杨琼
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 沉默TMEM45A基因表达可促进肾癌CAKI-1细胞的体外增殖和迁移被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨跨膜蛋白45A(transmembrane protein 45A,TMEM45A)基因表达对肾癌细胞CAKI-1体外增殖和迁移能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:构建特异性针对TMEM 45A基因的TMEM45A-shRNA慢病毒载体,并制备为慢病毒后感染CAKI-1细胞,沉默CAKI-1细胞中TMEM 45A基因的表达。分别采用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测TMEM45A mRNA及蛋白在CAKI-1细胞中表达水平的改变。通过CCK-8法和平板克隆法检测TMEM 45A基因沉默对CAKI-1细胞增殖和克隆形成能力的影响。通过Transwell小室迁移实验检测TMEM 45A基因沉默对CAKI-1细胞迁移能力的影响。采用蛋白质印迹法检测TMEM 45A基因沉默对CAKI-1细胞中蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称为Akt)及磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt)蛋白表达的影响。结果:成功构建了LV-TMEM45A-shRNA慢病毒载体,并感染CAKI-1细胞株。携带有TMEM45A-shRNA的慢病毒载体转入CAKI-1细胞后,TMEM45A mRNA及蛋白的表达水平均被明显下调(P值均<0.01);CAKI-1细胞的增殖能力明显增强(P值均<0.01);CAKI-1细胞的迁移能力明显增强(P<0.01)。沉默TMEM 45A基因表达后,CAKI-1细胞中Akt蛋白的表达水平无明显变化(P>0.05),而p-Akt蛋白的表达水平明显升高(P<0.01)。结论:沉默TMEM 45A基因的表达可增强人肾癌细胞CAKI-1的增殖和迁移能力,其机制可能与磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/Akt信号转导通路的活化有关。
- 杨琼王明磊徐辉明高维强
- 关键词：肾肿瘤慢病毒感染细胞运动
- 4种化学小分子联合诱导鼠胚胎成纤维细胞转化为施旺细胞效果观察
- 2016年
- 目的观察转化生长因子-β抑制剂SB431542、骨形态发生蛋白抑制剂Noggin、腺苷酸环化酶抑制剂FSK、组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠联合诱导鼠胚胎成纤维细胞(MEF)转化为施旺细胞的效果。方法将孕13.5 d雌鼠处死后取胎鼠分离MEF细胞,分为观察组和对照组;观察组置于含10 ng/m L碱性成纤维细胞生长因子、20 ng/m L表皮细胞生长因子、20 ng/m L胶质细胞源性神经营养因子、5μmol/L全反式维甲酸、10μmol/L SB431542、200 ng/m L Noggin、10μmol/L FSK、0.2 mmol/L丁酸钠的neurobasal培养基中诱导培养,隔天换液,共诱导3周,对照组不处理。在倒置相差显微镜下观察并记录两组转化细胞的形态,采用Q-PCR法检测两组施旺细胞标志物S100β、人蛋白脂质蛋白抗体(PLP)mRNA。结果诱导培养3周后可见部分MEF细胞变成梭形,胞体较小,两侧突起纤长,呈旋涡状排列。观察组S100β、PLP mRNA相对表达量分别为34.100±5.657、18.980±2.031,对照组分别为0.985±0.015、0.995±0.005(P均<0.05)。结论 SB431542、Noggin、Forskolin和丁酸钠联合可诱导鼠胚胎MEF转化为施旺细胞。
- 王永辉杨琼徐辉明高维强
- 关键词：胚胎成纤维细胞转化生长因子-Β骨形态发生蛋白腺苷酸环化酶组蛋白去乙酰化酶
- TMEM45A在肾透明细胞癌中生物学功能的初步研究
- 肾透明细胞癌(clear cell Renal Cell Carcinoma,cc RCC)是一种起源于肾小管上皮细胞的肾脏恶性肿瘤,是肾脏肿瘤分类中最常见的一种恶性肿瘤,其在所有肾脏恶性肿瘤中的发病率大约占到75%,并...
- 杨琼
- 关键词：肾透明细胞癌细胞增殖细胞迁移
