王琳
- 作品数：8 被引量：20H指数：3
- 供职机构：济南市儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 弓形虫ROP19蛋白生物信息学分析及真核表达载体的构建被引量：1
- 2017年
- 目的构建刚地弓形虫PRU株ROP19蛋白的真核表达载体并检测其表达。方法利用生物信息学方法分析弓形虫ROP19蛋白的理化性质并比较弓形虫蛋白ROP19和SAG1的B细胞表位及T细胞表位,采用分子克隆技术构建重组真核表达质粒pEGFP-C1-ROP19(pROP19),经PCR扩增、酶切及测序鉴定正确后,体外转染HEK293T细胞,置于倒置荧光显微镜下观察荧光的表达情况。细胞转染质粒48 h后收集裂解细胞,提取蛋白后用Western blotting检测重组真核表达质粒pROP19在体外细胞中的表达。结果生物信息学分析显示ROP19主要位于膜上,具备比弓形虫SAG1更优异的抗原表位;RT-PCR结果表明重组真核载体pROP19成功构建,Western blotting结果显示ROP19蛋白可以被抗STAG小鼠血清识别。结论成功获得重组真核表达质粒pROP19,并能在真核细胞内表达。
- 周剑赵晗婷吕刚王琳李启航朱美艳王志林何深一
- 关键词：刚地弓形虫真核表达生物信息学
- 弓形虫ROP31基因克隆及生物信息学分析被引量：6
- 2018年
- 目的构建弓形虫ROP31基因重组真核表达载体,对其编码的蛋白进行生物信息学分析。方法提取弓形虫RH株速殖子总RNA,采用PCR扩增ROP31基因,构建其真核表达载体pET30a-ROP31。通过生物信息学软件结合在线程序分析ROP31基因编码蛋白的理化性质、抗原表位、空间结构等。结果 ROP31基因PCR扩增产物大小约1500bp,与预期一致,构建的重组质粒经双酶切鉴定表明目的基因插入正确。生物信息学分析ROP31基因编码蛋白有多个磷酸化修饰位点,具备多个跨膜区域;二级结构和空间结构分析ROP31蛋白与ROP家族优秀DNA疫苗ROP5、ROP17、ROP18在结构上相似;IEDB在线程序及DNA MAN软件分析ROP31蛋白具备比SAG1更为优秀的线性T、B细胞表位。结论成功构建重组真核表达载体pROP31,生物信息学分析其编码的ROP31蛋白具备优秀的细胞表位,这将为弓形虫ROP31DNA疫苗的研究提供理论依据。
- 周剑何深一刘晓雨王琳吕刚宋鹏霞韩雅丽郝珍郭晶晶朱曦杜辖东周琼彭倩
- 关键词：刚地弓形虫真核表达载体生物信息学
- 一种新生儿转运暖箱用的安全防护装置
- 本发明涉及一种新生儿转运暖箱用的安全防护装置，包括连接单元与防护单元，所述连接单元上端固定安装有防护单元，本发明通过连接单元与防护单元相配合，对新生儿转运暖箱的四周进行防护，可根据需要打开关闭，以防止干涉婴儿暖箱的安置，...
- 李艳芳王琳刘兴锋郎玉洁朱林敏
- HLA-G在卵巢癌细胞株SKOV-3中表达的实验性研究被引量：2
- 2008年
- 目的:检测卵巢癌细胞株SKOV-3中人白细胞抗原G(human leucocyte antigen-G,HLA-G)的表达。方法:用逆转录酶聚合酶链式反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)、免疫细胞化学法及流式细胞术检测卵巢癌细胞株SKOV-3中HLA-G的表达,以绒毛膜癌细胞株JEG-3中HLA-G的表达为阳性对照。结果:(1)免疫细胞化学显色显示SKOV-3细胞膜及细胞浆内均有HLA-G的表达;(2)RT-PCR结果表明,SKOV-3细胞中有HLA-G mRNA表达;(3)流式细胞术结果提示,SKOV-3细胞中HLA-G阳性率是33.77%。结论:卵巢癌细胞株SKOV-3中HLA-G mRNA及HLA-G蛋白表达为阳性。
- 王琳董建春汪运山栾英姿徐淑媛
- 关键词：卵巢肿瘤
- 弓形虫棒状体蛋白7真核表达载体的构建及其免疫保护作用被引量：1
- 2015年
