汤潜
- 作品数：9 被引量：7H指数：1
- 供职机构：青岛大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金青岛市医药科研指导计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 密码子优化人PD-L1基因在巴斯德毕赤酵母中的表达与鉴定
- 2022年
- 目的利用巴斯德毕赤酵母获得具有可溶性、免疫原性的重组PD-L1蛋白。方法根据巴斯德毕赤酵母表达系统的密码子使用偏好,优化人PD-L1基因序列,将优化后的序列构建至质粒pPIC9K,合成重组质粒pPIC9K-PDL1。使用SacⅠ-HF将pPIC9K-PDL1线性化,然后通过电击法将pPIC9K-PDL1上的PD-L1基因序列整合至巴斯德毕赤酵母基因组中,依次使用MD平板(无组氨酸)和遗传霉素G418从电击处理过的菌液中筛选重组巴斯德毕赤酵母菌株,然后使用PCR和测序对筛选到的菌株进行鉴定。利用甲醇体积分数为0.005的BMMY培养基诱导重组巴斯德毕赤酵母菌株表达,使用免疫印迹法检测菌株培养基上清液中的表达产物。结果筛选得到了稳定表达PD-L1蛋白的重组巴斯德毕赤酵母菌株,表达的PD-L1相对分子质量约为44700,可以与抗PD-L1抗体特异性结合。结论成功构建了稳定表达PD-L1蛋白的重组巴斯德毕赤酵母菌株,菌株表达的PD-L1蛋白可用于开发血清PD-L1检测试剂盒。
- 战映璇王环汤潜玄超于建立张霞王清
- 关键词：毕赤酵母质粒构建重组蛋白质类程序性死亡配体-1免疫印迹法
- PLCD3基因rs12946454位点多态性与山东汉族人群子痫前期遗传易感性关系
- 2021年
- 目的探讨磷脂酶Cδ3(PLCD3)基因rs12946454位点多态性与山东汉族人群子痫前期遗传易感性关系。方法用Taqman探针荧光定量PCR技术,对842例子痫前期病人以及1 013例正常妊娠妇女的PLCD3基因rs12946454位点进行基因型检测,比较两组基因型分布和等位基因频率的差异。结果子痫前期组与对照组PLCD3基因rs12946454位点基因型分布及等位基因频率差异无显著性(P>0.05)。轻度及重度子痫前期组、早发型及晚发型子痫前期组分别与对照组相比,PLCD3基因rs12946454位点基因型分布和等位基因频率差异均无统计学意义(P>0.05)。轻度子痫前期与重度子痫前期相比、早发型子痫前期与晚发型子痫前期相比,PLCD3基因rs12946454位点基因型和等位基因频率差异均无显著性(P>0.05)。结论 PLCD3基因rs12946454位点多态性可能与山东汉族人群子痫前期发病不相关。
- 王玲汤潜张璐刘世国张小筱刘雪梅
- 关键词：先兆子痫多态性单核苷酸疾病遗传易感性
- 一种治疗脑血管疾病的配方
- 本发明公开了一种治疗脑血管疾病的配方，由下述组分的原料配伍而成：玉竹5-15克、仙灵脾3-7克、白蒺藜5-9克、地骨皮4-10克、三七2-4克、熊胆1-3克、怀牛膝4-10克、决明子5-15克、金樱子3-9克、女贞子4-...
- 张海平岳麓隋爱华姚如永韩亚菲汤潜
- 文献传递
- lncRNA MIR210HG在子痫前期胎盘组织中的表达及其功能分析被引量：6
- 2021年
- 目的研究子痫前期(PE)产妇胎盘组织中长链非编码RNA(lncRNA)的差异表达及其中之一MIR210HG对绒毛膜滋养层细胞系HTR8/SVneo细胞生物学特性的影响,并对MIR210HG进行功能分析。方法选取2018年7月至2019年7月青岛大学附属医院收治的PE产妇39例(PE组)和同期正常妊娠产妇39例(对照组)。(1)采用转录组测序(RNA-seq)技术分析两组产妇胎盘组织中差异表达的lncRNA;实时荧光定量PCR技术方法检测两组产妇胎盘组织中差异表达的lncRNA之一MIR210HG的表达水平,并分析MIR210HG表达水平与收缩压、舒张压和新生儿出生体重的相关性。(2)构建小分子干扰RNA(siRNA),转染HTR8/SVneo细胞以敲低MIR210HG的表达,实验分为两组,即MIR210HG敲低(KD)组(HTR8/SVneo细胞转染siRNA敲低了MIR210HG的表达)和阴性对照(NC)组(HTR8/SVneo细胞转染NC siRNA),采用活细胞计数(CCK-8)法、穿膜小室(transwell小室)体外实验检测两组HTR8/SVneo细胞增殖和迁移能力的变化。(3)采用RNA相互作用百科全书(ENCORI)数据库预测与MIR210HG相互作用的RNA,并采用基因本体(GO)功能注释、京都基因和基因组百科全书(KEGG)和BioCarta通路富集方法对MIR210HG的功能进行分析。结果(1)RNA-seq技术共检测出显著差异表达的lncRNA 26个,其中表达上调21个、下调5个。MIR210HG在PE组产妇胎盘组织中的表达水平显著高于对照组(分别为9.30±1.90、1.10±0.20;t=4.425,P<0.01);MIR210HG的表达水平与收缩压(r2=0.234,P<0.05)和舒张压(r2=0.190,P<0.05)均呈线性正相关关系,与新生儿出生体重呈线性负相关关系(r2=0.157,P<0.05)。(2)与NC组相比,KD组HTR8/SVneo细胞的增殖和迁移能力均显著增强(P均<0.05)。(3)ENCORI数据库分析共预测出可能与MIR210HG相互作用的RNA 38个。GO功能注释分析显示,MIR210HG可能参与免疫应答分子中介物产生的调控等27条通路的功能;KEGG通路富集显示,MIR210HG可能参与同种异体移植物排斥等8条通路的功�
