宫金伶
- 作品数：15 被引量：74H指数：7
- 供职机构：青岛市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西教育厅科研项目青岛市科技局基金更多>>
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- 2020—2022年青岛地区手足口病病原谱及柯萨奇病毒A6型青岛株VP1区基因特征分析
- 2024年
- 目的了解2020—2022年青岛市手足口病病原学特征和柯萨奇病毒A6型(coxsackievirus A6,CVA6)的VP1基因进化特征,为手足口病的防控工作提供依据。方法利用荧光RT-PCR对青岛地区2020—2022年的手足口病患者咽拭子样本进行总肠道病毒(EV)、肠道病毒71型(EV71)、CVA16、CVA6和CVA10检测,并对CVA6阳性分离株进行VP1基因全长序列扩增及基因序列测定,以MEGA-X软件进行系统发育及分子特征分析。结果1645份手足口病患者样本中肠道病毒总阳性率为80.73%(1328/1645)。EV71、CVA16、CVA6、CVA10及其他肠道病毒构成比分别为0.08%(1/1328)、19.65%(261/1328)、68.15%(905/1328)、0.98%(13/1328)、11.14%(148/1328),5岁以下儿童占全部病例的75.68%(1245/1645),占重症病例的100%(2/2)。获得的45株CVA6 VP1区基因测序绘制了基因树,属于D3a亚型,基因进化分析其VP1区蛋白质发生了10处氨基酸的非同义突变。结论2020—2022年青岛地区手足口病以CVA6 D3a亚型为主要流行株,且在5岁以下高发。
- 宫金伶肖思颖梁荣香朱顺昕孙睿
- 关键词：手足口病病原谱流行病学特征系统进化分析
- 2010-2012年青岛地区手足口病病原谱及柯萨奇 A10型的分子流行病学研究被引量：13
- 2014年
- 目的：阐明2010-2012年青岛地区手足口病（ HFMD）病原谱及相关柯萨奇病毒A10（ CVA10）型基因特征。方法用荧光RT-PCR法对HFMD患者咽拭子标本进行总肠道病毒（ EV）、柯萨奇病毒A16（CVA16）型和肠道病毒71（EV71）型检测，然后用半巢式反转录PCR进行肠道病毒VP1基因部分序列扩增，再结合序列分析鉴定血清型；对CVA10阳性分离株进行VP1基因全长序列扩增及基因序列测定，用MEGA5．0软件进行系统发育分析及分子特征分析。结果2010-2012年间，共检测1919个手足口病门诊轻症病例和1336个住院重症病例；门诊轻症病例中，2010年和2012年以CVA16为主，各占轻症病例总阳性数的53％和73％，而2011年以EV71为主，占轻症病例总阳性数的78％；住院重症病例中，EV71为2010年和2011年主要病原，各占重症病例总阳性数的70％和86％；其他型别（非CVA16、非EV71）肠道病毒在2012年住院重症病例中成为主要病原，占重症病例总阳性数的44％；2010-2012年分别检出其他型别肠道病毒19株、16株和22株，其中CVA10检出率最高；23株CVA10的VP1全长基因序列进化分析表明这23株CVA10病毒全部属于C基因型，它们VP1基因氨基酸序列同源性为97．3％～100．0％，与其他地区同期参考株相比无显著差异。结论2010-2012年间，CVA16和EV71是引起青岛地区手足口病流行的主要病原，同时伴有多种其他型别肠道病毒流行，其中C基因型CVA10分离率较高，它们相互间同源性较高，与其他地区同期参考株相似。
