇-氢氧化钾低温避光皂3h,然后用10%氯化钠萃取,乙醚相真空旋转蒸干,最后溶解于甲醇:乙酸乙酯混合液(1:1)。色谱方法如下:HypersilC18ODS柱,流动相为丙酮和水,梯度洗脱,检测波长为450nm。结果表明,该方法重现性好,平均加样回收率为99.2%,RSD为4.5%。用该方法测定了同一茶树品种不同部位叶片和不同季节一芽二叶的β-胡萝卜素含量,表明茶树叶片的β-胡萝卜素含量是成熟叶高于幼嫩叶片,夏秋季高于春季。 王新超 陈亮 赵丽萍 马春雷 张亚丽 梅菊芬 姚明哲关键词:高效液相色谱法 Β-胡萝卜素 茶叶 基于表达序列标签(EST)策略的茶树分子生物学研究 <正>表达序列标签是在人类基因组计划实施过程中,由美国国立卫生研究院生物学家 Venter 提出的发现基因的新战略。EST 技术已被广泛应用于新基因的克隆、组织特异性基因表达谱分析以及基因组序列的功能注释等许多研究领域,... 陈亮 赵丽萍 马春雷 张亚丽关键词:茶树 表达序列标签 基因表达谱 RACE 文献传递 茶树亲环素基因cDNA全长的分析鉴定与原核表达 被引量:8 2007年 通过对茶树新梢cDNA文库大量随机测序,获得了一个编码亲环素的全长基因,在GenBank登录,登录号为DQ904327。茶树亲环素基因cDNA全长949bp,其中开放阅读框全长495bp,编码蛋白质含有164个氨基酸,分子量约为17.47kD,等电点约为8.54,它具备5’端非编码区的“CAAT”标志及3’端非编码区的”AATAAA”poly-A加尾信号。其推测的氨基酸序列经与26条其他生物亲环素蛋白氨基酸序列进行CLUSTALW多序列联配并以Neighbor-Joining法进行进化树构建后,发现与水稻和小麦的相似性较高,达到85%以上。根据亲环素基因开放阅读框序列设计引物,构建了原核表达载体pET/Csin-Cyp,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功诱导出了一个分子量为23kD的亲环素融合蛋白。 张亚丽 赵丽萍 马春雷 陈亮关键词:茶树 原核表达 茶树查尔酮异构酶基因克隆及序列分析 被引量:14 2007年 茶叶是世界上最流行的无酒精饮品之一,含有许多有价值的次生代谢产物,如儿茶素类物质。分离和克隆重要的茶树功能基因,对利用基因工程技术进行茶树遗传调控具有重要意义。本文采用EST测序技术和T4RNA连接酶介导的5′RACE技术,获得了一个茶树儿茶素代谢中的重要基因—查尔酮异构酶(CHI)基因,在GenBank登录(DQ904329),其序列全长1163bp,其中开放阅读框长723bp,编码240个氨基酸,3′端有一个明显的多聚腺苷酸加尾信号,推测的蛋白分子量约为26.4kD,理论等电点为5.19。序列分析表明它与番茄CHI基因序列的亲缘关系比较近。 马春雷 赵丽萍 张亚丽 陈亮关键词:茶树 查尔酮异构酶 基因克隆 茶树ACS、ACO基因克隆与亲环素基因的鉴定及其表达分析 乙烯是一种重要的植物激素,参与植物整个生理过程。ACC合成酶/(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid synthase,ACS/)和ACC氧化酶/(1-aminocyclopropa... 张亚丽关键词:ACO ACS 茶树 基因克隆 亲环素 原核表达 文献传递 高含量β-胡萝卜素茶树资源的初步筛选 建立了用反相高效液相色谱测定茶叶中β-胡萝卜素含量的简便方法。样品先用丙酮浸提,真空旋转蒸干,再加乙醚和甲醇-氢氧化钾低温避光皂化3 h,然后用10%氯化钠萃取,乙醚相真空旋转蒸干。最后溶解于甲醇:乙酸乙酯混合液(1:1... 王新超 陈亮 马春雷 张亚丽 梅菊芬 赵丽萍 姚明哲关键词:高效液相色谱法 Β-胡萝卜素 茶叶 文献传递 基于表达序列标签(EST)策略的茶树分子生物学研究 表达序列标签是在人类基因组计划实施过程中,由美国国立卫生研究院生物学家Venter提出的发现基因的新战略。EST技术已被广泛应用于新基因的克隆、组织特异性基因表达谱分析以及基因组序列的功能注释等许多研究领域,它已成为大规... 陈亮 赵丽萍 马春雷 张亚丽关键词:茶树 CDNA文库 表达序列标签 基因表达谱 分子生物学 文献传递