梁宇恒
- 作品数：15 被引量：111H指数：6
- 供职机构：广东省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：中美新发和再发传染病合作项目广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 2013-2016年广东省腹泻患者致泻性大肠埃希菌病原学监测被引量：11
- 2018年
- 目的了解广东省腹泻患者致泻性大肠埃希菌（DEC）的感染状况及菌株的血清型分布、药物敏感性和分子特征。方法采集粪便标本进行传统分离培养，对疑似菌株进行多重PCR毒力基因鉴定和生化鉴定，获得阳性菌株进行血清学分型、药物敏感试验和脉冲场凝胶电泳（PFGE）。结果腹泻患者中DEC的总阳性率为6.26%，肠致病性大肠埃希菌（EPEC）、肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）、肠出血性大肠埃希菌（EHEC）、肠集聚性大肠埃希菌（EAEC）和肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）的阳性率分别为2.47%、1.54%、1.32%、0.62%和0.09%，以0～〈7岁的儿童感染为主。血清分型率为52.54%，EHEC分子血清分型率为15.00%。DEC对亚胺培南、环丙沙星、头孢他啶和头孢噻肟的敏感率较高。DEC多重耐药率为58.45%，EPEC多重耐药现象最严重。广东省腹泻患者ETEC、EHEC、EPEC和EAEC的PFGE图谱呈现高度多态性。结论EPEC是广东地区DEC流行的优势型别，首选三代头孢菌素为儿童感染治疗用药，成人还可选用环丙沙星。DEC多重耐药现象严重，应加强DEC的病原学监测和耐药性监测。
- 何冬梅梁宇恒柯碧霞曾洪辉刘美真谭海玲李柏生杨彤柯昌文
- 关键词：致泻性大肠埃希菌毒力基因病原学监测细菌耐药性监测脉冲场凝胶电泳
- 疣状表皮发育不良伴Bowen病1例临床分析被引量：3
- 2012年
- 目的:报道1例花斑癣型疣状表皮发育不良伴外阴部鲍温病,并对患者两处皮损的临床特点、病因及相关性进行分析。方法:将腰背部及外阴部皮损的石蜡包埋组织切片提取DNA后,使用凯普HPV37型基因分型试剂盒以及PCR扩增方法进行检测,同时对患者进行治疗。结果:两者试验结果未能体现两处皮损相关性,推测外阴皮损不是疣状表皮发育不良发展而来,为单独起病。患者T淋巴细胞明显降低。采用ALA-光动力治疗外阴皮损,三次光疗后皮损变化不明显,予以局部肿物完整切除术后,随访半年无复发。采用维A酸治疗疣状表皮发育不良皮损,治疗4个月后四肢疣状增生样皮损较前稍许变平,色素脱失斑片部分融合、边界较前模糊。结论:此病例伴发的鲍温病与疣状表皮发育不良无相关性;T淋巴细胞等因素可能在疣状表皮发育不良发病机制中占有作用。
- 鲁莎席丽艳陈明春林宝珠梁宇恒
- 关键词：疣状表皮发育不良人乳头瘤病毒鲍温病
- 广东省1株百日咳鲍特菌分离株的全基因组测序分析被引量：4
- 2018年
- 目的了解2017年广东省1株百日咳鲍特菌(简称百日咳杆菌)分离株的基因特征。方法对2017年广东省百日咳杆菌分离株(BP_GD2017)进行全基因组测序,分析这株菌的ptx S1、prn、fim2、fim3等主要抗原基因,并与我国的百日咳杆菌疫苗生产株CS株的抗原基因序列以及Gen Bank中收录的百日咳基因序列进行比较分析,同时应用wg-SNPs方法与NCBI上获取的31株国内外百日咳杆菌的基因组进行遗传进化分析。结果广东分离株BP_GD2017的基因组大小为3.64 MB,G+C含量67.74%,rRNA操纵子3个,分别是5S、16S和23S,46个tRNA,基因组结构和特征与我国疫苗生产株CS株以及其他地区和时间分离的百日咳杆菌基因组相似。分离株的ptx S1基因为A型、prn基因为2型,均与我国疫苗生产株CS株不同,fim2和fim3基因的氨基酸序列与我国疫苗生产株CS株同源性为100%。wg-SNPs基因进化显示与我国疫苗生产株CS株在不同的进化分支,而与近年来流行的其他地区(美国、英国、荷兰和挪威等地)分离株处于同一进化分支。结论广东省这株百日咳分离株与我国疫苗生产株CS株的主要抗原基因序列存在一定变异,遗传进化分支选择也出现了改变,通过比较分析不同国家或地区的分离株,可以从基因组水平上更加准确地分析基因重组、突变和进化,可以为制定百日咳疫苗免疫策略以及新型无细胞百日咳疫苗的研发提供支撑。
