红景天苷抑制骨肉瘤143B细胞侵袭、迁移及其机制研究 被引量:2 2018年 目的探讨红景天苷对人骨肉瘤143B细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。
方法杜尔伯科改良伊格尔培养基(DMEM,含10%血清及1%双抗)培养骨肉瘤143B细胞,实验分组为对照组、30、60 μmol/L红景天苷处理组。噻唑蓝(MTT)实验检测各组24、36、72 h的细胞增殖活性;处理24 h后,采用Transwell法检测3组细胞的侵袭能力;处理24 h后采用划痕实验检测各组细胞迁移能力,计算细胞迁移率。3组细胞在处理24 h后,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的mRNA相对表达水平变化,Western blot实验检测各组细胞MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平。透射电镜检测处理24 h后的细胞自噬体。
结果处理24 h后,60 μmol/L组(0.038±0.002)和30 μmol/L组(0.054±0.002)143B细胞吸光度值低于对照组(0.074±0.004,t=2.659,P=0.016; t=1.993,P=0.039)。处理48、72 h后,与对照组比较,浓度为30、60 μmol/L的红景天苷组143B细胞吸光度值同样分别低于对照组,呈剂量依赖和时间依赖性。60 μmol/L[(48.7±8.2)个]和30 μmol/L[(76.8±12.8)个]红景天苷组143B细胞跨膜数目分别少于对照组[(94.5±11.9)个,t=8.056,P=0.000;t=2.472,P=0.038]。60 μmol/L[(52.9±6.8)%]和30 μmol/L[(82.6±3.7)%]红景天苷组143B细胞迁移率分别低于对照组[(98.7±0.3)%,t=12.576,P=0.000;t2=9.794,P=0.000]。60 μmol/L和30 μmol/L红景天苷处理组MMP-2、MMP-9的蛋白和mRNA相对表达量分别低于对照组。60 μmol/L红景天苷实验组自噬体形成数目[(2.6±0.5)个]多于对照组[(1.3±0.4)个,t=3.517,P=0.025]。
结论红景天苷抑制了骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与诱导自噬及抑制MMP家族蛋白表达相关。 赵迎春 陶海 郭卫春关键词:骨肉瘤 红景天苷 迁移 自噬 去分化过程对大鼠骨髓间充质干细胞腱系分化的影响 被引量:1 2019年 目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞在去分化过程中成肌腱细胞分化的潜能。方法采用全骨髓贴壁法分离、培养SD大鼠骨髓间充质干细胞。用含生长分化因子(GDF-5)的培养液诱导骨髓间充质干细胞去分化后,再用含GDF-5的培养基继续诱导其成肌腱分化。3周后,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测肌腱相关标记基因如Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)、肌腱蛋白(TNC)和碱性螺旋环-螺旋转录因子(Scx)和肌腱相关标记蛋白如ColⅠ、TNC和腱调蛋白(Tenomodulin)的表达。结果以均数±标准差表示。多组间数据的比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验。P<0.05表示差异有统计学意义。结果RT-PCR结果显示:实验组Scx、ColⅠ、ColⅢ、TNC基因表达量为0.635±0.557、0.590±0.020、0.447±0.063、0.613±0.061,显著高于诱导分化组(0.416±0.054、0.406±0.173、0.294±0.013、0.373±0.042,t=17.857,P<0.05;t=12.948,P<0.05;t=7.747,P<0.05;t=-5.212,P<0.05),对照组(0.197±0.019、0.201±0.014、0.216±0.037、0.190±0.014,t=31.077,P<0.05;t=14.419,P<0.05;t=15.054,P<0.05;t=8.013,P<0.05)。