- 柴青宫金伶赵丹史晓燕于萍汪照国
- 关键词：手足口病系统进化分析
- 新城疫病毒7793株对人结肠癌细胞的杀伤作用被引量：8
- 2011年
- 目的:研究新城疫病毒NDV7793对人结肠癌细胞的体外杀伤作用,为结肠癌的生物疗法奠定基础。方法:通过蚀斑实验纯化病毒并测定纯化的NDV7793株的感染力;用乳酸脱氢酶微量释放法测定纯化病毒对人LoVo和Ls174t结肠癌细胞株的杀伤作用并且通过血凝实验测定病毒在不同细胞中的增殖力。结果:NDV7793在感染细胞96h后出现直径约为0.5mm左右的空斑,PFU为1.25×107个/ml,为弱毒株;NDV7793对LoVo和Ls174t人结肠癌细胞株有明显的杀伤作用,而且杀伤作用的强度与病毒作用的时间和病毒的浓度呈正相关的关系;NDV7793可以在肠癌细胞中生长复制,该病毒株在人结肠癌细胞株LoVo的复制能力强于Ls174t。结论:NDV7793具有较强的选择性杀伤人结肠癌细胞的作用,且为弱毒株,这株病毒具备肿瘤生物治疗的潜能。
- 宫金伶黄川宋德志姜艳华赖振屏高灵茜王立芳刘金颖潘文宝胜樊晓晖
- 关键词：人结肠癌细胞抗肿瘤效应
- 青岛地区2012—2014年甲型H1N1流感病毒基因特征被引量：10
- 2016年
- 目的了解2012—2014年山东省青岛地区人群甲型H1N1流行性感冒(流感)病毒流行株基因特征及变异趋势。方法收集2012年4月—2014年3月青岛地区流感样病例咽试子2 100份,分离鉴定136株,随机抽取51株,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)、基质蛋白(MP)3个基因片段全长,并进行序列测定,对各基因片段进行系统发育分析及基因和氨基酸位点变异分析。结果 HA、NA进化树分析发现,2012—2014年青岛地区流行的甲型H1N1流感病毒分为3个分支;HA蛋白的氨基酸位点分析显示,部分毒株在抗原决定位点,受体结合位点以及其他位点上发生一定程度的变异,涉及15个氨基酸位点变化;NA蛋白的氨基酸位点分析显示,与疫苗株比较有10处氨基酸位点发生了明显变异;M2蛋白分析显示所有毒株均对金刚烷胺类药物耐药。结论 2012—2014年青岛地区流行的甲型H1N1流感病毒在抗原和受体结合位点均发生基因变异及抗药毒株的出现对流感防控提出更大的挑战。
- 赵丹苏志磊于萍柴青宫金伶史晓燕汪照国
- 关键词：HA基因NA基因基因特征
- 小鼠腹腔注射流感病毒后外周血IFN-γTNF-α和IL-2的变化及意义
- 2010年
- 目的 观察和比较小鼠腹腔注射人流感病毒H3N2和禽流感病毒H9N2后外周血干扰素γ（interferon-γ,IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白细胞介素2（interleukin-2,IL-2）质量浓度的变化,探讨其变化规律.方法 采用腹腔注射方式给小鼠注射人流感病毒H3N2、禽流感病毒H9N2或无病毒尿囊液,分离血清,用ELISA法检测注射后第1、2、3、4和5天外周血IFN-γ、TNF-α和IL-2质量浓度.分别比较人流感病毒H3N2和禽流感病毒H9N2注射组与阴性对照组在不同时间的IFN-γ、TNF-α和IL-2质量浓度.用方差分析和LSD-t检验进行统计学分析.结果 在某些时间段,病毒注射组外周血IFN-γ和IL-2质量浓度与阴性对照组问的差别有统计学意义,而病毒注射组TNF-α质量浓度与阴性对照组间的差别则无统计学意义.结论 小鼠腹腔注射人流感病毒H3N2和禽流感病毒H9N2可促进IFN-γ和IL-2产生,而对TNF-α产生则无显著影响.
