刘贝贝
- 作品数：21 被引量：30H指数：3
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- 相关领域：文化科学生物学农业科学理学更多>>
- 基于抗独特型纳米抗体的Cry1Ab毒素模拟抗原及其应用
- 本发明属于基因工程抗体和食品生物技术领域，涉及基于抗独特型纳米抗体的Cry1Ab毒素模拟抗原及其应用，该Cry1Ab毒素模拟抗原氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码该氨基酸的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所述...
- 张存政邱雨楼刘贝贝王玉龙李盼刘贤金
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- 基于量子点荧光微球的免疫层析试纸条及其应用
- 本发明公开了一种基于量子点荧光微球的免疫层析试纸条的制备方法及其应用；该试纸条包括底板，样品垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述样品垫搭接于硝酸纤维素膜的一端上表面，吸水垫接于硝酸纤维素膜的另一端上表面，样品垫端部与吸水垫端部...
- 张存政李盼王玉龙吴勤刘贝贝
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- 半定量化检测三唑磷农药的多检测线免疫层析试纸条
- 本实用新型公开了一种半定量化检测三唑磷农药的多检测线免疫层析试纸条，包括底板，样品垫、金标垫、检测垫和吸水垫，其中，检测垫位于底板的中段，金标垫覆盖在检测垫的端部及对应的底板上，样品垫由底板的一端向中段延伸，其端部覆盖在...
- 张存政龚航刘贝贝邱雨楼王玉龙李盼刘贤金
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- 胶体金免疫层析试纸法检测农产品中戊唑醇残留被引量：19
- 2019年
- 利用纳米金标记高亲和、高特异性戊唑醇单克隆抗体,建立了戊唑醇免疫层析快速检测方法,通过裸眼观察可快速定性判断是否超过最大限量值(MRL),实现了样品现场快速筛查与精准定量分析,具有快速、精准、低成本的优点。以20 nm的胶体金颗粒标记抗戊唑醇单克隆抗体作为检测探针,分别将包被原Teb-OVA(0.3 mg/mL)和羊抗小鼠IgG抗体(1 mg/mL)包被于硝酸纤维膜(NC膜),形成检测线(T线)和质控线(C线),组装成的胶体金免疫层析检测试纸条裸眼观察的检出限为6.25 ng/mL(T线完全消线),可在15 min内实现小麦、黄瓜和甘蓝中戊唑醇的定性与半定量分析,分析结果与高效液相色谱质谱联用(LC-MS/MS)方法的检测结果一致。胶体金免疫检测方法特异性和准确性好,操作方便,重复性好,可满足现场快速筛查大量样品的需求。
- 许俊丽刘贝贝王玉龙李盼杨康吴勤蒋岚张皓然杨立飞张存政
- 关键词：胶体金免疫层析
- 多氯联苯单克隆抗体及其应用
- 本发明公开一种可识别11种多氯联苯的单克隆抗体及其应用，涉及环境、食品生物技术领域；该单克隆抗体重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示，本发明通过设计PCBc半...
- 张存政韩昌刘娟娟王玉龙刘鹏琰李盼刘贝贝毛欣欣
- 量子点银沉积双信号检测试剂盒及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种量子点银沉积双信号检测试剂盒及其制备方法和应用，涉及免疫层析检测技术领域，本发明提供的量子点银沉积双信号检测试剂盒，包括免疫层析试纸条、量子点标记的探针和银沉积液，在传统荧光量子点免疫层析试纸条的基础上引...
