王梦鸽
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：北京协和医学院血液病医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金协和青年科研基金全球变化研究国家重大科学研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- ERK信号通路在人胚胎干细胞造血分化中的作用研究被引量：2
- 2017年
- 细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)信号通路在斑马鱼及小鼠造血发生中发挥着重要作用,但其在人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,h ESCs)造血分化中的作用尚不清楚。该研究利用h ESCs单层造血分化模型及ERK信号通路抑制剂PD98059探索了ERK信号通路在h ESCs造血分化中的作用。采用免疫荧光技术、流式细胞术分析发现,PD98059能够显著抑制CD43^+造血干/祖细胞的产生。进一步的研究发现,PD98059的作用阶段为APLNR+侧板中胚层产生阶段,在该作用阶段添加PD98059与造血分化全程添加对CD43^+造血干/祖细胞产生的抑制效果一致。该研究结果表明,抑制ERK信号通路通过抑制侧板中胚层细胞的产生而抑制h ESCs造血分化。该研究为建立体外h ESCs高效造血分化体系及规模化产生功能性血细胞奠定了理论基础。
- 王洪涛刘鑫王梦鸽苏培张磊升刘翠翠王钰吴丹涂茜周家喜
- 关键词：人胚胎干细胞造血分化ERK信号通路
- 利用CRISPR/Cas9技术建立诱导性敲除MEIS1基因的HEK293T细胞株
- 2016年
- CRISPR/Cas9是新一代基因组编辑技术,可简便快捷地在哺乳动物细胞对基因进行敲除、敲入。但常规的CRISPR/Cas9表达系统直接转染效果差、病毒包装效率低,极大地限制了CRISPR/Cas9系统的广泛使用。该研究应用Tet-on系统,建立了Dox诱导Cas9表达的293T细胞株,命名为293T-i Cas9。MEIS1(myeloid ectropic viral integration site 1)是TALE(three amino acid loop extension)同源域家族的转录因子,其在白血病发生发展、胚胎造血系统发育及神经系统发育中有重要作用,但其作用机制仍未完全明确。将靶向MEIS1 Exon3的sg MEIS1表达载体转入293T-iCas9,SURVEYOR实验和Western blot检测结果表明,sg MEIS1有效地指导Cas9进行基因组编辑。最终经测序和Western blot结果证明,成功建立了MEIS1敲除细胞株,这为研究MEIS1的功能提供了重要的工具。
- 张明智王梦鸽王洪涛苏培刘鑫张磊升刘翠翠王钰吴丹周家喜彭莎
- 关键词：基因敲除
- DMSO促进人胚胎干细胞体外造血分化
- 2017年
- 目的:探讨DMSO在人胚胎干细胞造血分化中的作用。方法:利用已建立的人胚胎干细胞逐级诱导分化体系,通过流式细胞术分析并结合免疫荧光测定研究DMSO在造血分化中的作用,同时通过在不同时间点添加DMSO,确定其发挥作用的窗口期。结果:免疫荧光及流式细胞术分析发现,在人胚胎干细胞造血分化过程中添加DMSO显著促进CD43^+造血祖细胞的产生;流式细胞术分析发现,DMSO显著促进APLNR+侧板中胚层细胞和CD31^+CD34^+生血内皮细胞的产生;在侧板中胚层细胞产生的窗口添加DMSO显著促进CD31^+CD34^+生血内皮细胞和CD43^+造血祖细胞的产生。结论:DMSO通过促进侧板中胚层的产生促进人胚胎干细胞造血分化能力,在侧板中胚层发生窗口添加DMSO能够显著促进造血祖细胞的产生。
- 王洪涛王梦鸽刘鑫苏培张磊升刘翠翠王钰吴丹涂茜周家喜
- 关键词：人胚胎干细胞造血分化DMSO
