郑方芳
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
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- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- PTPN12对心脏HERG钾通道的酪氨酸磷酸化水平调控作用的研究
- 研究背景: 长QT综合征(LQTS),又称延迟复极综合征,主要的临床表现包括室性心律失常(以尖端扭转性室性心动过速、室颤多见)、晕厥和猝死。根据病因分为先天性或遗传性长QT综合征,以及获得性长QT综合征两大类。其中,获...
- 郑方芳
- 关键词:酪氨酸磷酸化水平HERG钾通道
- 文献传递
- 酪氨酸的磷酸化及去磷酸化对心脏钾离子通道的调控
- 2011年
- 心脏钾离子通道是人体内广泛存在的、种类最多、作用最复杂的一类离子通道,并在人类心肌细胞动作电位的各个时程中发挥着重要的作用。近年来由于新兴技术如膜片钳技术、基因突变技术、分子克隆技术等诸多技术的运用和发展,人们对钾离子通道的基因表达、分子结构、生理病理作用及调控机制等方面都有了很深的认识,然而对蛋白磷酸化与去磷酸化对心脏钾离子通道的调控尤其是酪氨酸磷酸化和去磷酸化调控方面的研究却比较少,为此做一简单综述。
- 郑方芳孙一帆林吉进
- 关键词:钾离子通道HERG钾通道酪氨酸磷酸化去磷酸化
- 蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型12负性调控心脏HERG钾通道电流被引量:3
- 2013年
- 目的研究蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型12(PTPN12)对心脏HERG钾通道电流的调控作用。方法(1)质粒构建和基因转染:PCR技术构建各种质粒,应用脂质体将各种质粒转染HEK293细胞,经G418筛选获得稳定表达的细胞株;(2)应用抗PTPN12抗体进行Western blotting分析检测PTPN12的表达;(3)细胞电生理检测:应用膜片钳技术检测单独表达HERG组(HEK293/HERG细胞)、PTPN12过度表达组(将pCDNA3.1-PTPN12-RFP转染HEK293/HERG细胞)、PAO处理组(PTPN12/HERG组基础上加入抑制剂PAO)、herg突变组(将pCDNA3.1-PTPN12-RFP转染HEK293/HERGY327A-Y700A-Y845A细胞株)的HERG钾通道电流。结果(1)成功构建herg突变质粒和pCDNA3.1-PTPN12-RFP质粒,并获得稳定表达的细胞株;(2)共转染pCDNA3.1-PTPN12-RFP质粒的HEK293/HERG细胞在荧光显微镜下可观察到PTPN12-RFP在细胞中的表达,Western blotting可检测到PTPN12的表达;(3)PTPN12过度表达组脉冲电流密度明显低于对照组(P<0.01),PAO处理组和herg突变组电流密度明显高于PTPN12/HERG组(P<0.01)。结论 PTPN12对心脏HERG钾通道电流具有明显负性调控作用,其可能机制是PTPN12减弱了HERG钾通道酪氨酸磷酸化程度。这一发现有助于更深刻理解HERG钾通道调控机制和长QT综合征发病机制。
- 林吉进刘树楷郑方芳马青艳余宏任莉沈心远
- 关键词:长QT综合征HERG钾通道