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吴倩倩
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
南阳师范学院生命科学与技术学院
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发文基金:
河南省教育厅科学技术研究重点项目
高层次人才科研启动基金
河南省科技攻关计划
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相关领域:
环境科学与工程
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合作作者
张格格
南阳师范学院生命科学与技术学院
黄林娜
南阳师范学院生命科学与技术学院
郑路
中山大学
张建丰
南阳师范学院生命科学与技术学院
张伟
南阳师范学院生命科学与技术学院
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环境科学与工...
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定向进化
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染料脱色
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染织废水
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中山大学
作者
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张磊
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董冰雪
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郑路
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黄林娜
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吴倩倩
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张格格
传媒
1篇
微生物学通报
年份
1篇
2017
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1
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定向进化提高灰盖鬼伞过氧化物酶染织废水脱色效率
被引量:3
2017年
【目的】获得染织废水脱色能力增强的灰盖鬼伞过氧化物酶。【方法】使用基因合成及定点突变平台合成突变灰盖鬼伞过氧化物酶基因CIPmt4(I49S、V53A、M166F和M242I),并调整密码子至毕赤酵母偏好性。以CIPmt4为模板进行定向进化,经过三轮易错PCR和高通量筛选得到一个酶学性质显著改善的突变体(CIPmt5)。通过3D建模和分子动力学模拟分析蛋白的结构及热稳定性,并进一步研究CIPmt5和野生型CIP对刚果红、氨基黑、甲基橙、次甲基蓝、苯胺蓝、结晶紫、溴酚蓝共7种染料的脱色能力。【结果】序列分析显示该突变体积累了I49S、V53A、T121A、M166F和Y272F共5个氨基酸突变,与野生型灰盖鬼伞过氧化物酶相比,以ABTS为底物酶活性是野生型的2.01倍(24.44 U/mg),最适反应p H由5.0提高到6.5,最适反应温度由25°C提高到45°C。除次甲基蓝外对其它染料脱色的最适p H都往中、碱性方向偏移,脱色率普遍高于野生型。模型分析显示CIPmt5活性中心更开放,热稳定性增强。【结论】突变体酶CIPmt5能够更好地替代野生型灰盖鬼伞过氧化物酶应用于染织业染料脱色、化工废水和染织废水的生物修复。
张磊
张伟
方金涛
董冰雪
黄林娜
吴倩倩
押玉柯
张建丰
张格格
郑路
关键词:
定向进化
酶学特性
染料脱色
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