Western blot检测结果显示:实验组ColⅠ、TNC和Tenomodulin的蛋白表达分别为1.705±0.159、1.587±0.018、1.616±0.019,显著高于诱导分化组(1.160±0.018、1.164±0.016、1.092±0.022,t=4.825,P<0.05;t=17.395,P<0.05;t=3.961,P<0.05),对照组(0.643±0.047、0.441±0.02l、0.673±0.015,t=13.299,P<0.05;t=37.618,P<0.05;t=9.349,P<0.05)。结论GDF-5能诱导骨髓间充质干细胞成肌腱细胞分化,且去分化过程能提高骨髓间充质干细胞腱系分化的能力。 金林 陶凤华 陶海 郭卫春关键词:骨髓间充质干细胞 去分化 生长分化因子 分化 肌腱细胞 2-甲氧基雌二醇对神经胶质瘤荷瘤小鼠的抑瘤作用研究 2020年 目的探讨2-甲氧基雌二醇(2-ME)对神经胶质瘤U251细胞移植瘤的增殖抑制、凋亡及可能的分子机制。方法构建胶质瘤裸鼠移植瘤模型,经2-ME治疗后分别记录移植瘤的重量、体积;通过移植瘤HE、免疫组化、TUNEL染色分析2-ME对移植瘤的增殖抑制、凋亡及对Bcl-2、VEGF表达水平的影响;检测2-ME对裸鼠肝肾功能的影响。结果 2-ME对肿瘤的体积和重量均有抑制作用;HE染色显示实验组出现不同程度的肿瘤细胞密度减低;免疫组化染色显示,随着2-ME水平的升高,肿瘤组织内Bcl-2、VEGF的表达水平逐渐下降;TUNEL染色显示2-ME诱导裸鼠移植瘤组织细胞凋亡;肝肾功能检测未见损害发生。结论 2-ME在体内能有效抑制胶质瘤移植瘤的生长、诱导其凋亡,其抗肿瘤作用可能与Bcl-2、VEGF表达水平有关,且无明显毒副作用。 陶海 郭卫春关键词:胶质瘤 2-甲氧基雌二醇 细胞增殖 损伤控制理论应用于1例空中救援重症多发伤患者的治疗体会 被引量:4 2021年 重症多发伤是由外界高能量暴力造成的2个以上解剖部位的严重机体创伤,患者伤情复杂,容易导致多器官功能障碍,获得及时、有效的治疗是改善其预后的重要保证[1]。"损伤控制"是以分阶段的手术方法来管理重症多发伤患者的一种分步救治策略,其主要内容包括初期稳定生命体征的救治措施,重症监护室(intensive care unit,ICU)的复苏治疗和后期对明确伤害的修复和重建[2]。在我国,由于医疗资源分布不均匀,偏远地区的重症多发伤患者常因得不到及时、有效的治疗而延误病情。 马斯佳 陶海 郑剑 向威 吴成 陶凤华关键词:重症多发伤 多器官功能障碍 救治措施 救治策略 膝关节镜检查结合关节外微创技术对膝关节多韧带损伤的分期修复效果分析 被引量:2 2016年 目的:分析膝关节镜检查结合关节外微创技术对膝关节多韧带损伤的分期修复的临床效果。方法:收集2012年1月-2014年3月于笔者所在医院接受治疗的膝关节多韧带损伤患者42例(52膝),均给予膝关节镜检查结合关节外微创技术治疗,手术后均给予Lysholm与IKDC量表评分,评价膝关节修复效果。结果:Lysholm评分:平均分数为89.1分。IKDC评级:31个膝关节A级,17个膝关节B级,4个膝关节C级。Lachman试验:32个膝关节(-),16个膝关节(+),4个膝关节(++)。侧方应力试验:52个膝关节的活动度均得到有效恢复,其屈曲受限均<10°,伸直受限均<5°。52个膝关节内、外侧应力试验均表现(-)。结论:采用膝关节镜检查结合关节外微创技术治疗膝关节多韧带损伤,具有良好的临床疗效,值得临床推广应用。 曹辉 陶海 张向阳 叶佳 赵迎春 郑剑 陶凤华关键词:膝关节镜检查 调控骨肉瘤及干细胞的相关信号通路 被引量:5 2020年 背景:骨肉瘤是儿童和青少年中最常见的原发性骨源性恶性肿瘤,过去30年骨肉瘤患者的预后几乎没有大的进步,迫切需要开发新的策略和创新疗法,以进一步提高骨肉瘤患者的生存率。目的:阐述骨肉瘤进展和转移的分子机制和信号传导网络的最新进展,为治疗骨肉瘤提供一定的理论基础。