- 高灵茜樊晓晖宋德志肖庆梁莹宫金伶王立芳赖振屏
- 关键词：流感病毒A型肿瘤坏死因子Α白细胞介素2
- 2013—2014年青岛市柯萨奇病毒B5型手足口病病原学及重症病例临床特征被引量：15
- 2018年
- 目的分析青岛市感染萨奇病毒B5（CV-B5）手足口病病例的分子特征及其所致重症病例的临床特征。方法以2013--2014年青岛市妇女儿童医院常规监测的手足口病病例为研究对象，共1844例，收集其咽拭子标本和脑脊液标本；采用回顾性研究的方法，收集研究对象的临床资料。对标本进行病毒核酸提取和分型鉴定；采用RT．PCR对CV-B5病毒株进行VPI基因全长扩增，并进行序列测定。采用MEGA7．0软件进行系统进化分析及分子特征分析；并与原型株Faulkner毒株进行比较，其VPl氨基酸序列来源于GenBank数据库。结果共获得CV．B5阳性病例8例，其中男性4例，女性4例；住院重症病例6例，门诊病例2例。6例重症住院病例的年龄为3-48月龄，中位数为26月龄，临床症状以发热、抽搐、呕吐、腹泻、皮疹为主，均合并病毒性脑炎。在VPl区，8株CV-B5病毒株与原型株核苷酸同源性和氨基酸同源性分别为77-3％-78．8％和95．5％-97．0％，氨基酸有13处变异，6株分离自重症病例毒株中有5株在VPl区发生N95S变异；在VPl进化树上，8株CV-B5病毒株全部属于D基因亚型，与同期国内其他地方毒株成一簇。结论感染CV-B5所致重症手足口病可出现神经系统受累，主要的并发症为病毒性脑炎；CV．B5毒株在VPl区核苷酸和氨基酸变异较小，呈现一定的区域聚集性。
- 梁荣香史晓燕张艳辉苏志磊张凤柴青宫金伶汪照国
- 关键词：手足口病中枢神经系统
- 2009-2015年青岛市手足口病病原中柯萨奇病毒A4型VP1区基因特征分析被引量：12
- 2017年
- 目的阐明2009-2015年引起青岛市手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)的病原之一柯萨奇病毒A4型(CV-A4)VP1编码区的基因特征。方法用荧光RT-PCR法对青岛市2009-2015年HFMD患者的咽拭子标本进行总肠道病毒(EV)、柯萨奇病毒A16(CV-A16)型和肠道病毒71(EVA71)型检测,以半巢式反转录PCR扩增非EV-A71,非CV-A16型肠道病毒VP1区部分基因序列,结合序列分析鉴定CV-A4血清型。对全部CV-A4阳性分离株进行VP1基因全长序列扩增及基因序列测定。用MEGA 5.0软件进行遗传进化及分子特征分析。结果青岛市2009-2015年7 967份HFMD患者的咽拭子标本中共分离到CV-A4 39株,分别占各年度肠道病毒总构成比的0.18%(1/541)、0.21%(2/944)、0.29%(2/681)、1.37%(4/292)、2.25%(12/534)、0.75%(7/928)和1.86%(11/591)。遗传进化分析显示,94.87%(37/39)的青岛地区CV-A4分离株位于C2b亚型,5.13%(2/39)位于C1亚型;青岛C2b亚型病毒株VP1区核苷酸一致性为90.7%~100.0%,氨基酸一致性为96.9%~100.0%。结论 CVA4不是引起HFMD的优势病原,C2b亚型毒株是青岛市CV-A4的优势流行株,同时伴有C1亚型毒株的流行。
- 史晓燕汪照国宫金伶柴青赵丹苏志磊张凤高汝钦
- 关键词：手足口病遗传进化分析
- 新城疫病毒通过上调小鼠NK细胞TRAIL表达杀伤Novikoff小鼠肝癌细胞被引量：6
- 2015年
