以脱酚棉籽为原料,对比碱溶酸沉法和酶水解-超声波辅助碱溶酸沉法对棉籽蛋白提取率的影响发现,酶解和超声辅助可以显著增加碱溶酸沉的蛋白提取率。在酶水解-超声波辅助碱溶酸沉提取蛋白的基础上,利用糖化酶纯化所提取的蛋白粗品,并在单因素试验的基础上采用正交试验优化棉籽蛋白纯化工艺,得到高纯棉籽蛋白制备的最佳工艺条件为:酶解温度60℃,酶解pH 4.5,酶解时间120 min,糖化酶用量0.4%,液料比9︰1(mL/g)。验证试验表明,利用该工艺两次纯化棉籽蛋白所得的纯化产品蛋白质含量可达93.10%。采用SDS-PAGE对纯化后的棉籽分离蛋白亚基相对分子质量分布进行分析,结果表明,纯化产品中蛋白质亚基相对分子质量主要为55.1 k Da与47.5 k Da。该研究可为棉籽蛋白在食品工业中的应用提供理论参考。
