王静
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 沉默甲酰肽受体2基因对人胶质瘤U87细胞生长和侵袭迁移能力的影响被引量：2
- 2018年
- 目的探讨沉默甲酰肽受体2（FPR2）基因对胶质瘤U87细胞生长、迁移和侵袭能力的影响及其可能机制。方法采用Western blot法和免疫组化法检测正常胶质细胞、胶质瘤细胞、正常脑组织和胶质瘤组织中FPR2蛋白的表达水平。以小干扰RNA（siRNA）沉默人胶质瘤U87细胞中FPR2基因的表达，采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测FPR2 mRNA和蛋白的表达量；采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测转染FPR2 siRNA 24、48和72 h后对U87细胞增殖的作用；采用流式细胞术检测FPR2基因沉默对U87细胞凋亡水平的影响。以Transwell小室和裸鼠成瘤实验检测FPR2基因沉默对U87细胞迁移侵袭和成瘤能力的影响。采用Western blot法和酶联免疫吸附实验检测细胞周期和迁移相关蛋白的表达和释放水平。结果与正常胶质细胞和正常脑组织比较，FPR2蛋白在胶质瘤细胞和胶质瘤组织中的表达明显上调。与空白对照组和阴性对照组比较，siRNA干扰组U87细胞中FPR2 mRNA和蛋白的相对表达量明显降低。siRNA干扰组U87细胞在转染24、48和72 h时的生长抑制率分别为（23.1±5.1）%、（39.6±5.6）%和（44.4±6.7）%，与阴性对照组[分别为（3.2±0.6）%、（5.7±0.8）%和（7.9±0.9）%]比较，差异有统计学意义（P〈0.05）。siRNA干扰组U87细胞在转染48 h后的凋亡率为（17.4±2.1）%，明显高于阴性对照组[（5.4±0.5）%]和空白对照组[（3.8±0.3）%]；siRNA干扰组迁移细胞数为（108.7±9.5）个，明显低于空白对照组[（312.9±17.5）个]和阴性对照组[（304.4±15.7）个]；siRNA干扰组侵袭细胞数为（19.3±3.2）个，明显低于空白对照组[（106.9±8.5）个]和阴性对照组[（102.4±7.4）个]，差异均有统计学意义（P〈0.05）。与阴性对照组比较，siRNA干扰组的裸鼠成瘤能力明显降低。siRNA干扰可明显下调细胞周期蛋白cyclin D1的表达和血管内皮生长因子（VEGF）的表达�
- 刘利李星施静李莉王静罗振钊
- 关键词：胶质瘤U87细胞细胞增殖
- Annexin-A1模拟肽Ac2-26对大鼠星形胶质细胞活化的影响被引量：2
- 2019年
- 目的评价Annexin-A1模拟肽Ac2-26对大鼠星形胶质细胞活化的影响。方法原代培养大鼠皮层组织星形胶质细胞,按随机排序的方法分为4组(n=24):对照组(C组)、LPS组、LPS+乱序肽对照组(LPS+Src组)和LPS+Ac2-26组。LPS组加入LPS终浓度1 mg/ml;LPS+Src组加入LPS终浓度1 mg/ml和乱序肽终浓度3.3 mmol/L;LPS+Ac2-26组加入LPS终浓度1 mg/ml和Ac2-26终浓度3.3 mmol/L。孵育24 h后采用CCK-8法测定细胞存活率,采用Transwell小室测定细胞迁移率,ELISA法测定上清液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1-β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)浓度,Western blot检测星形胶质细胞神经胶质酸性蛋白(GFAP)、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、c-Jun N-末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)的表达水平。计算p-ERK/ERK比值、p-JNK/JNK比值、p-p38MAPK/p38MAPK比值。结果与C组比较,LPS组GFAP表达上调,迁移率、上清液TNF-α、IL-1β、MCP-1和MIP-1α浓度、p-ERK/ERK比值、p-JNK/JNK比值和p-p38MAPK/p38MAPK比值升高(P<0.05),细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05);与LPS组比较,LPS+Ac2-26组GFAP表达下调,迁移率、上清液TNF-α、IL-1β、MCP-1和MIP-1α浓度、p-JNK/JNK比值和p-p38MAPK/p38MAPK比值降低(P<0.05),LPS+Src组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论Ac2-26可抑制大鼠星形胶质细胞活化,产生抗炎作用。
- 罗振钊魏礼清胡绘孔曼王静谭哲琼朱满李星施静卢忠心
- 关键词：星形细胞
- 微小RNA-34a靶向X连锁凋亡抑制蛋白基因对肝癌细胞增殖的影响被引量：8
- 2015年
- 目的 观察微小RNA-34a（miR-34a）及其靶基因X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）对肝癌细胞增殖活力和细胞凋亡的影响及其能机制.方法 通过脂质体将人工合成的miR-34a模拟物及其阴性对照以终质量浓度200 nmol/L转染人肝癌SMMC7721细胞,采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测转染后SMMC7721细胞的增殖活力,采用流式细胞术检测细胞凋亡,并进一步采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）和Western blot分析XIAP的表达水平.结果 转染miR-34a模拟物的实验组细胞的增殖抑制率在24、48、72 h均显著高于对照组细胞（P＜0.01）,并且在72h转染组细胞凋亡率（6.98±0.13）％高于阴性对照组（4.89 ±0.12）％和空白组（4.02±0.21）％（P＜0.05）.miR-34a模拟物转染SMMC7721细胞后,XIAP蛋白在空白组、转染组和阴性对照组的相对表达量分别为0.942±0.028、0.489±0.033和0.982±0.032,转染组较其他两组明显降低（P＜0.05）.结论 miR-34a可抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与其下调XIAP的表达有关.
- 张正威卢忠心刘水逸孔晓宇王静魏礼清
- 关键词：X连锁凋亡抑制蛋白
- 2022年湖北省人与家养动物中荆门蜱病毒感染状况初步研究被引量：1
- 2023年
- 目的对2022年湖北省人和家养动物血清中荆门蜱病毒(JMTV)的抗体阳性率进行初步研究,评估荆门蜱病毒感染人群和动物的风险。方法将JMTV NS3蛋白在大肠埃希菌中表达并纯化,制备ELISA包被抗原,利用人和动物血清分别确定cut-off值;收集湖北省多个市牛羊养殖场采集的牛、羊血清,武汉市中心医院体检健康人血清,对这些血清样本以及实验室保存的林区居民血清进行JMTV特异性抗体以及核酸检测。结果初步建立基于NS3蛋白的JMTV抗体检测酶联免疫吸附试验(ELISA)。确定人血清、牛血清和羊血清的cut-off值分别为0.342、0.098和0.298。44份牛血清和193份羊血清中JMTV抗体阳性率分别为4.55%和3.63%。174份体检健康人和13份林区居民血清JMTV抗体结果均为阴性。所有样本中均未检测到JMTV的核酸片段。结论家养动物牛、羊血清中检出JMTV特异性抗体,提示需关注牛、羊作为蜱携带者导致病毒扩散的风险。
- 张秀丹李贝杰王静孙晖郑雅匀罗雪莲
- 关键词：NS3酶联免疫吸附试验血清学
