米琼宇 作品数:8 被引量:16 H指数:3 供职机构: 南京医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 南京市医学科技发展项目 江苏省教育厅自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
两种不同的染色方法评价大鼠心肌缺血-再灌注损伤程度 被引量:2 2009年 目的:探讨评估心肌缺血-再灌注损伤程度的两种染色方法。方法:大鼠冠状动脉左前降支结扎缺血30min,再灌注6h形成缺血-再灌注损伤动物模型。超声检测心功能指标,并分别用TTC单染法和Evans blue-TTC双染法评价心肌的损伤程度。结果:Evans blue-TTC双染法可以评价出心肌的缺血组织面积、梗死组织面积和正常组织面积,而TTC单染法只能测出组织的梗死面积和缺血面积,不能排除由于结扎位置不同而引起的误差。同时,双染法得出的梗死面积/危险面积的比值(I/R)与心功能指标的相关性,比单染法得出的梗死面积/左心室的面积比值(I/T)与心功能指标的相关性更高。结论:Evans blue-TTC双染法比TTC单染法能更客观更准确的反映出心肌组织缺血-再灌注损伤的程度。 杨帆 赵文来 米琼宇 谢利平 刘振 张雯 李晓珍 黄艳 季勇关键词:心肌缺血-再灌注损伤 EVANS 梗死面积 17β-雌二醇对大鼠蛛网膜下腔出血后迟发型脑血管痉挛的作用 被引量:3 2012年 目的研究17β-雌二醇(E2)对蛛网膜下腔出血(SAH)后迟发型脑血管痉挛(DCV)的抑制作用。方法雄性Wistar大鼠50只随机分为5组:①空白组,②假穿刺组,③SAH组,④SAH+E2组,⑤SAH+安慰剂组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中内皮素-1(ET-1)含量,末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法(TUNEL)检测颞叶神经元凋亡情况,通过测定基底动脉血管横截面积判断脑血管痉挛情况。结果实验结果显示SAH后7 d SAH+E2组基底动脉横截面积与SAH组和SAH+安慰剂组相比明显变大(P<0.01);与SAH组和SAH+安慰剂组相比,SAH+E2组血浆ET-1浓度明显减少(P<0.01);TUNEL染色显示SAH+E2组颞叶皮质神经元凋亡程度较SAH组和SAH+安慰剂组显著性减轻。结论持续给予E2维持其生理浓度可以有效预防SAH后迟发型脑血管痉挛,部分可能与E2可以抑制ET-1的产生有关。 刘振 郝芳芳 罗良生 李莉 米琼宇 黄宗堃关键词:雌二醇 内皮素-1 蛛网膜下腔出血 同时测定小鼠血浆中氯吡格雷及其代谢产物浓度的LC-MS/MS法及其药代动力学研究 被引量:3 2017年 目的 :建立并验证小鼠血浆中氯吡格雷及其代谢物的LC-MS/MS检测方法 ,研究氯吡格雷在小鼠体内的药代动力学特征。方法:以吡罗昔康为内标,经乙腈沉淀蛋白后,采用电喷雾离子源(ESI)正离子扫描模式多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)方式检测氯吡格雷及其活性代谢物、羧酸代谢物和葡萄糖醛酸代谢物的血药浓度。色谱柱为安捷伦Poroshell120 SB-C18柱(100 mm×2.1 mm,2.7μm);流动相为水(含0.1%甲酸)和乙腈(含0.1%甲酸)并按梯度洗脱。小鼠单次灌胃给予氯吡格雷10 mg/kg,测定氯吡格雷及其3种主要代谢物的血药浓度,并研究其药代动力学特征。结果:氯吡格雷及其代谢产物在一定测定范围内均呈现良好的线性关系(r>0.99),提取回收率均大于80%,未见明显基质效应,其日内、日间精密度均较好(RSD<15%),准确度相对误差(RE)为-2.40%~5.00%,稳定性较好。在小鼠的药代动力学研究中,该方法能达到预期的实验要求。