方法:以"骨肉瘤,信号通路,预后,转移,耐药,Notch,Wnt/β-catenin,Hedgehog,PI3K/Akt/mTOR,BMPs"为中文检索词,以"osteosarcoma,signaling pathway,prognosis,metastasis,drug resistance,Notch,Wnt/β-catenin,Hedgehog,PI3K/Akt/mTOR,BMPs"为英文检索词,应用计算机在CNKI、Pub Med数据库检索1999年2月至2019年2月相关文献共586篇。通过阅读文献标题和摘要进行筛选,按排除标准剔除不相关的文献,最后共纳入40篇文献进行综述。结果与结论:信号通路在骨肉瘤的形成和增殖调控方面非常重要,研究发现Notch、Wnt/β-catenin、Hedgehog、PI3K/Akt/mTOR和BMP等信号通路在骨肉瘤及骨肉瘤干细胞中均有表达,对骨肉瘤的发生发展产生重要影响。 陶海 郭卫春关键词:骨肉瘤 信号通路 WNT/Β-CATENIN HEDGEHOG PI3K/AKT/MTOR BMPS 2-甲氧基雌二醇对骨肉瘤MG63细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究 被引量:1 2019年 目的探讨2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol,2-ME)对骨肉瘤MG63细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制。方法不同浓度(0、10、20、40μmol/L)的2-ME作用于肿瘤细胞后,通过显微镜观察细胞形态变化、MTT实验检测增殖抑制、流式细胞术检测细胞周期和凋亡、Western Blot和qRT-PCR实验检测相关分子表达情况。结果随着2-ME浓度的增加,细胞形态学观察显示肿瘤细胞数量逐渐减少、变形;MTT实验表明2-ME对肿瘤细胞增殖抑制作用逐渐增强;流式细胞术结果显示,2-ME能剂量依赖性的诱导肿瘤细胞凋亡,使肿瘤细胞周期阻滞在G0/G1期;Western Blot和qRT-PCR实验结果表明,细胞内Bcl-2、VEGF的表达逐渐下降,而Caspase-3的表达则逐渐升高。结论2-ME能抑制骨肉瘤MG63细胞增殖、诱导凋亡,其作用机制可能与Bcl-2、VEGF、Caspase-3相关。 陶海 汤小燕 陶凤华 赵迎春 金林 蔡林关键词:骨肉瘤 2-甲氧基雌二醇 凋亡 细胞增殖 全髋关节置换术后肢体不等长的影响因素研究 目的:探讨人工全髋关节置换术(THA)后引起双下肢不等长(LLD)的影响因素.方法:以2012年6月~2015年6月收治的61例单侧THA作为研究对象.男性35例,女性26例;年龄61~83岁,平均65.6岁;骨关节炎2... 陶海关键词:髋关节置换 肢体不等长 一种骨科上肢锻炼装置 本实用新型公开了一种骨科上肢锻炼装置,涉及骨科锻炼装置技术领域,具体为一种骨科上肢锻炼装置,包括底板,所述底板的上表面固定连接有侧板,所述侧板的顶部固定连接有顶板,所述顶板的中部固定连接有放置筒,所述放置筒的表面通过合页... 陶海文献传递 2-甲氧基雌二醇对骨肉瘤MG63细胞荷瘤小鼠的抑瘤作用及其机制 被引量:3 2020年 目的:探讨2-甲氧基雌二醇(2-ME)对骨肉瘤移植瘤的抑制作用、可能的分子机制及不良反应。方法:构建裸鼠皮下骨肉瘤模型,2-ME作用后,记录肿瘤的体积和质量;通过移植瘤HE、免疫组化、TUNEL染色,观察肿瘤组织的增殖抑制、诱导凋亡及Bcl-2、VEGF、Caspase-3的表达情况,检测2-ME对裸鼠肝肾功能的影响。结果:2-ME对肿瘤的体积和重量均有抑制作用,HE染色显示,实验组出现不同程度的肿瘤细胞密度减低;免疫组化结果表明,随着2-ME浓度的升高,肿瘤组织内Bcl-2、VEGF的表达逐渐下降,而Caspase-3的表达则逐渐升高;TUNEL结果表明2-ME诱导裸鼠移植瘤组织细胞凋亡;肝肾功能检测未见损害发生。结论:2-ME在体内能有效抑制骨肉瘤MG63细胞的增殖、诱导其凋亡,其抗骨肉瘤作用机制与Bcl-2、VEGF、Caspase-3相关,且未见明显毒副作用。 汤小燕 赵迎春 金林 陶海关键词:骨肉瘤 2-甲氧基雌二醇 抗肿瘤效应