- 目的构建弓形虫棒状体蛋白7(ROP7)基因的真核重组表达载体,观察其对小鼠的免疫保护作用。方法根据GenBank发表的弓形虫ROP7序列设计合成一对引物,通过PCR扩增ROP7基因,将其插入真核表达载体pEGFP-C1中构建重组质粒pEGFP-C1/ROP7(pROP7)。用重组质粒转染HEK293T细胞并验证其在细胞内的表达。将36只雌性BALB/c小鼠随机分为3组:磷酸缓冲盐溶液(PBS)对照组、pEGFP-C1对照组和pROP7实验组。然后用PBS、pEGFP-C1和pROP7分别免疫相应组别的小鼠。采用ELISA检测小鼠血清特异IgG水平,观察弓形虫感染小鼠后的存活时间并评价其免疫保护力。结果PCR扩增出1 728 bp的目的基因片段,真核表达载体构建成功,且能在HEK293T细胞中表达。目的基因的相应蛋白可被羊抗弓形虫多克隆抗体识别。重组质粒免疫的小鼠产生了较高水平的血清抗体。虫体攻击试验中,pROP7实验组小鼠的生存时间较对照组小鼠延长(P<0.05)。结论本研究构建的真核表达质粒在对抗弓形虫感染时具有一定的免疫保护作用,为弓形虫基因疫苗的研制提供了参考。
- 王琳吕刚韩亚莉郭晶晶赵群力何深一
- 关键词：刚地弓形虫核酸疫苗免疫保护
- 宫腔镜检查在绝经后子宫出血诊断中的应用被引量：2
- 2007年
- 对86例绝经后子宫出血的患者同时行宫腔镜检查、术中定位活检或诊断性刮宫取材做病理检查。结果本组18例宫腔镜检查正常者中17例经病理证实无异常;68例宫腔镜检查诊断为宫腔病变的患者中,63例经病理证实。宫腔镜诊断绝经后子宫出血原因的敏感性为98.44%、特异性为77.27%、阳性预测率为92.65%、阴性预测率为94.44%;宫腔镜诊断与病理诊断的符合率为83.72%。认为宫腔镜检查诊断绝经后子宫出血有重要价值,直视下活检或诊断性刮宫可提高诊断率。
- 徐永前董建春王琳
- 关键词：宫腔镜绝经子宫出血
- B超引导下宫腔镜电切术治疗子宫纵隔92例疗效观察被引量：3
- 2006年
- 对92例子宫纵隔患者于腹腔镜和（或）超声监视下行宫腔镜下子宫纵隔电切除术。结果均顺利完成手术，无子宫穿孔、肠管损伤等并发症发生，随访2～72个月，妊娠足月活产率明显增高，部分性子宫纵隔患者术后足月活产率明显高于完全性子宫纵隔患者（P均〈0．001）；78例足月产者中经阴分娩21例，剖宫产57例，发生胎盘粘连6例，胎盘植入1例，产后失血3例。提示宫腔镜电切术治疗子宫纵隔安全、有效；能显著提高足月活产率，明显降低流产以及早产率，尤适用于部分性子宫纵隔患者。
- 董建春徐永前王琳
- 关键词：子宫纵隔宫腔镜电切术
- p53突变型胃癌细胞株细胞凋亡及基因调控机制的研究被引量：5
- 2008年
- 目的研究顺铂作用于p53野生型AGS、p53突变型MGC-803、SGC-7901 3种胃癌细胞株后,引起细胞凋亡及p53下游基因表达的变化,探讨其发生机制。方法采用流式细胞技术(FCM)检测不同浓度顺铂(0、1、2μg/mL)作用24 h后AGS、MGC-803、SGC-7901 3种胃癌细胞株,细胞周期和凋亡率的变化;RT-PCR法检测上述不同浓度顺铂分别作用于3种胃癌细胞株,p53下游基因p21、bax、puma、bcl-2、bcl-xl表达的变化。结果FCM显示,顺铂可引起3种细胞细胞周期发生改变:S+G2期比例均明显升高,同时3种细胞的凋亡率均明显增多(P<0.01);RT-PCR结果显示,AGS细胞的p53、bax、p21表达均随顺铂剂量的增加而增加(P<0.05),puma变化不明显(P>0.05);bcl-2、bcl-xl的表达随顺铂剂量的增加而降低(P<0.05)。MGC-803、SGC-7901细胞的bcl-2、bcl-xl表达均随顺铂剂量的增加而降低(P<0.05),而bax、p21、puma的表达变化不明显。结论在p53突变细胞株中,DNA损伤可诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡,凋亡调控因子的表达也发生改变。其机制可能与p53突变的具体位点有关,亦可能与p53非依赖性途径的信号传递有关。
- 徐淑媛肖东杰栾英姿汪运山王琳石凯
- 关键词：胃癌细胞顺铂
