夏蕾
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：江苏省青年科技基金长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 荧光素酶编码基因luc在大肠杆菌中的克隆、表达及纯化被引量：4
- 2008年
- 以荧光虫荧光素酶报告载体pXP2 DNA为模板,扩增得到编码萤火虫荧光素酶(LUC)的基因(luc),构建了诱导型表达载体pQE30-luc。将载体导入E.coliM15获得高效诱导表达萤火虫荧光素酶基因的重组菌M15/pQE30-luc。SDS-PAGE电泳分析显示:重组蛋白的相对分子质量为60 000,表达量占全菌胞内可溶性蛋白质的50.9%.利用表达载体pQE30上的His.Tag标记选用Ni柱纯化表达具有活性的萤火虫荧光素酶(LUC),纯化后比酶活达到1.43×109RFU/mg,纯化倍数达10.6倍,回收率为25.3%.
- 夏蕾饶志明沈微方慧英诸葛健
- 关键词：萤火虫荧光素酶克隆纯化
- 荧光素酶基因luc在大肠杆菌中表达条件优化被引量：1
- 2009年
- 对重组荧光素酶大肠杆菌菌株M15/pQE30-luc进行了表达条件的优化研究。单因素结果表明:在初始pH值7.0,装液量为20%,2%的接种量,终浓度为0.5mmol/L的IPTG,添加10～30mmol/L的Mg2+,摇床转速为200r/min,37℃诱导3.5h酶的表达量最高。正交试验结果表明:初始pH值为7.0,添加40mmol/LMg2+,接种量2%,装液量为20%时表达量最高,比酶活达1.63×108RFU/mg蛋白。
- 夏蕾饶志明沈微方慧英诸葛健
- 关键词：萤火虫荧光素酶发酵条件正交试验设计
