李孜
- 作品数：39 被引量：97H指数：5
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组TRAIL的纯化及其对非小细胞肺癌细胞株的杀伤活性
- 2013年
- 目的:表达、纯化重组肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的活性片段,并观察其对非小细胞肺癌细胞株的杀伤活性。方法:利用已有的pGEx-4T-l/TRAIL重组质粒转化BL21/DE3菌;异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达谷胱甘肽转移酶(GST)标签的TRAIL,用GST-BIND树脂亲和层析柱纯化;SDS-PAGE电泳分析纯化结果;蛋白质超滤除盐、浓缩TRAIL;Bradford法定量。形态学观察肺癌细胞;乳酸脱氢酶(LDH)释放法确定TRAIL对肺癌细胞的杀伤活性。结果:共获得8.6 mg纯化TRAIL,其对A549、SPC-Al、HLAMP、95D、PGCL3、95C、H460等7株细胞株的IC50值分别为(2.33±0.22)μg/mL、(50.0±17.0)、(872.0±241.0)、(427.0±12.0)、(328.0±28.0)、(270.0±33.0)、(178.0±8.0)ng/mL。结论:相同组织类型的不同肺癌细胞株对重组TRAIL的敏感度不同,从低到高依次为A549、HLAMP、95D、PGCL3、95C、H460和SPCA1。
- 王飞朱郇悯韦雪梅刘嘉熙汤娟娟王嘉雯黎银燕陈晓湘李孜
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体肺癌药物敏感度
- 日本血吸虫CuZn-SOD基因全长cDNA的识别及真核表达载体的构建被引量：1
- 2004年
- 目的 识别日本血吸虫大陆株铜锌超氧化物歧化酶 (SjCuZn SOD)基因 ,构建SjCuZn SOD的真核表达载体。方法 将曼氏血吸虫 (Sm )的CuZn SOD全长cDNA序列上网比对 ,寻找Sj相关EST。设计特异性引物从尾蚴cDNA文库扩增相应序列 ,经双酶切、连接、转化 ,克隆入 pcDNA3 .0真核表达质粒 ,并鉴定阳性克隆。 结果 找到Sj相关EST(登录号BU794891) ,核酸阅读框 (ORF)分析和BLAST比对分析等方法判断为SjCuZn SOD完整的cDNA编码序列 ,含462bp完整阅读框 ,编码 15 4aa。经单双酶切、PCR扩增、核酸测序鉴定 ,验证成功构建了 pcDNA3 .0 SOD真核重组表达载体。 结论 成功构建真核重组表达载体 pcDNA3 .0 SOD ,为在真核表达系统研究SjCuZn
- 赵霞吴忠道李孜余新炳徐劲朱家勇
- 关键词：超氧化物歧化酶
- 重组日本血吸虫FKBP12基因的酶活性及其转录水平鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的对日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)FK506结合蛋白12(FKBP12)进行肽基脯氨酸顺反异构酶(peptidyl-prolyl cis-trans isomerase,PPIase)活性鉴定,并比较它与26 000 Mr的谷胱甘肽转移酶(Sj26GST)基因在成虫、尾蚴和虫卵的转录水平。方法从成虫RNA中RT-PCR扩增SjFKBP12基因,将其克隆入pGEX-4T-1载体中,诱导表达重组融合蛋白,经纯化后进行PPIase活性测定。利用RT-PCR半定量分析SjFKBP12基因与Sj26GST基因的转录水平。结果将SjFKBP12基因成功克隆入pGEX-4T-1载体中后,表达、纯化的重组融合蛋白有PPIase活性。SjFKBP12在尾蚴与虫卵期的转录水平相仿,都高于Sj26GST基因,是成虫期转录水平的1.5倍左右。结论成功鉴定了重组SjFKBP12酶活性,SjFKBP12在尾蚴和虫卵期较高的转录水平,为将其进行疫苗等研究提供了依据。
