藤蔓
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
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- 泰乐菌素残留快速检测试纸条
- 本发明公开了一种泰乐菌素残留快速检测试纸条。试纸条底层为支撑层,中间层吸附层固定在支撑层上,外层保护膜固定在吸附层上,吸附层从测试端依次为纤维层,吸附金标抗体纤维层,纤维素膜层及手柄端的吸水材料层,其中在纤维素膜层上有用...
- 张改平赵东邓瑞广李学伍杨艳艳肖治军王选年王自良邢广旭杨继飞柴书军刘庆堂罗俊郝桂芳王丽藤蔓
- 文献传递
- 环丙沙星完全抗原的制备和间接竞争ELISA检测方法的初步研究
- 2011年
- 为了研究检测环丙沙星(CIP)残留的间接竞争ELISA方法,试验采用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(EDC)一步法将环丙沙星分别与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)偶联制备免疫原(CIP—BSA)和包被原(CIP—OVA),用免疫原免疫Balb/c小鼠制备血清多克隆抗体(CIPpAb),并对其血清抗体效价、灵敏度、半数抑制浓度(IC50)、特异性等进行测定。结果表明:血清抗体的效价为1:25600,间接竞争ELISA的线性检测范围为O.54~500ng/mL,灵敏度为0.54ng/mL,IC50为8.13ng/mL,与恩诺沙星的交叉反应率(CR)为100%,与达氟沙星的交叉反应率为50%,与其他化合物的交叉反应率均小于0.8%。说明这种研究方法可以同时检测食品中的环丙沙星和恩诺沙星残留。
- 赵银丽刘庆堂藤蔓柴书军张改平
- 关键词:环丙沙星间接竞争ELISA
- 人热休克蛋白10和鼠热休克蛋白10的克隆、序列分析及其原核表达被引量:3
- 2011年
- 提取人肝癌SMMC-7721细胞和小鼠NS0细胞总RNA,对热休克蛋白10基因(Hsp10)进行RT-PCR扩增、TA克隆和测序。结果表明,从上述2种细胞中获得的cDNA分别由312,313 bp组成,与报道的人HSPE1 mRNA(NM-002157)、鼠肌肉Hspe1 mRNA(NM-008303)序列同源性分别为99%,97%,命名为HSPE1-1和Hspe1-1,序列分析表明,二者之间在核苷酸水平上的同源性为92%,氨基酸水平上的同源性为97%。将上述2种cDNA进行双酶切、亚克隆,成功构建了重组表达载体pET-28a-HSPE1-1与pET-28a-Hspe1-1,转化大肠杆菌并进行了诱导表达。检测结果表明,pET-28a-HSPE1-1与pET-28a-Hspe1-1均能在大肠杆菌中表达,表达蛋白分子量大小约为14 kDa,与预期大小一致。Western-Blot结果证实了其为目的蛋白,经镍树脂柱纯化,获得了相应的重组蛋白。为进一步研究这2种蛋白的结构、功能及临床应用奠定了基础。
- 王丽杜晓明王林林史西保藤蔓李功权权凯郭军庆张改平
- 关键词:热休克蛋白基因克隆原核表达