- 单个囊泡kiss-and-run过程中磷脂分子PI(4,5)P2的动态变化
- 囊泡是真核细胞内部的重要细胞器之一,例如,在神经突触中存在大量的突触囊泡,在神经内分泌腺体中存在大量的分泌囊泡。囊泡与细胞膜的融合导致了囊泡内贮存物质的释放,这对于神经系统以及神经内分泌系统的正常运行是必需的。本研究利用...
- 赵伟东杨佳琳崔殿臣张雪薇
- 关键词：胞吐胞吞KISS-AND-RUN磷脂酰肌醇活细胞成像
- 肌动蛋白亚型在巨噬细胞吞噬脑膜炎大肠杆菌中的作用被引量：1
- 2020年
- 该研究利用诱导后的THP-1单核细胞系作为巨噬细胞的模式细胞,鉴定了在巨噬细胞中表达的肌动蛋白亚型,发现β-肌动蛋白和γ-肌动蛋白在巨噬细胞中表达;接着利用共聚焦显微成像发现,β-肌动蛋白和γ-肌动蛋白在巨噬细胞受到脑膜炎大肠杆菌感染时均出现了不同程度的聚集;进一步利用RNA干扰技术实现了对巨噬细胞中的β-肌动蛋白和γ-肌动蛋白的特异性下调,并发现单独下调β-肌动蛋白和γ-肌动蛋白以及联合下调β-和γ-肌动蛋白都使得巨噬细胞吞噬脑膜炎大肠杆菌的能力呈明显下降。这些结果表明,不同亚型的肌动蛋白在巨噬细胞吞噬脑膜炎大肠杆菌过程中发挥着重要作用。
- 赵文心马岚杨雪婷李晶莹杜书嵩张雪薇赵伟东
- 关键词：巨噬细胞Β-肌动蛋白
- M_2-G_(i1α)融合蛋白在Sf9细胞中的表达及M_2AChR特异性药物的鉴别
- 2010年
- 目的通过杆状病毒-Sf9细胞系统表达M2-Gi1α融合蛋白,并利用M2-Gi1α融合蛋白为工具筛选毒蕈碱性乙酰胆碱受体亚型2(M2AChR)特异性配体,探讨M2-Gi1α融合蛋白中两组分相互作用的机制。方法通过两步PCR反应建立M2AChR与Gi1α融合cDNAs,并在Sf9昆虫细胞中表达M2-Gi1α融合蛋白。通过[3H]羟苯二乙酸奎宁酯([3H]QNB)配体饱和结合实验及[35S]GTPγS竞争性替代结合实验,检测M2-Gi1α融合蛋白表达水平,并筛选M2AChR的特异性配体。结果 M2-Gi1α融合蛋白的表达水平为(8.44±0.39)nmol·g-1膜蛋白。不同配体使M2-Gi1α融合蛋白中Gi1α与GDP的亲和力发生变化,乙酰胆碱、氧化震颤素、槟榔碱、阿托品、fangchinoline、levitimide的IC50值分别为:21.35,23.86,11.91,0.13,1.05,1.75μmol·L-1,无配体存在时为2.50μmol·L-1。结论杆状病毒-Sf9细胞表达系统表达的M2-Gi1α融合蛋白具备M受体与配体结合的特性和组分间的耦联功能,通过检测GDP亲和力的大小有利于筛选和鉴别M2受体亚型特异性药物。
- 张雪薇郭政东白立川姜爱民孙科
- 关键词：融合蛋白G蛋白耦联受体拮抗剂
- m_3AChR-G_(11α)融合蛋白表达及功能检测
- 2010年
- 目的制备m3AChR-G11α融合蛋白,探索m3AChR与G11间的偶联功能、相互作用及其影响因素。方法通过应用两步PCR方法构建m3AChR-G11α融重组的cDNAs,并在Baculovirus-infected Insect cells(Sf9)细胞内表达m3AChR-G11α融合蛋白。BCA法测定Sf9细胞表达的膜蛋白总含量,[3H]QNB和[35S]GTPγS放射性配体结合实验检测融合蛋白的偶联功能。结果 BCA法测定Sf9细胞膜蛋白的总浓度为2.86g·L-1,M3-G11α融合蛋白的表达水平为7.76×10-9mol·g-1protein。不同配体存在时使融合蛋白中的G11α与GDP的亲和力发生变化。ACh,Pilo,CCh,MCN-A-343,Atro,4-Damp,Dafi及无配体存在时,GDP的IC50值分别为:82.21,93.70,12.10,14.30,1.93,1.37,0.72和1.99×10-6mol·L-1。结论 Sf9细胞表达的m3AChR-G11α融合蛋白具有m受体配体结合的特性及两组分间偶联的功能,m3AChR-G11α融合蛋白中的G11亚基对GDP的亲和性取决于m受体配体的性质,分析GDP的亲和性变化有利于筛选和鉴别m3受体亚型特异性配体。
- 白立川郭政东张雪薇孙科姜爱民
- 关键词：M受体G蛋白融合蛋白激动剂拮抗剂
- 多环芳烃暴露人群中二羟环氧苯并[a]芘脱氧鸟苷加合物与DNA氧化损伤关系研究
- 目的探究多环芳烃(PAHs)暴露与暴露工人血中二羟环氧苯并[a]芘脱氧鸟苷加合物(BPDEdG)的剂量效应关系,分析BPDE-dG加合物与DNA氧化损伤标志物的关系。材料和方法采用横断面调查的方法,以华东地区某焦化厂47...
- 张雪薇郭玲王凯段化伟
- 关键词：苯并[A]芘剂量效应关系
- M<,2>-G<,i1α>融合蛋白在Sf9细胞中的表达及特异性药物的筛选
- 毒蕈碱型乙酰胆碱受体(AChR)是G蛋白偶联受体(GPCR)的成员之一。分子生物学分型依据M受体克隆基因序列差异，分为而M1-M5五种亚型，分子量约51-66kD，由460-590个氨基酸残基组成，由细胞外的N端七次跨过...
- 张雪薇
- 关键词：融合蛋白药物筛选分子生物学杆状病毒
- 文献传递
