倪宏斌
- 作品数:5 被引量:17H指数:3
- 供职机构:石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 新疆部分地区牛副流感病毒3型的检测与基因分型被引量:5
- 2016年
- 为调查新疆部分地区牛副流感病毒3型(BPIV3)的感染情况,从新疆石河子、奎屯、库尔勒、沙湾、阿克苏地区的5个规模化奶牛场采集1月龄以内犊牛鼻液206份,其中发病犊牛180份,相同日龄健康犊牛46份,通过采用抗原双抗体夹心ELISA的方法检测牛副流感病毒3型抗原,RT-PCR方法检测牛副流感病毒3型g M基因,并挑选不同地区的8株病毒进行序列分析比较其同源性,进行基因分型。结果:ELISA方法检测的感染率仅为2.43%,PCR方法检测的感染率为35.44%;扩增的M基因序列同源性为97.90%,与参考的BPIV3a亚型毒株的同源性为96.4%~99.6%,将其划分为BPIV3a亚型。本研究结果为新疆地区牛副流感病毒3型感染的防治与疫苗研究奠定了基础。
- 倪宏斌剡根强张坤凌晨冯广余宋康
- 关键词:ELISART-PCR基因分型
- 致犊牛脑膜炎大肠杆菌新疆分离株ibeB基因的特性分析被引量:6
- 2016年
- 【目的】分析致犊牛脑膜炎大肠杆菌分离株ibeB基因的分子生物学信息。【方法】以自脑炎死亡犊牛脑组织、肝组织分离鉴定的O161-K99-STa致病性大肠杆菌牛-EN株和牛-EG分离株为材料。根据GenBank中公布的脑膜炎大肠杆菌K1株RS218 ibeB基因序列设计1对引物,采用PCR方法,从分离株中成功克隆ibe B基因,比较分离株ibeB基因与不同来源大肠杆菌ibeB基因的部分生物信息学特性。【结果】分离株ibeB基因序列全长1500 bp,包含1371 bp开放阅读框,共编码457个氨基酸;生物信息学分析显示,牛-EN株与致人脑膜炎大肠杆菌K1 RS218的核苷酸和氨基酸同源性分别为90.5%和96.9%,牛-EG株与大肠杆菌K12的核苷酸和氨基酸同源性分别为99.4%和100.0%;ibeB蛋白为亲水性蛋白,分子质量为50.26 kDa,理论等电点为6.05;该蛋白无跨膜区,但具有信号肽序列;亚细胞定位显示,分泌信号通路位点(SP)占比例为0.939,说明该蛋白属于分泌型蛋白。【结论】从致脑膜炎大肠杆菌分离株中成功克隆ibeB基因,该基因与致人脑膜炎大肠杆菌K1 RS218 ibeB基因有较高的同源性,均有相似的生物学特性,属肠外致病性大肠杆菌。
- 凌晨蒋建军宋康张坤师燕霞冯广余倪宏斌朱玲王鹏雁剡根强
- 关键词:脑膜炎大肠杆菌克隆生物信息学分析
- 新疆阿克苏地区牛传染性鼻气管炎病毒与牛副流感病毒3型感染的检测被引量:3
- 2018年
- 为调查阿克苏地区是否存在牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)与牛副流感病毒3型(BPIV-3)的感染,从阿克苏两个规模化奶牛场采集1月龄以内可疑发病犊牛鼻液样品18份,采用双抗体夹心ELISA方法检测两种病毒的抗原,PCR方法检测牛传染性鼻气管炎病毒gD基因,RT-PCR方法检测牛副流感病毒3型的gM基因。结果表明,ELISA方法检测IBRV和BPIV-3的感染率分别为22.22%和0%;PCR方法检测IBRV的感染率为72.22%;RT-PCR检测BPIV-3的感染率为44.44%;同时患有两种病毒的检出率为22.22%。说明在阿克苏地区存在IBRV与BPIV-3的感染,且存在两种病毒的双重感染。
- 廉德平倪宏斌凌晨张坤剡根强
- 关键词:牛传染性鼻气管炎病毒ELISAPCRRT-PCR
- 犊牛脑炎大肠杆菌的分离鉴定及病理组织学观察被引量:4
- 2016年
- 为确定某规模化牛场犊牛脑炎的病原,从2头病死犊牛的大脑、肝脏中分离到6株革兰阴性杆菌,对分离菌进行生化鉴定、O血清学测定、粘附素及肠毒素的测定、实验动物人工感染、药敏试验、病理组织学观察。结果分离菌符合大肠杆菌的生物学特性,对小白鼠有致病性;O血清型为161,PCR检测分离株均携带STa基因,其中4株携带K99菌毛基因,分离株不携带F41菌毛基因;分离株对氨苄西林、庆大霉素、阿莫西林、环丙沙星、诺氟沙星、恩诺沙星、卡那霉素、氯霉素、四环素、链霉素、复方新诺明、头孢噻吩耐药,对阿米卡星、头孢唑林及新霉素敏感;解剖病死犊牛及人工感染死亡小鼠,大脑及脑干严重出血,脑脊液增多,组织学变化呈现脑组织血管扩张、充血、神经元细胞空泡变性坏死。结果表明,致该奶牛场犊牛脑炎死亡系由产毒性大肠杆菌引起。
- 许丹丹杨铭伟古丽孜帕邝佳丽倪宏斌张坤王静梅剡根强
- 关键词:大肠杆菌PCR病理组织学
- 新疆部分地区牛传染性鼻气管炎病毒感染的检测与gD基因序列分析
- 2017年
- 为了调查新疆部分地区牛传染性鼻气管炎病毒的感染情况,试验从新疆石河子、奎屯、库尔勒、沙湾、阿克苏地区的五个规模化奶牛场采集1月龄以内犊牛鼻液126份,其中发病犊牛86份,相同日龄健康犊牛40份,采用双抗体夹心ELISA方法检测牛传染性鼻气管炎病毒抗原,PCR方法检测牛传染性鼻气管炎病毒g D基因,并挑选不同地区的9株病毒进行序列分析比较其同源性。结果表明:ELISA方法检测的感染率为19.84%,PCR方法检测的感染率为47.62%,g D基因序列同源性为77.80%~99.80%。说明新疆部分地区牛传染性鼻气管炎病毒感染较为普遍,且多数毒株之间基因变异较大。
- 倪宏斌剡根强张坤凌晨冯广余师艳霞
- 关键词:ELISA