- 麦璟莹朱郇悯马长玲陈晓湘赵晶晶陈姗李孜
- 关键词：PPIASE
- 92例大学生耐卡那霉素肠球菌的分离鉴定及其相关因素
- 2008年
- 目的分离鉴定健康大学生粪便中的耐卡那霉素肠球菌,并调查相关因素。方法用卡那霉素ELB选择培养基分离培养92份健康大学生粪便中的肠球菌,调查他们的健康状况及生活习惯等。结果共鉴定出21例携带卡那霉素抗性肠球菌,71例阴性。耐卡那霉素肠球菌的分离率与饮食辛辣的相关性具有统计学意义("2=5.75,P<0.05);而与消化不良、胃肠不适和便秘的相关性无统计学意义("2<3.84,P>0.05)。结论耐卡那霉素肠球菌的分离率与饮食辛辣相关,与消化不良、胃肠不适和便秘等无相关性,其机制及其临床意义有待进一步的研究和随访。
- 黄静丽姜智晖曾香玲吴健仪李文华麦璟莹苏丹红李孜
- 关键词：肠球菌
- 日本血吸虫p50亲免素基因的扩增及其免疫学特性
- 2006年
- 目的扩增日本血吸虫(Sj)p50亲免素(IP)基因全长cDNA和DNA序列,进行原核克隆和研究其免疫学特性。方法从Sj成虫RNA中RT-PCR扩增Sjp50亲免素基因完整的编码阅读框,从Sj成虫基因组中扩增其DNA序列,对其cDNA序列和DNA序列进行比较分析,寻找内含子。将其cDNA序列克隆入pET30a(+)体中,原核表达并纯化表达产物,Western-blot比较重组蛋白与Sj体内相应天然蛋白的免疫原性和免疫反应性,间接免疫荧光法对p50亲免素进行组织定位。结果Sjp50IP基因DNA序列与cDNA相比,有6个内含子;重组p50IP与Sj体内的天然蛋白具有相同的免疫学特性,该蛋白位于Sj成虫的被膜上。结论成功扩增得到了Sjp50IP基因的全长编码区的cDNA序列和DNA序列,其DNA序列中有6个内含子;重组Sjp50IP的免疫学特性支持将该基因作为疫苗进行进一步的研究。
- 李孜余新炳吴忠道徐劲胡旭初
- 关键词：日本血吸虫中国大陆株免疫学特性
- 日本血吸虫新基因精氨酸酶的扩增及序列分析被引量：3
- 2004年
- 目的 获取并真核克隆日本血吸虫新基因精氨酸酶全长cDNA。方法 对本实验室曾获得精氨酸酶基因利用生物信息学进行分析 ,发现其 5’端尚缺一段序列 ;根据已知序列设计引物 ,用 5’端单巢式PCR从尾蚴文库中扩增 ,以获得精氨酸酶基因完整的阅读框 (ORF) ;用生物信息学技术对获得的精氨酸酶编码基因进行结构与功能的分析 ;并将新基因的完整编码阅读框克隆入真核表达载体pCDNA3 1。结果 用 5’端单巢式PCR从尾蚴文库中获得了精氨酸酶 5’端所缺序列 ,得到其完整的ORF ,其ORF长 10 95bp ,编码 36 4个氨基酸。利用生物信息学技术鉴定其为日本血吸虫精氨酸酶的完整cDNA序列。重组质粒经双酶切DCR及测序鉴定证明日本血吸虫精氨酸酶真核表达质粒构建成功。结论 成功获得、识别、扩增并克隆日本血吸虫精氨酸酶编码基因的全长cDNA。
- 李孜余新炳吴忠道徐劲彭寨玉田春林赵霞
- 关键词：日本血吸虫中国大陆株精氨酸酶克隆
- 日本血吸虫精氨酸酶基因启动子序列的扩增及序列分析
- 2005年
