成温玉 作品数:10 被引量:14 H指数:2 供职机构: 中国农业科学院兰州兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 国家质检公益性行业科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
猫隐孢子虫研究进展 被引量:1 2013年 隐孢子虫为人兽共患性寄生原虫,呈世界性分布,经水源和食物源途径传播,是引起人和动物腹泻的一个重要致病因素。猫隐孢子虫病世界各地均有报道,严重威胁着人类和动物的健康。论文对猫隐孢子虫的生物学特性、流行病学特点、诊断和防控等方面的研究进展进行了综述,为猫隐孢子虫病的有效防控提供参考。 成温玉 贾燕青 边青青 杜帅之 方艳琴 邓明俊 于三科关键词:隐孢子虫病 生物学特性 流行病学 口疮病毒B4R锚蛋白抑制细胞NF-κB信号通路的研究 被引量:6 2016年 为明确口疮病毒(ORFV)编码的B4R蛋白调节细胞N F-κB活化的作用,以ORFV ORF008基因编码的B4R蛋白为研究对象,构建真核表达载体p CM V-Flag008,转染293T细胞,首先,利用双荧光素酶报告基因系统分析B4R蛋白对NF-κB信号活化的调节作用;其次,采用W estern-blot检测B4R蛋白对NF-κB信号通路中NF-κB p65蛋白核移位和IκBα蛋白磷酸化水平的影响。结果显示,B4R蛋白对NF-κB转录因子报告载体荧光素酶活性有明显的抑制作用(P<0.05);B4R蛋白能阻止IκBα蛋白磷酸化降解过程而抑制细胞NF-κB p65蛋白核移位。由此可见,ORFV编码的B4R蛋白能抑制细胞NF-κB信号通路的活化。 冯园 贾怀杰 何小兵 成温玉 陈国华 王春燕 何玉林 景志忠关键词:NF-ΚB 山羊球鞘毛尾线虫特异PCR检测方法的建立 被引量:1 2013年 以分子生物学和遗传学为基础,探索建立了山羊球鞘毛尾线虫特异性PCR检测方法,并进行了敏感性、特异性及虫体鉴定应用试验。结果表明,该方法可扩增出毛尾线虫长度为1 500bp左右的目的片段;特异性PCR可将山羊球鞘毛尾线虫与山羊粗纹食道口线虫、哥伦比亚食道口线虫、捻转血矛线虫、奥拉奇细颈线虫、美丽筒线虫有效区分;敏感性试验结果表明,该PCR可检测毛尾线虫的最低DNA模板质量浓度为0.82ng/μL。用该特异PCR检测方法对陕西4个地方的毛尾线虫随机抽取10条进行分析,检测结果与传统的形态学鉴定结果相符,但比传统方法更加简捷、快速和准确。 贾燕青 宋军科 边青青 成温玉 马晓棠 赵光辉 于三科关键词:ITS 聚合酶链反应 山羊 cGAS-STING信号通路抗ECTV感染的作用机制研究 天花的消灭为人类疾病防治和免疫学的发展奠定了伟大的基础。然而,随着恐怖主义的猖獗,痘病毒可能被恐怖分子作为一种生物武器而威胁公众的生命安全;加之正痘病毒属的其他病原,例如猴痘病毒(monkeypox,MPXV),牛痘病毒... 成温玉 何小兵 贾怀杰 高真贞 景志忠关键词:鼠痘病毒 抗病毒免疫 文献传递 应用qRT-PCR方法检测鼠痘病毒在小鼠不同组织中的差异分布 被引量:1 2019年 鼠痘(mouse pox)是由鼠痘病毒(Ectromelia virus,ECTV)感染实验小鼠引起的一种毁灭性、烈性传染病,为SPF小鼠必须排除的病原之一。本研究基于ECTV主要核蛋白P4b基因片段建立了实时定量PCR方法(real-time quantitative PCR,qRTPCR),用于检测C57BL/6小鼠感染ECTV后心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤中的病毒载量,并用病理组织学观察验证了qRT-PCR方法的特异性和可靠性。结果表明,所建立的qRT-PCR方法能够准确检测小鼠感染后d5和d7不同组织的病毒载量,d5不同组织中病毒载量低于d7,与病理组织学检测结果一致。本研究建立的qRT-PCR检测方法且具有较高的灵敏性、特异性和可靠性,可用于ECTV感染细胞和组织器官中病毒载量、分布和消长动态的定性定量检测。 张君 成温玉 贾怀杰 牛贤云 程国锋 景志忠关键词:鼠痘病毒 实时定量PCR 山羊痘病毒L1R蛋白的原核表达及其免疫原性的研究 2018年 摘要:为探究山羊痘病毒LIR蛋白的免疫原性,将山羊痘病毒的LIR基因克隆到pET-30a(+)原核表达载体并转化大肠杆菌BL21(DE3),挑取阳性克隆进行诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析后进行纯化.