- 王玉龙张存政刘鹏琰刘贝贝叶昱辉
- Bt Cry1类毒素共性结构域的分析、表达及鉴定被引量：1
- 2016年
- 【目的】分析定位Bt Cry1类毒素Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1B、Cry1C、Cry1F的共性结构域,克隆并表达共性结构域蛋白,为筛选Bt毒素广谱抗体及建立广谱检测方法打下基础。【方法】利用生物信息学和分子模拟技术,通过SWISS-MODEL同源建模分别对5种Cry1类毒素进行三维建模,并结合Ramachandran plot、ERRAT和Verify3D方法评价模型构象的合理性。通过分析比对5种Cry1类毒素的三维结构,确定DomainⅠ区域作为5种Cry1毒素的共性结构域。以含Cry1Ac基因的苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种为模板设计引物,PCR扩增获得共性结构域DomainⅠ基因,将其经NcoⅠ和NotⅠ双酶切连接至原核表达载体pET-26b(+),构建原核表达载体pET-26b-DomainⅠ。重组质粒经菌液PCR、双酶切以及测序鉴定验证正确后,转化至E.coli BL21(DE3),经终浓度为1 mmol·L^(-1)的IPTG在20℃下诱导表达16h后检测共性结构域蛋白的表达情况。离心收集诱导表达的大肠杆菌菌液,进行超声波破碎处理,收集上清及沉淀,采用SDS-PAGE分析融合蛋白的表达。利用His-Trap HP镍亲和柱纯化上清中的可溶性融合蛋白,经SDS-PAGE电泳、Western blot和ELISA试验验证纯化的共性结构域蛋白的生物活性。【结果】基于氨基酸序列及三维空间比对分析,发现5种Cry1类毒素的DomainⅠ的序列一致性最高,而且它们的DomainⅠ三维结构几乎完全重合,确定DomainⅠ区域作为5种Cry1毒素的共性结构域,通过PCR、双酶切及测序鉴定成功构建原核表达载体pET-26b-DomainⅠ,经IPTG诱导表达、His-Trap HP镍亲和柱纯化获得了可溶性的DomainⅠ共性结构域蛋白,SDS-PAGE和Western blot证实表达的共性结构域蛋白的分子量约为33.4 kD,且能与抗His标签鼠单克隆抗体发生特异性反应,ELISA试验证实共性结构域蛋白与5种Cry1类毒素特异性抗体均具有很强的结合能力,抗原表位分析结果显示共性结构域蛋白具有和完整的Cry蛋白存在�
- 刘贝贝张霄谢雅晶焦凌霞刘媛张存政赵岩岩武爱华刘贤金
- 关键词：BT原核表达纯化
- 基于量子点荧光微球的免疫层析试纸条
- 本实用新型公开了一种基于量子点荧光微球的免疫层析试纸条，该试纸条包括底板，样品垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述样品垫搭接于硝酸纤维素膜的一端上表面，吸水垫接于硝酸纤维素膜的另一端上表面，样品垫端部与吸水垫端部之间外露的硝酸...
- 张存政李盼王玉龙吴勤刘贝贝
- 文献传递
- 基于量子点荧光微球的戊唑醇免疫层析试纸条
- 本实用新型涉及一种基于量子点荧光微球的戊唑醇免疫层析试纸条，该试纸条包括：PVC底板、样品垫、NC膜和吸水垫；样品垫和吸水垫分别覆盖在NC膜的两端对应的底板上；所述的NC膜上由样品垫方向向吸水垫方向依次设有与底板端面平行...
- 张存政刘贝贝李盼许俊丽王玉龙张韩晓亚吴勤
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- 基于三唑磷残留限量值的多检测线免疫试纸条的制备与应用被引量：6
- 2018年
- 建立了基于三唑磷残留限量值(MRL)的免疫层析检测方法,可裸眼观察判断谷物、蔬菜和水果中的三唑磷农药残留水平。以粒径20 nm的胶体金标记三唑磷单克隆抗体于金标垫上,包被不同浓度的三唑磷包被原(检测线T1、T2、T3线)、羊抗小鼠Ig G抗体(质控线C线)于硝酸纤维素(NC膜)上,与吸水垫及PVC底板组合成层析试纸条。以大米、甘蓝和苹果为对象,优化了样品前处理方法、提取试剂等条件。结果表明,基于1/10三唑磷MRL值的试纸条(I)对三唑磷的裸眼观察检测灵敏度可达0.005、0.01和0.02μg/m L,优化调整后获得试纸条Ⅱ灵敏度设定为国标GB2763中的三唑磷MRL值依次为0.05、0.1和0.2μg/m L,并与3条检测线一一对应。结合前处理方法优化结果,样品经乙腈提取后,用PBS稀释10倍或者等体积溶剂置换后检测,此两种试纸条在8~12 min内均可准确判定农产品中三唑磷的残留是否超过MRL值,同时多区间定量范围的设定亦可较为准确地定量其残留值,结果与GC方法一致。本研究采用基于MRL值的3条检测线,对检测结果的判定更为直接、准确,无需换算,为基于MRL农产品安全性的快速判断提供了更为直观、简单、准确的方法。
- 龚航刘贝贝李盼何丹郭逸蓉王利民华修德王鸣华刘凤权徐振林张存政王丽
- 关键词：三唑磷
