- MiR-122稳定转染细胞系的建立及其脂代谢特征被引量:1
- 2009年
- 目的:利用稳定表达人miR-122前体的表达载体,转染低表达miR-122的人肝癌细胞系HepG2细胞,获得过量表达miR-122的稳定转染细胞系,探讨miR-122对肝脏细胞脂代谢的影响及其机制。方法:对已构建完成的表达质粒pEZX-hsa-mir-122和对照质粒pEZX-mir-control进行酶切鉴定,对酶切正确的克隆进行DNA测序,测序正确的克隆应用脂质体试剂转染,绿色荧光蛋白表达监测转染效率,应用嘌呤霉素筛选稳定转染细胞系,实时定量PCR在RNA水平鉴定miR-122的表达,蛋白质印迹法从靶分子水平验证miR-122的抑制功能,尼罗红染色观察细胞内脂质。结果:pEZX-hsa-mir-122质粒成功转染HepG2细胞,质粒携带的miR-122前体序列整合到细胞基因组中,获得过量表达miR-122的HepG2细胞株,细胞内成熟体miR-122可抑制靶基因的翻译,细胞内脂质明显增加。结论:人miR-122前体序列可整合在HepG2细胞基因组中,过量表达miR-122的HepG2细胞出现脂质代谢异常。
- 章亚南王芳杨富殷一旋张玲孙树汉
- 关键词:稳定转染脂代谢嘌呤霉素HEPG2细胞
- 载脂蛋白A1亚型比例的改变促进男性慢性乙型肝炎的进展
- 乙型肝炎严重威胁着人类的健康,据统计全世界的乙肝病毒携带者有3.5亿之众。而乙肝病毒携带者一旦发展为慢性乙肝,就很可能恶变为肝硬化和肝细胞性肝癌。在慢性乙型肝炎进展为肝硬化、肝细胞癌的进程中,男性患者进展的速度比女性快,...
- 殷一旋
- 关键词:慢性乙型肝炎载脂蛋白A-I性别差异
- 文献传递