将纯化的重组L1R蛋白免疫BALB/c小鼠.通过间接ELISA、淋巴细胞增殖和微量中和试验研究重组LIR蛋白的免疫原性及其多克隆抗体的抗病毒作用。结果显示,成功表达出分子质量约为26ku的目的蛋白,其可被山羊抗绵羊痘阳性血清所特异性识别。重组LIR蛋白能够刺激小鼠产生体液免疫和细胞免疫,并且其多克隆抗体能够中和山羊痘病毒,从而证实山羊痘病毒LIR蛋白具有良好的免疫原性。 牛贤云 贾怀杰 陈国华 何小兵 张君 房永祥 成温玉 景志忠关键词:山羊痘病毒 免疫原性 小鼠AIM2分子结构特征及天然免疫模式识别功能的研究 被引量:1 2017年 应用RT-PCR技术,从小鼠脾淋巴细胞中克隆AIM 2基因,通过生物信息学软件对AIM2的遗传演化关系、分子结构特征以及氨基酸序列进行分析,并应用q RT-PCR检测在不同组织中的m RN A转录水平。结果显示,克隆的小鼠AIM2基因开放阅读框全长1 065 bp,编码354个氨基酸,与其他动物的AIM2基因序列具有较高的同源性(56.9%~88.9%);q RT-PCR检测表明,AIM2基因在肌肉和心脏组织中转录水平较高。此外,将AIM2基因亚克隆至真核表达载体p CMV-Tag 2B进行W estern-blot验证,然后将正确的重组表达质粒转染H EK 293T细胞,进而应用双荧光素酶报告系统检测证实在poly(d A-d T)和poly(d G-d C)刺激下,过表达小鼠AIM2对转录因子NF-κB和AP-1的活化过程有显著增强作用。上述研究结果表明,小鼠AIM2能够识别富含A/T或C/G的D NA,是重要的胞浆DNA识别受体,这为进一步探讨AIM2与DNA病毒的相互作用机制奠定基础。 王聪 李婷婷 成温玉 何小兵 金启旺 贾怀杰 陈国华 曾爽 房永祥 景志忠 刘翊中关键词:天然免疫 猪瘟C株疫苗诱导PBMCs中SLA等位基因差异性表达分析 被引量:2 2018年 猪主要组织相容性复合体(SLA)广泛参与机体免疫应答与调节,具有重要的免疫学研究意义。在转录水平上对猪瘟C株疫苗免疫后猪外周血单个核细胞(PBMCs)中SLA的表达情况进行了初步研究。猪瘟C株疫苗免疫试验猪后,在0、3、5、9d分别采集4头猪的抗凝血分离外周血单个核细胞,通过逆转录荧光定量PCR技术(RT-qPCR)对外周血单个核细胞中的SLA进行转录水平的相对定量检测;并对试验猪SLA上调表达明显的cDNA模板进行了SLAⅡ类分子的克隆、测序及其系统发育树分析。结果显示,猪瘟C株疫苗免疫后,PBMCs中SLAⅠ、SLAⅡ类分子在短时间内均出现上调表达,一段时间后发生回降;测序分析发现,上调表达的SLA-DRA、SLA-DRB分子中存在高频表达序列。结果提示,猪瘟C株疫苗能够刺激机体产生猪瘟病毒相关的免疫应答,并存在SLA等位基因优势选用现象,这种优势选用可为猪瘟表位肽疫苗的研制提供理论依据。 李守杰 贾怀杰 成温玉 王春燕 金启旺 景志忠鸡IL-17及其相关细胞因子在贝氏隐孢子虫感染中的动态变化 隐孢子虫(Cryptosporidium)是一种广泛寄生于多种宿主消化道、呼吸道上皮细胞的胞内原虫,由其引起的隐孢子虫病(cryptosporidiosis)是一种人兽共患病。自Tyzzer于1907年首先在鼠体内发现隐... 成温玉关键词:贝氏隐孢子虫 IL-17 文献传递 不同抗性小鼠ECTV感染前后重要模式识别受体的组织表达差异分析 被引量:2 2020年 探讨抗性/易感小鼠DNA识别受体的组织表达差异与抗病性的关系。方法不同抗性品系小鼠感染ECTV后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析其组织的重要DNA识别受体差异表达谱。结果TLR9、DAI、cGAS、RNA pol III和RIG-I这5个与DNA识别相关的受体在不同抗性小鼠组织中均呈广泛性表达,但鼠痘抗性小鼠C57BL/6品系的表达明显整体高于BALB/c小鼠;在ECTV感染后易感小鼠BALB/c品系的这些基因表达明显上调,而C57BL/6小鼠变化不大甚至下调。结论这种差异表达特征表明这些受体分子可能与小鼠的天然抗病力密切相关。 何小兵 王聪 成温玉 贾怀杰 陈国华 房永祥 刘翊中 景志忠关键词:小鼠 模式识别受体 实时定量PCR