郎丰超
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国科学院昆明动物研究所更多>>
- 发文基金：云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢病毒表达载体的构建及沉默FOXQ1基因在大肠癌细胞系DLD-1中的表达被引量：3
- 2014年
- 目的:构建FOXQ1基因shRNA慢病毒干扰系统,沉默FOXQ1基因在大肠癌细胞系DLD-1中的表达.方法:根据FOXQ1基因的序列,设计合成3对shRNA干扰序列,退火后连接到载体质粒PLKO.1-puro,将重组质粒转化至STBl3感受态中,涂板培养挑取单菌落,摇菌后小提质粒,选取酶切及测序鉴定正确的重组质粒去内毒素大提,将质粒与辅助包装质粒pRSV-rev、pMDlg-pRRE和pCMV-VSV-G利用磷酸钙法共转染293-T细胞,收集病毒上清,感染目的细胞DLD-1,嘌呤霉素筛选FOXQ1沉默细胞,经荧光定量PCR及Western blot检测干扰效果.结果:酶切及测序结果显示shRNA成功插入载体PLKO.1-puro中,共转染293-T细胞成功获取病毒上清,感染DLD1细胞,经嘌呤霉素筛选出FOXQ1沉默细胞,荧光定量PCR及Western blot鉴定FOXQ1基因表达最高抑制率为90.4%.结论:通过构建FOXQ1基因shRNA慢病毒干扰系统,成功获取FOXQ1基因沉默细胞.为后续FOXQ1基因在肿瘤发生发展的研究奠定实验基础.
- 白璇唐慧郎丰超郭强
- 关键词：慢病毒载体RNA干扰基因沉默
- 一种树鼩单纯疱疹病毒性角膜炎HSK模型的构建、评估方法及其应用
- 本发明公开了一种树鼩单纯疱疹病毒性角膜炎动物模型的构建、评估方法及应用。本发明通过单纯疱疹病毒HSV-1经眼睛接种感染树鼩，建立树鼩单纯疱疹病毒性角膜炎模型，并利用裂隙灯检查、qPCR、qRT-PCR、免疫组化、原位杂交...
- 李丽红周巨民陈桂俊杨卫郎丰超杨丽萍王二林李欣李卓然
- 文献传递
- 一种单纯疱疹病毒感染树鼩动物模型的构建、评估方法及其应用
- 本发明公开了一种HSV感染树鼩动物模型的构建、评估方法及应用。本发明通过单纯疱疹病毒HSV-1经眼睛接种感染树鼩，建立HSV感染树鼩动物模型，并利用PCR、qRT-PCR、免疫组化、免疫荧光、原位杂交、体外共培养实验、组...
- 周巨民李丽红陈桂俊杨卫郎丰超杨丽萍李卓然李欣王二林
- 文献传递