- 李柏生刘美真宋铁梁景涛柯碧霞谭海玲何冬梅梁宇恒柯昌文张永慧
- 关键词：百日咳鲍特菌病原学特征
- 电穿孔介导马尔尼菲青霉转化体系的建立和优化被引量：4
- 2014年
- 目的建立和优化马尔尼菲青霉电穿孔转化体系,为其基因功能研究提供良好平台。方法直接使用马尔尼菲青霉缺陷株SPM4(pyrG-,niaD-)萌发孢子进行电穿孔转化,并通过改变孢子龄、孢子萌发时间、质粒浓度、电场强度等影响因素对体系进行优化。结果适合SPM4电穿孔转化条件为:孢子龄为6 d,孢子萌发时间为4 h,电场强度为5 kV/cm。上述条件下分别使用1μg环状或线性化质粒DNA转化SPM4,平均可得到21个和13个转化子。结论马尔尼菲青霉电穿孔转化效率高,重复性好,针对SPM4萌发孢子,环状质粒较线性化质粒电穿孔转化效率高。
- 陈阳霞顾桉菁梁宇恒马团席丽艳
- 关键词：马尔尼菲青霉电穿孔
- 补体受体3在小鼠巨噬细胞识别马尔尼菲青霉中的作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨补体受体3（CR3）在小鼠巨噬细胞识别马尔尼菲青霉中的作用。方法以小鼠巨噬细胞系RAW264．7为靶细胞，分别与马尔尼菲青霉灭活分生孢子、灭活酵母细胞、活分生孢子、活酵母细胞在37oC，5％CO2培养箱中共同培养1h后，逆转录PCR检测CR3mRNA的表达，Western印迹检测CR3蛋白的表达，流式细胞仪检测吞噬率，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测共培养上清中细胞因子水平。siRNA靶向下调巨噬细胞CR3的表达后与马尔尼菲青霉灭活分生孢子共培养，按照前述方法检测吞噬率及各细胞因子水平。采用SPSS16．0统计软件进行单因素方差分析（ANOVA）检测各组间指标差异。结果RAW264．7细胞与马尔尼菲青霉灭活分生孢子、灭活酵母细胞、活分生孢子、活酵母细胞共培养后，四组之间比较，CR3mRNA、蛋白表达差异均无统计学意义（P〉0．05），吞噬率分别为95．14％、89．56％、91．03％、90．78％，各组之间差异无统计学意义（P〉0．05）；共培养后，白介素（IL）2、干扰素（IFN）γ等Th1型，IL-4、IL-10等Th2型细胞因子均呈不同程度升高，但四个共培养组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。siRNA靶向下调CR3表达后，RAW264．7细胞与马尔尼菲青霉共培养，其对马尔尼菲青霉的吞噬率下降为10．89％，与未干扰组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；同时，巨噬细胞分泌细胞因子的水平与未干扰组比较下降。结论CR3为巨噬细胞识别、介导吞噬马尔尼菲青霉的模式识别受体之一；IL-2、IFN-γ Th1型，IL-4、IL-10Th2型细胞因子可能均参与巨噬细胞抗马尔尼菲青霉感染免疫。
- 胡永轩张军民鲁莎李希清梁宇恒鲁长明席丽艳
- 关键词：巨噬细胞马尔尼菲青霉受体补体疾病模型动物
- 沙门菌和志贺菌实验室能力比对验证的模拟粪便标本的研制和评估被引量：1
- 2016年
- 目的：研制适用于临床沙门菌和志贺菌实验室能力比对验证（ proficiency testing, PT）项目的模拟粪便标本,建立有效的标本制备与评估流程。方法分别把沙门菌、志贺菌和大肠埃希菌加标至基质扁豆中制成单一目标菌的模拟粪便标本；把不同比例的大肠埃希菌与沙门菌加标至基质扁豆中,制成混合菌的模拟粪便标本；用Cary-Blair运送培养基沾取混合物,制成PT标本。通过鉴定评估PT标本的准确性和稳定性。通过参与实验室反馈的鉴定结果评估外部质控考核结果。结果按100∶1~106∶1比例制备大肠埃希菌与沙门菌混合的PT标本,能在鉴定培养基有效分离两种菌落,按104∶1~106∶1的比例制备大肠埃希菌与沙门菌混合的PT标本,需增菌后才能有效分离沙门菌；16家参与实验室中有14家医院质控考核获得“满意”结果,占87.5%（14/16）,2家医院获得“基本满意”结果,占12.5%（2/16）。结论本研究制备的模拟粪便PT标本及实验质控流程适用于临床沙门菌、志贺菌及类似的微生物鉴定能力验证项目。
