张其刚
- 作品数:3 被引量:13H指数:1
- 供职机构:华东理工大学生物工程学院更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目国家科技支撑计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学医药卫生农业科学更多>>
- 基于PGM-MB检测不同食品基质中诺如病毒的技术研究
- 诺如病毒(Noroviruses)是一组杯状病毒属病毒,主要通过粪-口途径传播。本研究以HBGA-PGM技术,采用猪胃粘蛋白偶联磁珠(PGM-MB)富集诺如病毒,对不同食品基质样品的洗脱缓冲液进行了选择并建立了PGM-M...
- 张其刚
- 关键词:食品基质诺如病毒
- 文献传递
- 转基因油菜RT73品系特异性检测标准分子协同实验验证
- 2011年
- 对构建的适于转基因油菜RT73品系特异性检测标准分子pEASY-RT73在普通PCR和实时荧光PCR检测中的适用性进行了实验室间协同实验验证。对8家实验室结果的统计分析表明,标准分子pEASY-RT73对转基因油菜RT73品系特异性检测及油菜内源基因HMG和PEP检测具有高特异性。在普通PCR扩增中,标准分子对PEP和RT73品系特异性序列的检测下限均为20拷贝,对HMG基因的检测下限为50拷贝;在实时荧光PCR扩增中,HMG和RT73品系特异性序列的检测下限均为10拷贝,PEP检测下限为50拷贝。虽然各实验室所用仪器和试剂有较大差异,但对检测结果影响不大。因此,标准分子pEASY-RT73可稳定的作为新型标准物质用于转基因油菜RT73品系特异性普通PCR和实时荧光PCR检测。
- 李想褚庆华高琴吕蓉潘良文李俊毅张其刚
- 关键词:实时荧光PCR
- 猪胃黏蛋白偶联磁珠和聚乙二醇富集检测青葱和葡萄中诺如病毒的比较研究被引量:12
- 2012年
- 目的:以青葱与葡萄为材料,建立以猪胃黏蛋白偶联磁珠(PGM-MB)和聚乙二醇8000(PEG8000)富集检测水果、蔬菜中诺如病毒的方法。方法:确定病毒原液中的相对病毒量,梯度稀释病毒原液并进行实时荧光-聚合酶链式反应检测,以每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数值与病毒量(实时荧光-聚合酶链式反应单位数)的常用对数值绘制标准曲线和线性方程;人工接种诺如病毒于青葱与葡萄表面,洗脱后,分别用PEG8000和PGM-MB富集诺如病毒,实时荧光-聚合酶链式反应扩增,用标准曲线对回收的病毒进行相对定量。结果:基质为青葱时,高接种量条件下,两种富集方法的病毒回收效果相当,低接种量下,PGM-MB法的富集回收率高于PEG8000法,且PGM-MB的检测下限更低;基质为葡萄时,PGM-MB法的富集回收率均高于PEG8000法,且检测下限更低。结论:PGM-MB富集效果良好,快速方便,适合应用于水果和蔬菜中的诺如病毒的富集检测。
- 张其刚潘良文李想方筠TIAN Peng
- 关键词:诺如病毒