薛晓娟
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学政治法律更多>>
- 表达水泡性口炎病毒双血清型G蛋白重组腺病毒的构建及对小鼠的免疫原性分析被引量：1
- 2015年
- 旨在以人5型复制缺陷型腺病毒为表达载体,构建表达水泡性口炎病毒(VSV)双血清型G蛋白的重组腺病毒。利用融合PCR技术扩增VSV-IN-G-NJ-G基因并将其克隆至腺病毒穿梭载体pacAd-CMV K-NpA中。通过PacⅠ酶线性化后,与同样经PacⅠ酶线性化的骨架载体pacAd5 9.2-100共转染AAV-293细胞,获得重组腺病毒rAd-VSV-IN-G-NJ-G。该重组腺病毒于AAV-293细胞连续传代至20代效价稳定。经间接免疫荧光和Western blot检测,G蛋白获得正确表达。将重组腺病毒接种小鼠,利用间接ELISA及病毒中和试验检测其体液免疫水平,结果显示可诱导产生VSV特异性抗体,其中和抗体水平在1∶32;利用淋巴细胞增殖试验检测细胞免疫水平,结果表明可以引起接种小鼠强烈的淋巴细胞增殖。构建的重组腺病毒免疫小鼠后可以引起一定的体液免疫和细胞免疫反应,为表达VSV糖蛋白重组腺病毒疫苗的深入研究奠定了基础。
- 薛晓娟金红岩赵玲娜隋修锟Zheney Makay李刚
- 关键词：VSVG蛋白重组腺病毒小鼠
- DNA条形码技术在鸟类物种鉴定中的应用
- 使用羽毛进行鸟类物种鉴定可以简化鸟类基因组DNA的样品处理，特别是当鸟的年龄或大小导致血液或组织样品DNA提取困难时.羽毛可以用来提取高质量的基因组DNA.首先，对羽毛羽根和近端部分进行裂解处理，再用AxyPrep体液病...
- Zheney Makay赵玲娜金红岩隋修馄梁琳薛晓娟李刚
- 关键词：禽流感羽毛DNA条形码技术野生鸟类
- 小反刍兽疫病毒H基因过表达对病毒增殖的影响被引量：3
- 2016年
- 为研究小反刍兽疫病毒H基因过表达后对病毒增殖的影响,根据G en Bank中小反刍兽疫病毒疫苗株Nigeria 75/1 H基因序列,设计1对引物扩增H基因全长编码区序列,并将其连接至真核表达载体p EGF P-C 3上,经鉴定正确后转染CHS-20细胞,并通过R T-PCR、荧光观察及W estern-blot分别在m RNA和蛋白水平检测H基因的表达。结果表明,H基因在CHS-20细胞内得到了表达。将p EGFP-C3-PPRV H重组质粒、空载体p EGFP-C3转染CHS-20细胞,待H基因表达后,接种PPRV Nigeria 75/1,病毒增殖一定时间后,以β-actin作为内参基因,采用相对荧光定量RT-PCR法研究病毒增殖量的变化。结果表明,相对于未转染及转染空载体p EGFP-C3的细胞,转染p EGFP-C3-PPRV H重组质粒的细胞PPRV增殖量得到了提高,且差异显著(P<0.05),这说明在CHS-20细胞中过表达PPRV H基因能促进PPRV增殖。
- 赵玲娜金红岩薛晓娟隋修锟ZHENEY Makay梁琳李刚
- 关键词：小反刍兽疫病毒H基因基因过表达病毒增殖
- 表达水泡性口炎病毒G蛋白的重组腺病毒的构建与鉴定被引量：1
- 2015年
- 为了以复制缺陷型人5型腺病毒为表达载体,构建表达水泡性口炎病毒印第安纳型(VSV-IN)G蛋白的重组腺病毒,利用PCR扩增编码VSV-IN G蛋白的基因,并将其克隆至腺病毒穿梭载体pacAd-CMV K-NpA中;再将含有目的基因的重组穿梭质粒与腺病毒骨架载体质粒用PacⅠ酶切线性化后共转染AAV-293细胞,获得重组腺病毒rAd-VSV-IN-G。该重组腺病毒于AAV-293细胞连续传代至第20代效价稳定。间接免疫荧光试验和Western-blot检测结果显示,G蛋白在重组腺病毒中可以被正确表达。上述研究成果为VSV重组腺病毒疫苗的研制奠定了基础。
- 薛晓娟金红岩隋修锟李文超李刚
- 关键词：水泡性口炎病毒G蛋白重组腺病毒