- 何冬梅柯碧霞谭海玲李柏生曾洪辉杨彤柯昌文梁宇恒刘美真
- 关键词：沙门菌志贺菌大肠埃希菌
- 广东地区感染养殖罗非鱼的无乳链球菌分子分型研究被引量：8
- 2016年
- 以广东省内5个罗非鱼Oreochromis niloticus主要养殖区内分离的无乳链球菌Streptococcus agalactiae为研究目标,通过毒力基因PCR检测、多位点序列分型、脉冲场凝胶电泳技术研究广东地区感染罗非鱼的无乳链球菌分子特征。结果发现170株分离无乳链球菌中毒力基因的携带率介于60.59%~100%之间,毒力基因携带形成10个谱系,dltR-bca-sod A-spb1-cfb-bac（38.24%,65/170）,dltr-bca-sod A-spb1-bac（23.53%,40/170）和dltr-bca-sod A-spb1-cfb-bac-scp B（22,35%,38/170）为主要的谱系,dltr-bca-sod A-spb1-bac-scpb（8.24%,14/170）和dltr-bca-sod A-spb1（4.71%,8/170）次之。多位点序列分型研究证实170株菌在7个位点均为单一的等位基因,为adh P（10）,phe S（1）,atr（2）,gln A（1）,sdh A（3）,glc K（2）,tkt（2）,序列型为ST7型。146株菌脉冲场凝胶电泳结果表明146株菌分为6个簇（A-D,F,G）,相似性介于86%~100%之间。A（18）,B（16）,C（103）,D（7）为主要的遗传簇,占菌株数的98.63%（144/146）。基因簇A,C在4个采样区均有发现;基因簇B分布在吴川、茂名和阳江;基因簇D分布在茂名、珠海和阳江;基因簇F和G分别来自茂名和珠海。在A-D遗传簇中均有发现来自不同地区的菌株呈现100%的相似性,为同一克隆株。结果表明广东省主要罗非鱼养殖区内感染链球菌携带毒力基因比率高,序列型均为高致病的ST7型别,不同地区间具有相同的PFGE型别,不同地区间交叉传播感染的可能高。
- 方伟梁宇恒宁丹柯碧霞柯昌文邓小玲彭华林孙九峰王云新
- 关键词：NILOTICUSAGALACTIAEMLST
- 2015年广东省沙门菌监测及其耐药性分析被引量：27
- 2017年
- 目的 了解广东省腹泻患者感染沙门菌的情况,分析沙门菌的血清型分布和耐药特征.方法 采集粪便标本进行传统分离培养,对沙门菌进行血清分型和药物敏感试验.结果 2015年广东省沙门菌监测阳性率为7.64％,男女之比为1.52∶1,各年龄段患者均可感染沙门菌,以0～6岁的儿童感染为主,所占比例为81.74％.夏秋季沙门菌的分离率为10.73％,高于冬春季的分离率4.24％,差异有统计学意义（X2 =463.77,P〈0.01）.不同地区沙门菌分离率分别为：珠海16.82％, 河源15.85％, 阳江11.81％, 江门10.68％, 中山8.49％,茂名8.07％,揭阳8.05％,韶关7.35％,佛山6.97％,东莞6.03％,广州5.48％,湛江0.00％, 地区之间比较,差异有统计学意义（X2 =367.67,P〈0.01）.除1株沙门菌不能分型外,其余2 376株菌分为108种血清型.前4位优势血清型分别为4,5,12：i：-沙门菌、肠炎沙门菌、斯坦利沙门菌和鼠伤寒沙门菌.沙门菌对亚胺培南、阿奇霉素、头孢他啶、头孢噻肟和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑的敏感率较高,但多重耐药现象严重.结论 广东省人源沙门菌以4,5,12：i：-沙门菌和肠炎沙门菌为主.头孢他啶和头孢噻肟可作为治疗沙门菌感染的首选用药.沙门菌多重耐药现象严重,需要进一步加强耐药监测.
