李兴林 作品数:28 被引量:90 H指数:5 供职机构: 天津科技大学生物工程学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 天津市应用基础与前沿技术研究计划 天津市科技支撑计划重点项目 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 农业科学 医药卫生 更多>>
杠柳组培苗的诱导及其次生代谢产物杠柳毒苷动态积累的研究 被引量:1 2010年 目的:通过诱导杠柳组培苗,分析杠柳组培苗在分化过程中不同部位杠柳毒苷含量,探索次生代谢产物杠柳毒苷在分化再生过程中的动态变化。方法:首先在无菌条件下利用杠柳种子产生实生苗,然后切取胚轴,在含有IBA 0.1 mg.L-1+BA 1 mg.L-1的MS培养基上诱导形成愈伤组织和不定芽,待不定芽发育形成3 cm左右的无根苗时将其切下,接种到含IBA 0.5 mg.L-1的1/2MS培养基中进行生根培养,使其形成组培苗。在培养组培苗过程中,分别采集不同的分化部位进行含量测定。结果:分化过程中不同部位杠柳毒苷含量差异很大,其中完整组培苗中根的含量最高,然后依次是愈伤组织、完整组培苗的茎和叶、无根苗的茎和叶。结论:整个再生过程表明,根和分化的愈伤组织是最有可能产生和积累杠柳毒苷的地方,茎和叶中含有的杠柳毒苷很有可能是通过输导组织运送的。 张坚 高文远 李兴林 王娟 李丽梅关键词:杠柳 组培苗 外源NO对桔梗幼苗生长和总皂苷积累的影响 被引量:1 2019年 目的:考察外源一氧化氮(nitric oxide,NO)对桔梗幼苗生长和次生代谢产物总皂苷类成分积累的影响。方法:培养桔梗实生苗,然后利用喷灌法连续1周喷洒不同浓度梯度的NO供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)溶液,记录幼苗的生长状况,并对桔梗总皂苷、脯氨酸(proline,Pro)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(peroxidase,POD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)等生理指标进行测定。结果:随SNP度增加,桔梗幼苗生长、皂苷积累和生理指标多数呈现先增加后降低的趋势,MDA含量则呈现先降低后增加的趋势;低浓度SNP有助于促进桔梗的生长,并促进其总皂苷成分积累。结论:低浓度的外源NO对桔梗幼苗的生长有一定的促进作用,且可明显提高幼苗中总皂苷含量。 张坚 李先宽 李兴林 马琳 陈志娟关键词:桔梗 硝普钠 总皂苷 特等(级)面粉中无机磷含量变化及HIP分布的研究 被引量:3 2007年 对11个品牌42种的特等(级)面粉,进行无机磷含量测定,结果表明:符合高无机磷(HIP)含量的样品占71.4%,多数品牌不同批次面粉的无机磷含量不一致,具有一定的随机性,在1年贮藏期内面粉的HIP分布变化很小。取其1个批次的11种面粉及其面团,在60℃、80℃和100℃水浴锅中,分别进行15 min和30min的高温处理,结果表明:在15 min 80℃和100℃的处理以及30 min各个温度的处理下的面团,无机磷含量有所升高,但幅度较小,HIP分布变化不大。 李兴林关键词:贮藏期 高温处理 干旱胁迫对桔梗生长特性、生理特性及总皂苷成分积累的影响 被引量:6 2015年 [目的]探讨干旱胁迫对桔梗种子萌发及幼苗生长的影响,并初步分析干旱胁迫下桔梗生长发育的生理机制和对总皂苷成分的诱导影响。[方法]分别采用5%、10%、15%、20%、25%聚乙二醇6000(PEG6000)处理桔梗种子及幼苗,测量种子萌发及幼苗生长过程中的生长性状指标和生理指标,以及次生产物桔梗总皂苷成分含量。[结果]随着PEG胁迫浓度的增加,桔梗种子萌发和幼苗生长受到抑制。种子发芽率、相对发芽率显著降低;幼苗各生理指标中脯氨酸,丙二醛和总皂苷含量呈上升趋势,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性均不同程度地表现为先上升后下降的趋势。[结论]桔梗能够耐受一定程度的干旱胁迫,适度的干旱胁迫有助于桔梗幼苗总皂苷的积累。 张坚 张博 周文贵 尹飞 马琳 李兴林关键词:桔梗 干旱胁迫 生理特性 桔梗总皂苷 代谢工程改造甘油代谢途径提高β-胡萝卜素产量 被引量:5 2017年 甘油是生物柴油的副产物,因其价格低廉和高还原性,成为生物发酵的重要碳源。为了进一步提高工程菌对甘油的利用能力,从而提高萜类化合物的合成能力,本研究从β-胡萝卜素高产菌CAR015出发,对其甘油代谢途径的多个基因进行了调控。首先敲除了编码3-磷酸甘油抑制子的glp R基因,然后分别用M1-37、M1-46和M1-93三个不同强度的人工调控元件对glp FK、glp D和tpi A三组基因进行单基因调控和多基因组合调控。研究发现用M1-46调控glp D基因后β-胡萝卜素产量达到了64.82 mg/L,是CAR015的4.86倍,甘油消耗速率也提高了100%;调控tpi A基因后β-胡萝卜素产量略有提高;调控glp FK基因后β-胡萝卜素产量略有降低。