结论:所建立的LC-MS/MS分析方法能快速、准确地测定小鼠血浆中氯吡格雷及其代谢产物浓度,其专属性、回收率、基质效应、稳定性、精密度和准确度等均符合生物样品测定要求。 张梦然 邰婷 米琼宇 吉金子 黄贝贝 贾雨萌 谢红光关键词:氯吡格雷 LC-MS/MS 药物代谢 黄芪甲苷IV调节MRP3的表达及功能研究 被引量:1 2019年 目的:研究黄芪甲苷IV(AS-IV)对人肝癌细胞HepG2中多药耐药相关蛋白-3(MRP3)的调节作用,为AS-IV可能引发的药物相互作用阐明机制。方法:培养HepG2细胞,用不同浓度AS-IV进行干预,Western blotting方法检测细胞中MRP3的蛋白水平,流式细胞术检测胞内5-羧基荧光素(5-CF)的荧光强度,反映MRP的功能;给予MRP3 si RNA干扰,观察AS-IV诱导的MRP3蛋白表达是否增加其外排转运功能;提取胞核、总蛋白,检测胞核核因子E2相关因子2(Nrf2)、总Nrf2蛋白水平;给予Nrf2 si RNA干扰,观察AS-IV诱导的MRP3蛋白表达是否依赖于Nrf2。结果:200μmol/L AS-IV作用48 h后,细胞MRP3的蛋白水平显著增加(P<0.05),胞内5-CF的平均荧光强度(MFI)明显低于对照组(P<0.05),与单独给予AS-IV组相比,给予MRP3 si RNA干扰显著增加了胞内5-CF的MFI(P<0.05)。AS-IV增加了胞核内Nrf2的蛋白水平(P<0.01),亦增加了总Nrf2的蛋白表达(P<0.01)。给予Nrf2 si RNA干扰后,AS-IV诱导上调的MRP3被显著抑制(P<0.05)。结论:AS-IV可通过上调MRP3的蛋白表达,增加其外排转运功能,Nrf2的激活在AS-IV诱导MRP3蛋白表达中起着重要的作用。本研究提示,AS-IV与MRP3底物合用时,可能会产生药物-药物相互作用。 米琼宇 吉金子 邰婷 谷彤彤 周缓关键词:核因子E2相关因子2 药物-药物相互作用 阿司匹林改善2型糖尿病患者血小板上内皮型一氧化氮合酶的功能 被引量:3 2008年 目的:探讨阿司匹林对2型糖尿病患者血小板上内皮型一氧化氮合酶(endothelium-type nitric oxide synthase,eNOS)功能的影响。方法:分别用浓度为25、50、100μmol/L阿司匹林处理正常人和2型糖尿病患者的血小板,用比浊法测定血小板聚集率;根据L-[3H]-精氨酸在eNOS的作用下转化为L-[3H]-瓜氨酸的原理检测eNOS活性;用试剂盒检测cGMP的含量。结果:与对照组相比,阿司匹林可明显降低正常人和2型糖尿病患者的血小板聚集率,增强eNOS的活性,增加cGMP的含量,并且随着阿司匹林浓度的增加,其作用更明显(差异有显著性)。而同一浓度的阿司匹林对正常人血小板的作用比对2型糖尿病患者的作用更加明显。结论:阿司匹林可以浓度依赖性的改善2型糖尿病患者血小板上eNOS功能。 崔伯塔 米琼宇 谢利平 杨帆 黄艳 季勇关键词:阿司匹林 2型糖尿病 血小板 聚集率 内皮型一氧化氮合酶 中肾蛋白检测对癌性和结核性胸腔积液的鉴别 被引量:1 2013年 目的探讨癌性和结核性胸腔积液(简称胸水)中中肾蛋白(MK)水平及其潜在的诊断价值,并评价其与癌胚抗原(CEA)联合检测在鉴别癌性和结核性胸水中的意义。方法选择65例肺癌伴胸水患者作为癌性胸水组,57例结核性胸水患者作为对照组,用ELISA法检测胸水MK水平,电化学发光免疫分析法检测CEA水平。结果癌性胸水组MK水平[(361.9±194.5)ng/mL]高于结核性胸水组[(119.6±78.1)ng/mL,P<0.001];癌性胸水组CEA水平[(76.3±42.2)ng/mL]高于结核性胸水组[(5.6±4.1)ng/mL,P<0.001]。Ⅳ期肺癌伴恶性胸水患者MK水平[(426.9±162.5)ng/mL]高于Ⅱ+Ⅲ期肺癌患者[(286.1±138.4)ng/mL,P<0.001];化疗后MK水平[(239.4±180.6)ng/mL]低于于化疗前[(356.3±199.4)ng/mL,P<0.001]。