白宁宁
- 作品数：10 被引量：16H指数：3
- 供职机构：上海交通大学附属第六人民医院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 生存素对3T3-L1脂肪细胞中载脂蛋白E表达和分泌的影响
- 2020年
- 目的:探讨生存素(Survivin)对3T3-L1脂肪细胞中载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)表达和分泌的影响。方法:构建Survivin过表达慢病毒载体及其对照载体,分别感染3T3-L1前脂肪细胞并进行分化培养。在分化第8天对细胞进行转录组分析。采用实时定量PCR检测3T3-L1脂肪细胞中ApoE mRNA的表达,蛋白质印迹法检测胞内及分泌的APOE蛋白表达水平。结果:建立了稳定过表达Survivin的3T3-L1前脂肪细胞株,分化培养至第8天,过表达Survivin不影响脂肪细胞分化。转录组分析结果显示ApoE具有较高表达丰度,并且载脂蛋白家族中只有ApoE发生明显下调。Survivin过表达组细胞ApoE mRNA水平(t=9.676,P<0.01)以及蛋白水平(t=4.183,P<0.05)均显著低于对照组,并且细胞培养上清液中APOE分泌蛋白的表达水平同样显著低于对照组(t=5.683,P<0.01)。结论:Survivin在3T3-L1脂肪细胞中过表达时,能够在转录以及蛋白水平特异性下调3T3-L1脂肪细胞ApoE的表达。
- 陈树青米日阿依·阿里木江白宁宁杨颖马晓静
- 关键词：生存素3T3-L1脂肪细胞载脂蛋白E
- HtrA 1基因敲除对小鼠葡萄糖代谢及胰岛功能的影响
- 2022年
- 目的探讨HtrA 1基因敲除对小鼠糖代谢及胰岛功能的影响。方法选取6周龄雄性野生型C57BL/6J小鼠(WT小鼠)和HtrA 1基因敲除小鼠(KO小鼠)按照同窝随机对照原则分组,分别给予高脂饮食(脂肪占总热量的60%)或普脂饮食(脂肪占总热量的5%),记录喂养16周时两组WT小鼠、KO小鼠的体重及喂养期间摄食量。对18周龄(普脂或高脂喂养12周)小鼠行葡萄糖耐量试验(IPGTT),并测定空腹胰岛素水平,进一步对21周龄(高脂喂养15周)小鼠行葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)试验,观察糖代谢及胰岛素分泌情况。分离小鼠胰岛在细胞水平行GSIS试验,测定胰岛素水平。取22周龄(高脂喂养16周)小鼠胰腺组织行组织切片,进行胰岛素(绿色)和胰高血糖素(红色)免疫荧光双染,以及胰岛素(绿色)和CD31(红色)免疫荧光双染。应用ZEN 2.0软件对胰岛中CD31水平进行定量,比较WT小鼠与KO小鼠胰岛中CD31的平均荧光强度。结果高脂饮食组或普脂饮食组的KO与WT小鼠的体重和摄食量的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。普脂饮食组KO小鼠糖负荷10、20、120 min时的血糖水平均显著高于同组WT小鼠(P值均<0.05),空腹血糖及糖负荷后30、45、60、90 min时的血糖水平与同组WT小鼠的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。高脂饮食组KO小鼠糖负荷10、20、30、45 min时血糖水平均显著高于同组WT小鼠(P值均<0.05),空腹血糖及糖负荷后60、90、120 min时血糖水平与同组WT小鼠的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。18周龄普脂饮食组WT小鼠与KO小鼠空腹胰岛素水平的差异无统计学意义(P>0.05),高脂饮食组KO小鼠空腹胰岛素水平显著低于WT小鼠(P<0.05)。21周龄高脂饮食组空腹及注射葡萄糖后15 min时KO小鼠的胰岛素水平均显著低于WT小鼠(P值均<0.05),KO小鼠与WT小鼠注射葡萄糖后30 min时胰岛素水平的差异无统计学意义(P>0.05)。经高糖刺激(20 mmol/L葡萄糖处理)的KO小鼠胰
- 高新雨倪嘉成白宁宁张菁高琼媚李华婷杨颖方启晨
- 关键词：葡萄糖代谢胰岛细胞
- 成纤维细胞生长因子19转录活性及上游结合元件分析
- 2017年
