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HLA-A*0201转基因小鼠侵袭性肺曲霉病模型的建立与鉴定被引量：1: 2014年; 【目的】建立HLA-A*0201转基因小鼠侵袭性肺曲霉病模型,并进行实验室鉴定。【方法】在真菌孢子感染前,给予HLA-A*0201转基因小鼠腹腔注射环磷酰胺。乙醚麻醉后,小鼠经鼻腔吸入3组不同浓度的(3×106、3×107、3×108mL-1)烟曲霉孢子悬液。阴性对照组小鼠吸入PBS。感染后36 h,处死各组小鼠,取肺组织病理行HE、PAS以及GMS染色分析,以验证感染是否成功并计算肺侵袭性肺烟曲霉感染小鼠模型成模率。肺组织研磨涂皿后行菌落计数,分析小鼠肺烟曲霉负载量。【结果】小鼠肺组织病理检查显示,正常肺组织结构遭到显著破坏,大量菌丝生长并可见菌丝侵犯血管现象,证实侵袭性肺曲霉病模型造模成功。在免疫抑制的方法和条件恒定时,3种孢子浓度由低到高成模率分别为36.7%、76.7%、96.7%。各实验组成模小鼠肺组织研磨液在PDA培养基上均有大量烟曲霉菌落生长,未感染小鼠组未见烟曲霉菌落生长。【结论】成功建立HLA-A*0201转基因小鼠侵袭性肺曲霉病模型,在免疫抑制的方法和条件恒定时,模型成模率与接种孢子悬液的浓度成正比,采用高浓度的孢子悬液(3×108mL-1)时,可以达到较高的成模率。; 赵作涛孙铮李丽丽万喆朱平李若瑜; 关键词：烟曲霉侵袭性肺曲霉病环磷酰胺

烟曲霉抗原肽特异性CTL对侵袭性肺曲霉病转人基因小鼠的过继免疫治疗研究: 【背景】近年来,临床上免疫受损患者日益增多,病原真菌机会性感染的发病率和病死率在全球范围内呈急剧上升趋势。烟曲霉是环境中一种重要的人类机会性致病真菌,常引起侵袭性曲霉病(IA),造成多系统器官的感染,病情危重,病死率极高...; 孙铮赵作涛朱平李若瑜; 文献传递

体外制备和增殖烟曲霉特异性T细胞的研究被引量：7: 2010年; 目的体外制备和增殖烟曲霉特异性T淋巴细胞。方法从健康志愿者外周抗凝血中分离并体外扩增DC,利用加热灭活的烟曲霉孢子作为抗原,体外共孵育制备烟曲霉孢子负载的DC,进一步将此成熟DC与源自同一个体的去除了DC细胞的外周血细胞共培养,体外诱导并扩增烟曲霉特异性T淋巴细胞。应用ELISPOT(酶联免疫斑点)技术检测活化T细胞IFN-γ的分泌情况,流式细胞仪检测细胞因子胞内合成情况,并分析功能细胞的类型和比例。结果 ELISPOT分析显示:PBMC+DC+Conidia实验组IFN-γ分泌(87.33±1.33/4.0×105)高于其他对照组,具有统计学意义(P<0.05)。细胞因子流式细胞仪分析显示:PBMC+DC+Conidia组中,2.76%的细胞分泌IFN-γ,其中1.61%为CD4+T细胞,与各对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。获得的烟曲霉特异性T细胞可以在体外可进行大量增殖。结论本文结果显示烟曲霉孢子在体外可以作为变应原诱导产生烟曲霉特异性CD4+T细胞介导的Th1型免疫反应,为未来制备和扩增烟曲霉特异性T细胞及过继免疫治疗侵袭性曲霉病提供实验基础。; 赵作涛孙铮万喆王晓红李若瑜; 关键词：烟曲霉侵袭性曲霉病 Γ-干扰素

烟曲霉感染的宿主防御机制以及相关免疫学研究进展被引量：5: 2010年; 随着免疫抑制剂广泛应用和免疫抑制患者的不断增多,由烟曲霉引起的侵袭性感染病例逐渐增加,越来越引起医学界的关注。本文特此对烟曲霉感染的宿主防御机制以及免疫学研究进展作一综述。; 孙铮赵作涛万喆李若瑜; 关键词：烟曲霉真菌感染侵袭性曲霉病免疫抑制免疫学研究

烟曲霉抗原Asp f16 HLA-A~* 0201限制性的CD8^+ CTL抗原表位生物信息学预测与实验室鉴定被引量：2: 2011年; 目的预测与鉴定烟曲霉抗原Asp f16的HLA-A*0201限制性CD8+细胞毒性T细胞(CTL)抗原表位。方法以国人常见的HLA-A*0201位点为靶点,依据生物信息学软件扫描烟曲霉特异性抗原Asp f16的全部427个氨基酸序列。使用HLA-A*0201转基因小鼠制备骨髓来源的树突状细胞(DC)和CTL。流式细胞仪技术检测DC表面MHC II类抗原,CD80,CD86和CD11c的表达来验证其是否成熟。ELISPOT试验检测烟曲霉抗原多肽特异性CTL产生的细胞因子IFN-γ。四聚体(Tetramer)试验证实烟曲霉特异性CTL与抗原肽,HLA-A*0201分子复合体的亲和性。结果根据与MHC I类分子结合的半衰期评分,选择了3个HLA-A*0201限制性抗原表位。流式细胞仪分析示成熟DC高表达HLA II类抗原,CD80,CD86和CD11c。Tetramer试验证实烟曲霉特异性T细胞受体与抗原肽,HLA-A*0201分子复合体的高亲和性。ELISPOT实验结果表明烟曲霉抗原肽体外可以活化CD8+CTL,被负载了抗原肽的DC刺激活化后可以产生IFN-γ。结论本研究成功鉴定烟曲霉抗原Asp f16的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,可作为疫苗设计的候选表位,为进一步研发新型抗烟曲霉疫苗提供参考。; 赵作涛孙铮万喆朱平李若瑜; 关键词：烟曲霉 ASP F16 抗原表位

多肽混合物、T细胞疫苗及其应用: 本发明涉及免疫学领域，具体涉及一种多肽混合物、所述多肽混合物活化的T细胞及其在制备预防或治疗烟曲霉引起疾病的药物中的应用。所述多肽混合物含有三种多肽，其氨基酸序列分别如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2或SE...; 赵作涛孙铮李若瑜; 文献传递

肝脏的真菌感染被引量：3: 2009年; 随着免疫抑制剂应用的增多,肝脏的真菌感染病例逐渐增加,越来越引起医学界的关注,现对肝脏常见的真菌感染的病因,临床表现,诊断以及治疗作一综述。; 孙铮赵作涛李若瑜; 关键词：肝脏真菌感染免疫抑制

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孙铮