赖青
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：四川大学华西第二医院儿科更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 呼吸道合胞病毒感染导致大鼠肾病病理模型持续感染证据研究
- 2016年
- 目的探讨呼吸道合胞病毒（RSV）感染SD大鼠的肾病病理模型中,RSV持续感染证据。方法选取2个月龄、体重为180~200g的清洁级雄性SD大鼠62只为研究对象。采用随机数字表法将其随机分为RSV组（n=35）与对照组（n=27）。1对RSV组SD大鼠,采用毒力疱斑形成单位（PFU）为6×106 RSV液（0.4mL/d腹腔注射＋0.2mL/d鼻腔滴注）×3d处理,建立RSV感染SD大鼠肾病病理模型。对照组采用磷酸盐缓冲液（PBS）（0.4mL/d腹腔注射＋0.2mL/d鼻腔滴注）×3d处理,建立对照组PBS模型。两组均以造模前1d计算为第0天,造模结束时计算为造模成功第1天。通过电子显微镜观察RSV感染SD大鼠肾病病理模型造模结束后第7与60天的肾小球超微结构改变,判断SD大鼠肾病病理模型造模是否成功。2RSV组SD大鼠肾病病理模型造模成功后,将35只SD大鼠平均分为7个亚组（RSV 0、7、15、30、60、90及120d亚组）,每个亚组均为5只SD大鼠;将对照组27只PBS模型SD大鼠,按照上述时间点分为7个亚组（PBS 0、7、15、30、60、90及120d亚组）,每个亚组分别为5、5、5、3、3、3、3只SD大鼠。分别测定各个RSV亚组与PBS亚组SD大鼠的24h尿蛋白定量、血清白蛋白及血清肌酐水平等指标,并进行统计学分析。3于上述指标测定完毕后,分别于上述时间点处死RSV亚组与PBS亚组SD大鼠。同时,切除SD大鼠左肾下2/3、左肺下2/3和脾下2/3,以4%多聚甲醛固定24h后,石蜡包埋后切片,采用苏木精-伊红（HE）染色,光镜下观察各个亚组SD大鼠肾、肺、脾组织是否发生病理学形态结构改变。4以RSV G蛋白单克隆抗体为一抗,制作RSV组SD大鼠肾、肺、脾组织免疫组化检测标本,于光镜下寻找各个RSV亚组RSV G蛋白存在证据。5以RSV G蛋白单克隆抗体为一抗,采用与绿色荧光试剂结合,同时采用4′,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染料蓝染细胞核,制作各个RSV亚组SD大鼠肾组织荧光免疫检测标
- 赖青王峥
- 关键词：微小病变型肾病综合征呼吸道合胞病毒感染荧光免疫测定
- 寻找呼吸道合胞病毒致SD大鼠肾病模型病毒持续存在证据
- 黎书赖青王峥张辉