- 目的获取日本血吸虫(Sj)精氨酸酶(ARG)新基因的DNA编码序列及其启动子序列,实验验证ARG基因编码序列的完整性。方法以日本血吸虫成虫DNA做模板,PCR扩增ARG基因编码区的DNA序列并测序;根据SjARG基因已扩增的DNA序列设计2条巢式引物,用TaKaRaLATaqPCRCloninginvitroKit,扩增SjARG基因的启动子序列;对已扩增得到的序列进行TATA盒的寻找以分析启动子序列的位置,实验验证我们曾获取的SjARG新基因编码序列的完整性。结果扩增得到长约1000bpARG基因DNA序列,SjARG基因DNA序列内没有内含子,与cDNA序列完全一致。对启动子序列扩增后,得到一略大于250bp的序列,测序后分析发现其中有36bp与ARG基因DNA序列的5'端重叠。因此,将精氨酸酶基因的DNA序列又向前延伸了221bp,与前面得到的序列拼接后得到一条1486bp的总序列,将该序列在NCBI上进行ORF的寻找发现其最长的ORF达1164bp,起始密码子在第156位,终止密码子在第1319位,该起始密码子前32位为TATA盒的位置。因此,确定该SjARG基因全长cDNA编码序列长应为1164bp。结论成功扩增获得了日本血吸虫精氨酸酶基因编码区的DNA序列,其不含有内含子;并扩增得到了该基因的启动子序列,从而获得了SjARG基因真正的全长cDNA序列,为进一步的功能鉴定奠定了基础。
- 李孜余新炳吴忠道
- 关键词：日本血吸虫大陆株精氨酸酶启动子序列
- 可溶性转铁蛋白受体在小儿地中海贫血诊断中的价值被引量：4
- 2010年
- 转铁蛋白受体（transferring receptor,TfR）是一种跨膜糖蛋白,存在于大多数细胞表面,正常情况下,细胞内铁代谢所需的铁离子需经过TfR进行转运.血清可溶性TfR（sTfR）是循环于血清中的TfR胞外片段的一种形式,与机体组织铁需求相关,组织缺铁时sTfR水平可反映骨髓红细胞生成过程中缺铁的程度,患者sTfR水平越高缺铁越严重,因此目前sTfR主要用于缺铁性贫血（IDA）的诊断.
- 黄钰君伍绍国李孜区小冰华亮佟莉贞赖冬波何丽雅
- 关键词：可溶性转铁蛋白受体贫血诊断缺铁性贫血RECEPTOR血清可溶性
- 锰接触对大鼠生长发育的毒性影响被引量：1
- 2008年
- 目的评价锰对机体生长发育造成的毒性影响。方法24只SD大鼠随机分为2组,分别口服高、低剂量氯化锰(MnCl2·4H2O)。另选12只SD大鼠为对照组。检测大鼠作锰接触后对食物利用率、血清、脑匀浆的单胺氧化酶(MAO)和超氧化物岐化酶(SOD)活性的影响,以及对中脑黑质TH免疫反应阳性神经元的影响。结果锰接触60d后高、低剂量组大鼠的食物利用率无明显改变;大鼠血清和脑匀浆的MAO比对照组明显升高,而SOD活性则明显降低;中脑黑质、酪氨酸羟化酶(TH)免疫反应阳性神经元的反应强度、神经元数密度(NV)和反应阳性产物的相对光密度(OD),高、低剂量组大鼠均比对照组显著降低。结论短期的锰接触对大鼠的一般情况影响不大;随着锰接触剂量的增加,血清和脑匀浆的MAO则明显升高,而SOD活性明显降低;且锰接触会导致中脑黑质TH阳性反应神经元的损害。
- 钟华敏李孜
- 关键词：锰接触毒性研究
- 日本血吸虫翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)基因真核表达质粒的构建及其序列分析被引量：3
- 2004年
- 目的 研究日本血吸虫翻译控制肿瘤蛋白 (TCTP)基因的生物学功能。方法 根据已公布的日本血吸虫 TCTP(Sj TCTP)基因序列设计引物 ,从日本血吸虫成虫 c DNA文库中扩增出TCTP基因 ORF序列 ,并克隆到真核表达载体 pc DNA3.0中。结果 通过 PCR扩增、双酶切及测序鉴定证实重组质粒 pc DNA3.0 - TCTP已正确插入 Sj TCTP基因 ORF序列 ,该序列具有 TCTP特征性 TCTP1和 TCTP2结构。结论 Sj TCTP基因真核表达质粒构建成功 ,为研究 Sj
- 阮志燕吴忠道李孜徐劲曹爱莲余新炳
- 关键词：日本血吸虫基因克隆
