王学祥
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：苏州大学唐仲英血液学研究中心更多>>
- 发文基金：青岛市公共领域科技支撑计划项目国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 靶向VEGF siRNA联合5-FU对人乳腺癌MCF-7荷瘤裸鼠的作用被引量：3
- 2017年
- 目的探讨慢病毒介导靶向VEGF小干扰RNA(siRNA)联合应用5-氟尿嘧啶(5-FU)对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞荷瘤裸鼠的作用。方法 (1)以携带VEGF siRNA序列的慢病毒重组载体(VEGF-RNAi-Lv)及无义序列的慢病毒重组载体(NC-Lv)分别感染正常MCF-7细胞,Western blot检测各组细胞VEGF蛋白表达量。(2)30只SPF级雌性裸鼠随机分成五组:正常对照组(接种正常MCF-7细胞)、NC-Lv阴性组(接种已感染NC-Lv的MCF-7细胞)、VEGF-siRNA组(接种已感染VEGF-RNAi-Lv的MCF-7细胞)、5-FU组(接种正常MCF-7细胞,腹腔注射5-FU20mg·kg^(-1)·3d^(-1))及VEGF-siRNA+5-FU组(接种已感染VEGF-RNAi-Lv的MCF-7细胞,腹腔注射5-FU 20mg·kg^(-1)·3d^(-1)),测量肿瘤生长曲线;提取各组移植瘤组织的总蛋白,Western blot检测VEGF、p53和Bcl-2蛋白表达量。结果与正常对照组细胞相比,VEGF-siRNA组细胞VEGF蛋白水平降低(P<0.01),NC-Lv阴性组细胞VEGF蛋白水平相近(P>0.05)。与正常对照组和NC-Lv阴性组裸鼠肿瘤生长速度相比,VEGF-siRNA组、5-FU组和VEGF-siRNA+5-FU组肿瘤生长缓慢(P<0.05或P<0.01)。与正常对照组和NC-Lv阴性组相比,VEGF-siRNA组、5-FU组及VEGF-siRNA+5-FU组VEGF、Bcl-2蛋白水平降低,p53蛋白水平升高(P<0.05或P<0.01)。结论慢病毒介导的siRNA显著降低人乳腺癌细胞VEGF基因的表达,抑制乳腺肿瘤的生长并诱导细胞的凋亡,提高了乳腺癌细胞对5-FU的敏感性。
- 刘小梅张诚霖殷荣平郑曦晨房兆续胡海天王学祥
- 关键词：核糖核酸干扰乳腺癌5-氟尿嘧啶
- 小鼠骨髓间充质干细胞联合IL-12重组质粒对小鼠乳腺癌的治疗作用被引量：2
- 2014年
- 目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)对小鼠乳腺癌EMT6细胞在体内外的抑制作用以及BMSC与IL-12真核表达质粒(pcDNA6/IL-12)联合应用对荷瘤小鼠的治疗作用。方法全骨髓贴壁法培养BMSC并鉴定;CCK-8法检测BMSC条件培养基对EMT6细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/7-AAD双染色结合流式细胞术检测BMSC条件培养基对EMT6细胞凋亡的影响。建立小鼠乳腺癌荷瘤模型,分别为对照组(瘤内注射PBS)、BMSC组(瘤内注射BMSC)、IL-12组(瘤内注射pcDNA6/IL-12质粒)、BMSC联合IL-12组(瘤内注射BMSC和pcDNA6/IL-12质粒)。于致瘤后第17天处死小鼠,取出肿瘤和脾脏并称其质量,计算脾指数;MTT法检测脾淋巴细胞增殖活性,LDH法检测脾淋巴细胞杀伤活性,HE染色观察肿瘤组织的病理学改变。结果 BMSC条件培养基在体外可显著抑制EMT6的增殖并促进其凋亡(P<0.05﹚。BMSC单独及其与pcDNA6/IL-12联合应用可导致荷瘤小鼠肿瘤的体积缩小(P<0.01﹚,脾淋巴细胞增生反应及杀伤活性增强(P<0.05﹚,肿瘤组织坏死区扩大、炎性细胞浸润增多。结论 BMSC在体内外均具有良好的抗肿瘤作用,与pcDNA6/IL-12在荷瘤小鼠体内联合应用可获得更强的抗肿瘤活性。
- 王明翠张文卿于红王学祥初晓张艳丽李斌
- 关键词：小鼠乳腺癌骨髓间充质干细胞
- 靶向VEGFsiRNA对人乳腺癌细胞的抑制作用观察被引量：1
- 2013年
- 目的观察慢病毒介导靶向血管内皮生长因子(VEGF)小干扰RNA(siRNA)对人乳腺癌细胞MCF-7的抑制作用。方法以携带VEGF siRNA序列的慢病毒重组载体感染正常的MCF-7细胞,经反复实验优化,确定感染条件;提取各组细胞的总RNA和蛋白,利用RT-PCR、Western blot法分别检测VEGF mRNA及其蛋白;利用细胞增殖及细胞毒性实验检测细胞增殖抑制率。结果 VEGF siRNA慢病毒对MCF-7细胞的感染率达90%以上。与正常对照组相比,慢病毒RNA干扰组细胞的VEGF mRNA及其蛋白表达水平明显下调(P均<0.05),而阴性对照组无明显变化(P均>0.05);慢病毒RNA干扰组的细胞生长缓慢,细胞增殖抑制率显著高于阴性对照组(P<0.05)。结论靶向VEGF siRNA显著抑制人乳腺癌细胞VEGF的表达,并抑制人乳腺癌细胞的增殖。
- 王学祥于红王明翠张文卿吴琦
- 关键词：血管内皮生长因子RNA干扰乳腺癌细胞细胞增殖
- 靶向VEGF的siRNA协同5-FU抑制人乳腺癌细胞的实验研究
- 目的:探讨慢病毒介导靶向VEGF小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡和凋亡通路中基因表达的影响，以及联合应用抗癌药5-氟尿嘧啶的协同作用。
方法:...
- 王学祥
- 关键词：血管内皮生长因子RNA干扰
- 文献传递
- 靶向VEGF小干扰RNA协同5-FU诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡机制的研究被引量：3
- 2015年
- 探讨慢病毒介导的靶向VEGF小干扰RNA联合应用化疗药物5-FU诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的机制。以携带VEGF siRNA的慢病毒载体感染MCF-7细胞,应用RT-PCR和Western blot分别检测各组VEGF mRNA、VEGF蛋白及凋亡相关蛋白的表达,流式细胞术检测细胞凋亡。结果表明,慢病毒VEGF siRNA干扰组细胞VEGF mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组,凋亡相关蛋白P53及P21表达上调,而SIRT1、Bcl-2及Survivin表达下调。流式细胞术检测显示慢病毒干扰组及5-FU组细胞凋亡率显著升高,联合治疗组的协同作用更为明显。上述结果表明:慢病毒介导的RNA干扰能明显抑制MCF-7细胞VEGF的表达,通过下调SIRTI蛋白的表达,导致P53蛋白表达上调,并调控其下游P21、bcl-2和Survivin的表达,从而诱导MCF-7细胞的凋亡,并且提高了MCF-7对5-FU的敏感性。
- 王誉静王学祥于红王静张文卿
- 关键词：VEGFRNA干扰乳腺癌细胞5-FU