- 李雪丽张璐侯勃朴顺福汤潜董梅刘世国曹彩霞
- 关键词：新生儿出生体重子痫前期胎盘组织实时荧光定量PCR技术免疫应答
- 子痫前期孕妇外周血CTGF基因启动子甲基化检测
- 2018年
- 目的检测子痫前期孕妇外周血中结缔组织生长因子(CTGF)基因启动子区的甲基化水平,探讨其在子痫前期发生发展中的作用。方法收集90例子痫前期病人(子痫前期组)和94例正常妊娠孕妇(正常对照组)的外周血样本,采用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测CTGF基因启动子区的甲基化水平,对两组检测结果进行分析比较。结果子痫前期组和正常对照组CTGF基因启动子区甲基化阳性率分别为32.2%和46.8%,子痫前期组CTGF基因甲基化水平低于正常对照组,差异有统计学意义(χ~2=4.087,P<0.05)。结论子痫前期孕妇CTGF基因启动子区呈异常的低甲基化状态,推测其在子痫前期的发生发展过程中具有重要意义。
- 杨存存杨宗军张璐汤潜刘世国侯琳
- 关键词：先兆子痫结缔组织生长因子DNA甲基化
- 一种治疗系统
- 本发明涉及一种治疗系统，包括一种光动力治疗肿瘤系统，其特征在于所述一种光动力治疗肿瘤系统设置有控制主机，所述一种光动力治疗肿瘤系统设置有信号增强器，所述一种光动力治疗肿瘤系统设置有导线，所述一种光动力治疗肿瘤系统设置有电...
- 隋爱华汤潜韩亚菲李苗苗姚如永郑恒瑞
- 文献传递
- 一种与子痫前期诊断相关的SNP标志物及其应用
- 本发明提供一种与子痫前期诊断相关的SNP标志物及其应用，涉及生物医学技术领域。本发明基于全外显子测序技术，同时利用大样本验证和病例对照关联分析，成功筛选并鉴定获得PE的易感基因及与之相关的易感SNP位点即rs27044和...
- 刘世国张璐王敬丽汤潜
- 文献传递
- 高脂血清对人主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制
- 2016年
- 目的观察高脂血清对人主动脉血管平滑肌细胞(HASMC)增殖的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期HASMC细胞分为实验组和和对照组,实验组包括实验1、2、3组,另设空白对照组。对照组常规培养;实验1、2、3组分别加入10%、15%、20%浓度的高脂血清培养;空白对照组仅加培养基无细胞。继续培养6、12、24、48 h,用CCK-8法测算实验组HASMC细胞增殖率;培养24 h时采用实时荧光定量PCR法检测各组HASMC中GRIM-19和p-STAT3 mRNA,采用Western blotting法检测GRIM-19和p-STAT3蛋白。结果相同时间点细胞增殖率实验3组高于实验2组,实验2组高于实验1组,P均<0.05。随着高脂血清培养时间增加,各组HASMC细胞增殖率呈递增趋势,P均<0.05。培养24 h时HASMC中GRIM-19 mRNA和蛋白实验3组低于实验2组,实验2组低于实验1组,P均<0.05;HASMC中p-STAT3 mRNA和蛋白实验3组高于实验2组,实验2组高于实验1组,P均<0.05。结论高脂血清可以促进HASMC增殖。与10%、15%的高脂血清相比,20%高脂血清促进HASMC增殖的效果最为明显。其作用机制可能与GRIM-19下调p-STAT3表达有关。
- 刘晴汤潜王莎莎韩彦弢王春波
- 关键词：细胞增殖
- ADAMTS7基因rs3825807位点单核苷酸多态性与子痫前期遗传易感性关系被引量：1
- 2022年
- 目的探讨含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶7(ADAMTS7)基因rs3825807位点多态性与子痫前期(PE)遗传易感性的相关性。方法使用TaqMan探针实时荧光PCR技术,对山东地区706例PE病人(病例组)以及926例正常孕妇(对照组)的外周血DNA进行扩增,比较两组孕妇ADAMTS7基因rs3825807位点基因型及等位基因频率。结果病例组和对照组孕妇ADAMTS7基因rs3825807位点基因型及等位基因频率差异均无显著性(P>0.05);早发型、晚发型PE病人基因型及等位基因频率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论ADAMTS7基因rs3825807位点多态性与山东地区汉族人群PE的遗传易感性没有相关性。
- 楚静张璐汤潜刘世国詹瑛
- 关键词：先兆子痫RNA探针实时聚合酶链反应疾病遗传易感性