- 目的构建FGF19基因启动子区荧光素酶报告基因质粒,并研究分析其启动子区的转录活性和结合元件。方法设计特异性引物PCR扩增基因组DNA,得到长为3323bp的FGF19基因启动子区片段,将此PCR产物插入荧光素酶报告基因载体p GL3-Basic Vector,获得全长为3323bp的FGF19基因启动子区荧光素酶报告基因质粒。在此基础上设计特异性引物,构建5'端系列缺失荧光素酶报告基因质粒。通过瞬时转染实验检测所构建质粒的相对荧光素酶活性,分析不同启动子区片段对FGF19基因转录活性的影响,并用软件预测影响启动子转录活性的关键转录因子。结果构建了7个FGF19基因启动子区荧光素酶报告基因质粒,经双酶切和测序验证均正确。瞬时转染及荧光素酶报告基因分析实验发现启动子区-2351^-2316是调控FGF19启动子转录活性的重要序列,且在线软件预测该序列存在潜在的转录因子位点。结论 FGF19基因启动子区-2351^-2316是调控其启动子转录活性的关键位置。
- 徐宜兰陈淑芹张菁白宁宁方启晨
- 关键词：转录调控启动子质粒构建
- 肠道菌群与糖尿病关系的研究进展被引量：9
- 2017年
- 糖尿病的发生率正在不断上升,已成为威胁人类健康和生活质量的全球性疾病。但对于糖尿病的病因尚未完全明确,目前认为主要是遗传和环境因素共同作用的结果。研究发现,人体肠道菌群的代谢活动与宿主营养、代谢与免疫功能密切相关,是影响糖尿病的一个重要环境因素。本文主要就肠道菌群与糖尿病的关系的最新研究进展进行综述。
- 白宁宁张菁方启晨
- 关键词：肠道菌群糖尿病血糖代谢
- 自噬核心蛋白ATG101对米色脂肪细胞分化和产热的影响被引量：3
- 2020年
- 目的:探究自噬相关蛋白101(autophagyrelated 101,ATG101)对米色脂肪细胞增殖、分化和产热过程的影响。方法:将小鼠血管基质细胞(stromal vascular fraction,SVF)向米色脂肪细胞诱导分化,运用实时定量PCR及蛋白质印迹法检测诱导分化过程中(0、2、4、6和8 d)Atg101 mRNA和蛋白表达。使用慢病毒介导的shRNA在分化前敲减Atg101并诱导分化成米色脂肪细胞后,运用实时定量PCR检测成熟脂肪细胞(6 d)标志基因表达,油红O染色观察脂滴形态;同时检测分化过程中(0、2、4和6 d)产热相关基因的表达。结果:ATG101在米色脂肪细胞自然分化过程中表达量逐渐增加;Atg101敲减后,成熟米色脂肪细胞标志基因脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4,Fabp4),诱导细胞死亡DNA片断化因子α样效应因子(cell death-inducing DNA fragmentation factor-α-like effector A,Cidea)和葡萄糖转运体4(glucose transporter 4,Glut4)的表达较对照组明显降低(均P<0.05),脂滴生成受损。同时,Atg101的敲减使米色脂肪细胞中产热相关基因PR结构域蛋白16(PR domain-containing 16,Prdm16),Cidea和解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,Ucp1)的表达也明显减少(均P<0.05)。结论:ATG101参与米色脂肪细胞分化过程;下调ATG101表达影响产热功能发挥。
- 马静远李少博杨迪白宁宁米日阿依·阿里木江杨颖韩峻峰
- 关键词：自噬成脂分化产热
- 皮肤桥蛋白在肥胖小鼠脂肪中的表达
- 2018年
- 目的:观察细胞外基质成员皮肤桥蛋白(dermatopontin,DPT)基因的组织表达谱,以及在饮食诱导肥胖小鼠脂肪中的表达变化;探讨罗格列酮对3T3-L1脂肪细胞DPT基因表达的调控。方法:运用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测6周龄小鼠主要组织的DPT mRNA和蛋白表达,以及正常和高脂饮食小鼠脂肪中的DPT表达;检测DPT在小鼠脂肪组织血管基质细胞和脂肪细胞中的表达差异。将3T3-L1细胞诱导分化为脂肪细胞,并以0.25、0.5、1、2μmol/L罗格列酮处理24 h,或以2μmol/L罗格列酮处理4、12、24、48 h,检测分化过程中及罗格列酮处理后DPT的表达。结果:DPT在小鼠脂肪中高度表达,高脂饮食16周后明显增加;DPT主要来源于脂肪细胞,且在3T3-L1细胞分化过程中的表达逐渐增加;不同剂量罗格列酮处理脂肪细胞24 h可降低DPT的表达量;2μmol/L罗格列酮处理脂肪细胞24、48 h后,DPT表达量明显降低。结论:肥胖状态下,脂肪组织中DPT的表达明显增加,罗格列酮对3T3-L1脂肪细胞DPT的表达具有调控作用,提示DPT可能参与肥胖的发生。