胸水MK、CEA诊断癌性胸水的ROC曲线下面积(AUCROC)分别为0.805(95%可信区间:0.84~0.96)、0.863(95%可信区间:0.85~0.97)。当MK的cut off值为183.4 ng/mL时,诊断癌性胸水的敏感性为78.5%,特异性为78.9%,准确度为78.7%;当CEA的cut off值为10.2 ng/mL时,诊断癌性胸水的敏感性、特异性、准确度分别为73.8%、87.7%、80.3%;两指标联合应用时敏感性、特异性、准确度分别提高至87.7%、91.2%、89.3%。结论胸水MK水平可为癌性胸水的诊断提供参考价值,MK与CEA联合检测对癌性和结核性胸水的鉴别有参考价值。 米琼宇 邰婷 潘玉琴 何帮顺 赵树立关键词:胸腔积液 癌胚抗原 结核 四联活菌制剂增加小鼠脾脏和肠系膜淋巴结多种白细胞介素mRNA合成 被引量:1 2017年 目的探讨四联活菌(保加利亚杆菌、幼儿双歧杆菌、芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌)制剂对小鼠肠道免疫相关分子的影响。方法将18只BALB/c小鼠随机分成对照组、益生菌培养上清组和菌液组。每只小鼠每天灌胃1次,连续处理1周。实时定量PCR检测脾脏和肠系膜淋巴结组织白细胞介素1α(IL-1α)、IL-2、IL-4、IL-6、IL-12α、IL-17A、IL-17F、IL-10、IL-18和IL-21、α干扰素(IFN-α)、IFN-β、IFN-γ、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)的m RNA水平,ELISA检测血清IL-17A、IL-21水平。结果与对照组相比,喂食益生菌培养上清组小鼠脾脏组织各种细胞因子的m RNA水平无明显改变,但喂食四联活菌可增加IL-12α、IL-17A、IL-17F和IL-21的m RNA水平;喂食益生菌培养上清和喂食四联活菌均可增加肠系膜组织IL-12α、IL-17F和IL-21的m RNA水平;外周血中IL-17F的水平升高。结论益生菌处理可增加机体白细胞介素水平。 周颖 卓倩 周静 米琼宇 吉金子 谢静燕 赵树立关键词:肠道益生菌 小鼠 脾脏 黄芪甲苷Ⅳ通过影响β-actin对内皮型一氧化氮合酶的调节作用 被引量:2 2013年 目的:研究黄芪甲苷IV(AS-IV)对体外培养脐静脉内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的调节作用及可能的机制。方法:培养人脐静脉内皮细胞系EA.Hy926,用AS-IV进行干预,同时给予或不给予骨架蛋白β-actin聚合稳定剂phalloidin,用免疫共沉淀方法检测eNOS与单体β-actin结合状态的变化,用L-3H-精氨酸转化为L-3H-瓜氨酸的同位素法测定eNOS活性,I125环一磷酸鸟苷(cGMP)放射免疫法检测细胞内cGMP水平,Western blotting方法检测细胞中eNOS和蛋白激酶B(Akt)磷酸化水平,总蛋白水平。结果:①AS-IV作用10 min后,细胞内单体β-actin与eNOS的结合明显增加(P<0.05或P<0.01),预先给予phalloidin显著抑制了AS-IV引起的两者结合的增加(P<0.01)。②AS-IV明显增加了eNOS活性(P<0.05)、cGMP含量(P<0.01)、eNOS Ser-1177磷酸化水平(P<0.01)、Akt Ser-473磷酸化水平(P<0.001),预先给予phalloidin明显降低了AS-IV引起的eNOS活性(P<0.05)、cGMP含量(P<0.01)和磷酸化水平的增加(P<0.01),但对Akt的磷酸化没有影响。结论:单体β-actin与eNOS的结合在AS-IV激活eNOS的过程中起着不可或缺作用,其主要是通过促进Akt对eNOS Ser-1177的磷酸化来实现的。 米琼宇 邰婷 潘玉琴 何帮顺 赵树立关键词:骨架蛋白 内皮型一氧化氮合酶