- 何冬梅柯碧霞曾洪辉杨彤梁宇恒谭海玲李柏生刘美真柯昌文
- 关键词：沙门菌属多重耐药细菌耐药性监测
- 2015-2016年传染病报告信息管理系统报告的广东省伤寒副伤寒流行状况和质量分析
- 目的 分析我国传染病报告信息管理系统2015-2016年广东省伤寒/副伤寒病例的报告情况，并通过分析临床诊断和实验室确诊病例的实验室检测和达到诊断标准的情况评价报告质量.方法 登陆中国疾病预防控制信息系统传染病报告信息管...
- 柯碧霞何冬梅刘美真谭海玲李柏生梁宇恒柯昌文
- 广东省2013—2014年食源性疾病主动监测的病原学特征分析被引量：24
- 2016年
- 目的 了解广东省腹泻病例中沙门菌、志贺菌、副溶血弧菌和4种致泻性大肠埃希菌［肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）、肠致病性大肠埃希菌（EPEC）、产志贺毒素大肠埃希菌（STEC）、肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）］的感染情况及其血清型别、耐药变化和分子特征。方法 对2013-2014年广东省食源性疾病主动监测检出的沙门菌、志贺菌、副溶血弧菌和4种致泻性大肠埃希菌菌株进行血清分型、药物敏感试验和PFGE分型。结果 2013-2014年检测粪便标本57 834份，分离到3 372株致病菌，检出率为5.83%；沙门菌的检出阳性率最高，其次是副溶血弧菌、致泻性大肠埃希菌、志贺菌。3 213株沙门菌分为143种血清型，最常见的血清型为鼠伤寒、4，5，12：i：-、肠炎、斯坦利和德尔卑沙门菌。沙门菌对头孢类和氟喹诺酮类药物均较敏感；不同血清型沙门菌对抗生素的耐药率有明显差异，10种最常见血清型中，肠炎沙门菌对头孢类药物的耐药率最高，德尔卑沙门菌对环丙沙星的耐药率最高。2 289株各血清型沙门菌的PFGE型别分布多样，表现出较大的指纹图谱多态性。85株副溶血弧菌分为10种血清型，最主要的血清型为O3：K6（61.18%），其次是O4：K8（10.59%）；tdh携带率高（81.18%），trh携带率较低（7.06%），有10株菌（11.76%）不携带该两种毒力基因；副溶血弧菌对亚胺培南、萘啶酸、复方新诺明、氯霉素、四环素的敏感率均〉95%。13株志贺菌分别为宋内志贺菌9株、福氏志贺菌3株、鲍氏志贺菌1株；对头孢他啶、环丙沙星、氯霉素较敏感（76.92%）。检出的86株致泻性大肠埃希菌中ETEC 29株（33.72%），EPEC 27株（31.39%），STEC 27株（31.39%），EIEC 3株（3.48%）。结论 2013-2014年广东省食源性疾病主动监测中沙门菌检出率最高（5.57%），其次是副溶血弧菌、致泻性大肠埃希菌、志贺菌；沙门�
- 柯碧霞何冬梅谭海玲曾洪辉杨彤李柏生梁宇恒卢玲玲梁骏华黄琼柯昌文
- 关键词：致病菌病原学特征