- 目的观察经腹腔注射的新城疫病毒(NDV)对小鼠脾脏NK细胞表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及杀伤Novikoff小鼠肝癌细胞的影响,并探讨其与γ干扰素(IFN-γ)的关系。方法给予BALB/c小鼠和IFN-γR-/-B6.129S7小鼠腹腔注射NDV,12 h后,用ELISA检测小鼠外周血IFN-γ浓度;分离小鼠脾脏NK细胞,用反转录PCR法检测NK细胞中TRAIL mRNA转录水平,Western blot法检测脾脏NK细胞中TRAIL蛋白水平,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞对Novikoff肝癌细胞的杀伤作用。结果腹腔注射NDV可以提高BALB/c小鼠外周血IFN-γ浓度,上调小鼠脾脏NK细胞TRAIL mRNA和蛋白表达水平,增强小鼠脾脏NK细胞体外条件下对Novikoff肝癌细胞的杀伤活性。TRAIL中和抗体能抑制NK细胞对Novikoff肝癌细胞的杀伤作用。IFN-γR-/-B6.129S7小鼠接受NDV注射后脾脏NK细胞的TRAIL表达无显著增加,NDV激活的NK细胞对Novikoff肝癌细胞的杀伤活性显著低于IFN-γ受体正常的BALB/c小鼠。结论腹腔注射NDV可增强脾脏NK细胞的体外抗肿瘤活性,其机制之一是通过IFN-γ受体途径上调NK细胞表面TRAIL蛋白表达来发挥作用。
- 宋德志梁莹樊晓晖殷君宫金伶赖振屏高灵茜
- 关键词：新城疫病毒NK细胞肝癌细胞
- 新城疫病毒7793株抑制人结肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤的生长及其机制被引量：7
- 2011年
- 目的:观察新城疫病毒7793株(Newcastle disease virus 7793 strain,NDV 7793)对人结肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤生长的作用,并探讨其可能机制。方法:建立LoVo细胞裸鼠移植瘤模型,随机分成3组,分别静脉注射PBS、5-FU以及NDV 7793,观察各组裸鼠肿瘤的生长情况,流式细胞术检测移植瘤细胞的坏死率和凋亡率,免疫组织化学法检测移植瘤组织中Bax、Bcl-2蛋白的表达,细胞色素C试剂盒检测移植瘤组织中细胞色素C的含量,ELISA法检测移植瘤组织中TNF-α含量。结果:NDV 7793较5-FU更明显抑制LoVo细胞移植瘤的生长(抑制率50.14%vs 37.14%,P<0.05)。NDV 7793组移植瘤LoVo细胞凋亡率显著高于5-FU对照组[(28.7±1.5)%vs(1.46±0.3)%,P<0.01],且NDV 7793组诱导LoVo细胞的凋亡率和坏死率[(28.7±1.5)%vs(27.80±3.32)%]相当。NDV 7793能促进移植瘤组织中Bax蛋白的表达,对Bcl-2蛋白的表达无影响。NDV 7793可提高移植瘤组织中的细胞色素C含量[(2.28±0.68)vs(0.68±0.13)μg/μl]和TNF-α的水平[(489.6±5.2)vs(167.9±3.9)pg/ml]。结论:NDV 7793可抑制人结肠癌LoVo细胞移植瘤的生长,其机制可能与其上调Bax蛋白、细胞色素C和TNF-α的表达,以及促进肿瘤细胞凋亡有关。
- 肖庆黄川樊晓晖宋德志梁莹宫金伶王立芳刘金颖赖振屏
- 关键词：新城疫病毒结肠癌移植瘤凋亡坏死
- 2011-2014年青岛地区甲型H3N2流感病毒基因进化分析被引量：3
- 2015年
- 目的 了解2011-2014年青岛地区人群甲型H3N2流感病毒流行株基因进化及抗原变异趋势.方法 选取2011-2014年间青岛地区流行的甲型H3N2流感病毒64株,提取病毒RNA,应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）扩增HA、NA、MP 3个基因片段,并进行序列测定,对各基因片段进行系统发育分析及基因和氨基酸位点变异分析.结果 HA进化树分析表明,甲型H3N2流感病毒基本上分为三大分支,并且每个分支与当年的疫苗株都不在同一分支上;HA1蛋白抗原决定簇共有8个位点发生了变化;NA蛋白酶活性中心及周围相关位点氨基酸组成保守,未检测到耐奥司他韦和扎那米韦的变异位点.M2蛋白均发生S31N突变.结论 2011-2014年青岛地区流行的H3N2流感病毒在持续不断地发生基因变异而产生抗原漂移;毒株全部为烷胺类药物耐药株,但对神经氨酸酶抑制剂敏感.
- 赵丹柴青于萍马娜宫金伶史晓燕汪照国
- 关键词：HA基因NA基因
