李莹莹 作品数:5 被引量:7 H指数:2 供职机构: 长春工业大学化学与生命科学学院 更多>> 发文基金: 吉林省科技发展计划基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
一种犬重组干扰素α及制备方法 本发明公开了一种犬重组干扰素α,同时还提供了犬重组干扰素α的制备方法,将犬干扰素α的重组基因在大肠杆菌中进行表达,通过复性和纯化过程,获得了纯度大于98%的犬干扰素α。利用MDCK(犬肾细胞)-VSV(水泡性口炎)病毒体... 殷玉和 李莹莹 刘新涛文献传递 异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂的优化筛选 被引量:3 2012年 利用噬菌体肽库筛选与计算机模拟分子对接技术,优化异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂的筛选.先通过噬菌体肽库筛选出与异柠檬酸裂解酶(ICL)具有高亲和力的结合肽,再利用Discovery Studio 2.1模拟多肽与ICL蛋白晶体(1F8I)的分子对接,最后用Fmoc固相合成法合成多肽,并对其生物活性进行检测.实验结果表明,通过噬菌体肽库筛选得到了29条七肽序列,其中12条可与ICL蛋白晶体成功对接.体外生物活性检测结果显示,得到的12条七肽均对ICL的活性有明显抑制作用(抑制率均超过50%). 吴丛梅 赵韫慧 李莹莹 孙宝娲 殷玉和关键词:噬菌体肽库 分子对接 犬干扰素α制备工艺的优化 被引量:1 2012年 根据Genbank的犬干扰素α序列,经密码子优化后,设计并合成了编码CaIFN-α蛋白的基因片段。CaIFN-α基因与pBV220温度诱导表达载体连接,转化大肠杆菌BL21。经培养、升温诱导表达,目的蛋白以包涵体的形式存在,蛋白分子量约为18000,蛋白表达量为25%。菌体经超声破碎、变性、复性后,目的蛋白纯度为69%,收率为28%;疏水层析后,目的蛋白纯度87%,收率为81%;分子筛层析后,目的蛋白纯度为96%,收率为90%。纯化的CaIFN-α蛋白的生物学比活性为3×107 IU/mg,内毒素≤10 EU/mg,符合兽用药要求。此制备工艺总产率高达20%、重现性好,适用于大规模生产。 殷玉和 李莹莹 刘新涛 吴丛梅关键词:原核表达 纯化 犬用干扰素的制备方法研究及质量体系建立 近年来,犬作为宠物,在人们的生活中扮演着越来越重要的角色,而各种病毒性疾病是造成犬类死亡的主要原因。干扰素是由感染病毒的细胞或其它生物诱导剂刺激机体合成的一类天然蛋白质。主要功能为抗病毒、免疫激活和细胞生长调节。犬干扰素... 李莹莹关键词:原核表达 纯化 生物活性 文献传递 犬α干扰素的原核表达及活性检测 被引量:2 2012年 本研究合成了编码CaIFN-α蛋白的基因片段,分别与温度诱导表达载体pBV220和化学诱导表达载体pET20b连接,构建了pBV220-CaIFN-α和pET20b-CaIFN-α重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21,通过温度诱导和IPTG诱导表达,CaIFN-α蛋白表达量分别为25%和20%。对比两方法诱导表达结果,确定最佳诱导方法为温度诱导。表达菌经超声破碎、变性、复性、疏水层析和分子筛层析后,得纯化的CaIFN-α蛋白,纯度约为96%。利用MDCK(犬肾细胞)-VSV(水疱性口炎病毒)体系,测定纯化后CaIFN-α蛋白的生物学比活性为3×107U/mg。 殷玉和 李莹莹 刘新涛 吴丛梅关键词:原核表达 纯化 生物学活性