说明Glp D是甘油代谢途径中的关键限速步骤。Q-PCR结果表明,降低甘油代谢途径的glp D和glp FK基因转录水平,增加tpi A基因转录水平,可以增加细胞生长速度、提高β-胡萝卜素产量,可能是因为减少了丙酮醛毒性所致。组合调控glp D和tpi A基因,获得β-胡萝卜素产量最高菌株Gly003,其β-胡萝卜素产量达72.45 mg/L、产率达18.65 mg/g每克干细胞,分别是出发菌株CAR015的5.23倍和1.99倍。总之,Glp D是甘油代谢途径中的关键限速步骤,适当强度调控glp D,可以有效提高重组大肠杆菌的β-胡萝卜素产量。 董悦 胡坤乐 李兴林 李清艳 张学礼关键词:Β-胡萝卜素 萜类化合物 大肠杆菌 基于植物p53保守序列构建RNAi的DNA片段方法 2010年 构建p53基因RNA干涉DNA片段的目的,是将其应用于植物悬浮培养中的细胞周期调节.依据拟南芥p53基因与其他高等植物具有高度保守区域的特点,合成其两个区域的核苷酸片段(Ⅰ和Ⅱ)及其相应的反向片段(Ⅰ′和Ⅱ′),并在Ⅱ和Ⅱ′端部分别引入内含子两个端部核苷酸序列.在相互连接后进行PCR选择扩增,其产物再与克隆载体连接并经过蓝白斑筛选获得重组DNA;在电泳和核苷酸测序鉴定后表明,最终得到了Ⅰ–5′–内含子–Ⅱ′–Ⅱ–内含子–3′–Ⅰ′序列的重组DNA片段.该片段两端含多克隆位点,通过插入植物的表达载体进入细胞基因组,在细胞中其转录产物将形成发夹结构,经胞内酶切后可以形成短的双链RNA片段,将具有干涉p53基因表达的功能. 高洁 李兴林 张黎明 肖天剑关键词:拟南芥 P53基因 保守序列 北方市场主要特级(等)粉的品质分析 被引量:1 2004年 对11种特级粉4批次取样做品质分析。结果表明,蛋白质含量、湿面筋含量、Zeleny沉降值以及和面仪曲线指标等不仅在品牌间存在较大差异,同一品牌的不同批次间也存在一定的差异,这种差异在有些品牌中表现的更为明显。对取样面粉做高分子量麦谷蛋白亚基类型分析,也表明,全部取样不完全一致,多数品牌的不同批次间也存在差异,其中有些品牌的面粉明显为不同品种的混配粉。由此认为,在面粉的加工和销售中,强化品质稳定的理念,用专用粉的标准代替等级粉势在必行。 李兴林 孙正峰关键词:专用粉 盐胁迫对知母种子萌发和幼苗生长的影响 被引量:3 2016年 目的:探索盐胁迫对知母种子萌发和幼苗生长的影响,并初步分析盐胁迫下知母生长发育的生理机制。方法:分别采用0.25%、0.50%、0.75%、1.00%、1.25%、1.50%的Na Cl处理知母种子及幼苗,测量种子萌发及幼苗生长过程中的生长性状指标和生理指标。结果:随着Na Cl浓度的增加,知母种子萌发和幼苗生长受到抑制。种子发芽率、相对发芽率显著降低;幼苗各生理指标中脯氨酸、可溶性糖、MDA呈上升趋势,可溶性蛋白呈下降趋势,SOD、POD、CAT活性均不同程度地表现为先上升后下降的趋势。结论:知母能够耐受中等强度的盐胁迫(Na Cl浓度不高于0.50%)。实验结果为中等盐渍化土壤种植知母提供参考。 郑诗强 张坚 李兴林 李先宽 马琳 谭世强关键词:知母 盐胁迫 生理特性 生长性状 乌拉尔甘草悬浮单细胞的筛选及培养 被引量:2 2009年 乌拉尔甘草种子在消毒后培养无菌苗,截取无菌苗子叶、上胚轴和下胚轴等作为外植体,诱导和继代培养成松散型愈伤组织,然后在振荡培养后过筛获得悬浮单细胞;再对悬浮液进行多级稀释、培养制备小细胞团.结果表明,在含1.0.mg/L.2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、1.0.mg/L.α-萘乙酸(NAA)、1.0.mg/L6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、0.3.mg/L激动素(KT)的MS培养基中,上胚轴能在3~5次继代培养后获得松散型愈伤组织,过80目筛可以获得悬浮单细胞和小细胞团;同样的培养基,悬浮单细胞在琼脂表面、珍珠岩表面和看护培养中培养,看护培养的细胞生长最快、小细胞团形态最佳. 肖天剑 李兴林 蔡津 高洁关键词:乌拉尔甘草 愈伤组织 印楝细胞培养物控制黄粉虫幼虫的研究 被引量:1 2014年 为了探究印楝细胞培养物控制害虫的效果,本文通过诱导幼叶、继代培养获得印楝的松散型愈伤组织,再经振荡培养获得悬浮细胞培养物;然后采用二氯甲烷溶剂浸提愈伤组织、悬浮培养物及悬浮培养细胞,制备相应的浸提液;用二氯甲烷分别将这些浸提液稀释成含0.003%印楝素A的控虫工作液,用其分别处理黄粉虫幼虫,在12d内,考察其控虫效果.结果表明:3种浸提液的致死效应明显高于阴性对照,其中,第9天的最大致死率达到20%,但它们要明显低于0.003%印楝素乳油农药的处理;3种浸提液对幼虫的虫体质量、拒食和趋避作用等方面效果较好,均达到印楝乳油杀虫剂的控虫水平.印楝细胞培养物经一步浸提后,直接用于控虫制剂的生产,可以节约分离、提纯印楝素等生产性成本. 李兴林 赵娜 韩广建 曹雪飞关键词:印楝素 悬浮细胞 黄粉虫