姚辉
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中南大学更多>>
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- 抗人骨桥蛋白单克隆抗体制备及其特异性研究
- 骨桥蛋白/(osteopontin, OPN/),是一种在多种组织和细胞广泛表达的磷酸化糖蛋白。OPN具有多种生物学功能,特别是OPN与自身免疫,肿瘤的生长和转移有密切的关系。
目的：制备人骨桥蛋白/(ost...
- 姚辉
- 关键词：骨桥蛋白原核表达单克隆抗体
- 文献传递
- 抗人骨桥蛋白单克隆抗体制备及其特异性研究
- 2010年
- 利用RT-PCR技术克隆人骨桥蛋白(hOPN)基因,构建OPN原核表达质粒pET-32a(+)-hOPN,转化BL21菌株,经IPTG诱导表达重组人骨桥蛋白(rhOPN).以纯化的rhOPN为免疫原,免疫BABL/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞NS1融合.通过有限稀释法进行克隆和间接ELISA筛选,获得抗人OPN蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株,以ELISA、Western blot对抗体特异性进行鉴定.通过竞争抑制试验对单克隆抗体识别抗原位点进行分析.结果共获得2株抗人OPN单克隆抗体,分别命名为8F1和2B5,亚型测定皆为IgG1.通过细胞侵袭抑制试验检测,2株抗人OPN mAb皆能很好地抑制细胞迁移.本研究成功获得了抗人骨桥蛋白的特异性单克隆抗体,为进一步研究OPN蛋白在自身免疫病和肿瘤中的功能提供了重要的工具.
- 姚辉聂新民黄作良
- 关键词：骨桥蛋白原核表达单克隆抗体