- 白宁宁严寒琚丽萍陈淑芹张菁胡瑞玮杨颖方启晨
- 关键词：肥胖脂肪组织罗格列酮
- Wfs1基因敲除小鼠肝脏芯片数据的生物信息学分析
- 2019年
- 目的:通过生物信息学方法分析Wfs1基因敲除小鼠肝脏的基因表达谱芯片,探讨WFS1基因突变的潜在致病机制。方法:从美国国立生物技术信息中心GEO数据库下载基因表达谱芯片数据(GSE55143),利用分析工具GEO2R进行差异表达基因筛选,通过在线富集分析网站进行差异表达基因的GO以及KEGG通路富集分析,并使用STRING数据库及Cytoscape软件构建蛋白质相互作用网络。结果:筛选出198个差异表达基因,其中有96个上调基因,102个下调基因。GO和KEGG富集分析表明差异表达基因主要富集于脂肪酸生物合成和初级胆汁酸生物合成这两条信号通路。蛋白质相互作用网络分析发现26个核心基因。结论:本研究筛选出的差异表达基因及相关富集分析可促进对WFS1基因突变致病机制的进一步理解。
- 胡瑞玮陈淑芹白宁宁张菁高新雨严寒方启晨
- 关键词：生物信息学差异表达基因
- 去泛素化酶USP2对米色脂肪产热功能的影响被引量：1
- 2021年
- 目的探讨去泛素化酶2(ubiquitin-specific protease 2,USP2)在白色脂肪棕色化过程中的作用及其潜在机制。方法运用实时定量PCR和Western blot法检测USP2在小鼠代谢组织中的表达谱。检测米色脂肪细胞诱导分化过程中(0、2、4、6、8天)USP2 mRNA和蛋白表达。建立小鼠白色脂肪棕色化模型,检测USP2 mRNA的表达。利用药物干预成熟脂肪细胞激活交感神经-肾上腺素通路,检测USP2 mRNA和蛋白表达。使用USP2特异性抑制剂ML364处理成熟米色脂肪细胞,检测产热相关基因的变化。结果USP2在小鼠代谢器官中均有表达,且在肌肉中表达最高。USP2在米色脂肪细胞自然分化过程中表达量逐渐增加。在寒冷刺激和游泳训练建立的小鼠白色脂肪棕色化模型中,其皮下腹股沟白色脂肪组织和肩胛部棕色脂肪组织中USP2的mRNA表达显著升高。利用ISO和cAMP干预成熟米色脂肪细胞后,USP2 mRNA和蛋白表达明显升高。利用USP2特异性抑制剂ML364干预成熟米色脂肪细胞后,产热相关基因mRNA表达明显下调,UCP1蛋白表达下降。结论USP2参与米色脂肪细胞的发生、发展过程,抑制USP2的活性会影响其产热功能。
- 徐跃洁白宁宁米日阿依·阿里木江杨颖潘洁敏
- 人二硫键氧化还原酶类似蛋白基因启动子克隆和上游抑制元件分析
- 2016年
- 目的克隆Dsb A-L基因启动子,并对其活性进行初步分析。方法以人基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增Dsb A-L基因5'端2115bp片段(从翻译起始点ATG上游-2128^-14区域)。将PCR产物插入荧光素酶报告基因载体p GL3-basic。随后,构建5'端系列缺失的报告基因质粒。将构建的一系列质粒转染3T3-L1和HEK 293细胞,检测荧光素酶活性。利用在线软件MAPPER预测转录调控关键序列潜在的转录因子结合位点。通过Real-time PCR比较这些转录因子在肥胖和正常人脂肪组织中的表达。结果成功构建人Dsb A-L启动子报告基因质粒。系列缺失分析表明-2128^-1302区域是影响转录活性的关键序列。MAPPER软件预测此区域可能与一些转录因子结合。比较这些转录因子在肥胖患者和正常人脂肪组织中的表达情况,发现其中NF-κB和FOXO1在肥胖患者中表达显著增加,进一步推测NF-κB和FOXO1可能是人Dsb A-L基因启动子上游的调控抑制因子。结论成功构建人Dsb A-L基因启动子系列缺失质粒,初步分析了其上游可能存在的关键调控元件,为进一步的转录调控研究奠定了基础。
- 陈淑芹徐宜兰白宁宁张菁方启晨贾伟平
- 关键词：转录调控启动子
- 肥胖状态下脂肪组织血管新生机制研究进展被引量：3
- 2019年
- 血管新生在维持机体正常功能和内环境稳态中发挥关键作用,且对机体生理和病理过程中血管系统的结构和功能的稳定有重要影响.近年来肥胖症的发生率日益增加,逐渐成为全球流行病,而在肥胖症的发生、发展过程中,脂肪组织的扩张、重塑与血管新生密切相关,本文拟对近年来有关肥胖状态下脂肪组织血管新生变化及相关机制做一综述.
- 高新雨白宁宁胡瑞玮严寒方启晨
- 关键词：肥胖脂肪组织血管新生
