徐立仁
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：浙江大学化学工程与生物工程学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 重组二硫键异构酶的纯化及其协助蛋白质重折叠研究
- ＜正＞二硫键异构酶（Disulfide bond formation protein A,DsbA）存在于大肠杆菌周质腔中,具有很强的氧化性,分子量约为23kD。二硫键的形成在蛋白质的折叠过程中是一个限速步骤,DsbA能...
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- 文献传递
- 重组亲环蛋白A的可溶性表达被引量：1
- 2010年
- 为获得高表达量的可溶亲环蛋白A(cyclophilin A,CypA),对重组CypA质粒表达和工程菌的培养过程进行研究.首先将pRSET-CypA质粒转入EscherichiacoliBL21菌株,获得表达CypA的重组工程菌;然后以2×YT为基本培养基,对培养基组成包括碳源、氮源和氨苄青霉素浓度进行优化,并考察接种量和诱导条件(诱导剂浓度、诱导时机、诱导后培养时间)等对目标蛋白表达量的影响.结果表明:通过控制培养温度和转速可大大减少CypA包涵体的量;以甘露醇为碳源能显著提高目标蛋白的表达量;优化的培养基组成为蛋白胨16 g?L-1,酵母提取物10 g?L-1,NaCl 5 g?L-1,甘露醇10 g?L-1,Amp50 mg?L-1;在对数生长期中期OD600为1.3时加入1 mmol?L-1IPTG诱导,然后在30℃、180 r?min-1条件下继续培养9 h收获菌体;优化后目标蛋白CypA产量为66.7 mg?L-1发酵液,与优化前相比提高了76.6%.
- 闫啸徐立仁关怡新姚善泾
- 关键词：可溶表达
