张琨
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 供职机构：郑州大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：河南省高校科技创新团队支持计划河南省高等学校创新人才培养工程国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 海藻酸钠浓度对新型神经组织工程支架结构与性能的影响被引量：4
- 2015年
- 探讨海藻酸钠溶液的浓度变化对藻酸盐水凝胶新型组织工程支架结构与性能的影响.在氯化钙溶液浓度相同的条件下,改变海藻酸钠溶液的浓度,制备出不同原料配比的藻酸盐水凝胶,冷冻干燥后于光学显微镜下观察其微观结构变化,测定水凝胶的含水率与凝胶质量分数;将无菌的海藻酸钠溶液及间充质干细胞混合后,与氯化钙溶液反应得到包载干细胞的藻酸盐水凝胶,倒置荧光显微镜下观察水凝胶所释放出细胞的存活情况.在氯化钙浓度一定的条件下,随着海藻酸钠浓度的减小,水凝胶的空间网络结构由致密变得疏松,更易于细胞的生存与释放.实验表明,海藻酸钠水凝胶作为组织工程支架,用于神经损伤后修复具有较好的应用前景.
- 张琨马珊珊孟楠邢衢石振庆关方霞
- 关键词：氯化钙脐带间充质干细胞
- 光照强度及盐浓度对杜氏盐藻生长及β-胡萝卜素积累的影响被引量：5
- 2016年
- 目的：探讨光照强度和盐浓度对杜氏盐藻生长和细胞内β-胡萝卜素积累的影响。方法：检测正常培养条件下杜氏盐藻生长情况和β-胡萝卜素变化,不同浓度（0.5、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mol/L）Na Cl培养后细胞内β-胡萝卜素的积累情况。采用高光（5 000~6 000 Lux）、高盐（3.5 mol/L Na Cl）及高光高盐条件对培养至对数生长末期的杜氏盐藻进行β-胡萝卜素积累的诱导。结果：正常条件下杜氏盐藻培养2周后进入稳定期,细胞内β-胡萝卜素含量呈先下降后上升趋势,第9天达到最大值,随后出现小幅度波动;杜氏盐藻细胞内β-胡萝卜素含量随Na Cl浓度升高而升高,二者呈正相关（r=0.969,P〈0.001）。与正常条件相比,高光、高盐单独作用均能够提高细胞内β-胡萝卜素含量,而高光高盐联合作用最有利于杜氏盐藻细胞β-胡萝卜素的积累。结论：高光高盐联合作用可作为杜氏盐藻细胞内β-胡萝卜素的最佳诱导条件。
- 刘真刘姗姗张玉洁朱相展张彦婷李庆华马珊珊张琨关方霞
- 关键词：杜氏盐藻Β-胡萝卜素
- HDAC1重组腺病毒载体的构建及鉴定
- 2016年
- 利用Ad-Easy腺病毒表达系统构建含有人源性组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因的重组腺病毒,并检测其在脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)中的表达及对h UC-MSCs增殖的影响.RT-PCR扩增人HDAC1 ORF序列,构建p Ad Track-CMV-HDAC1重组腺病毒穿梭质粒,Pme I单切后将其转化进入E.coli BJ5183与腺病毒骨架质粒同源重组,Pac I单切线性化后转染至HEK293细胞中扩增和包装p Ad-HDAC1,采用空斑法鉴定病毒滴度;p Ad-HDAC1感染h UC-MSCs,倒置荧光显微镜下观察荧光表达,qRT-PCR和Western Blot分别检测细胞中HDAC1在mRNA水平和蛋白水平的表达,CCK-8实验检测HDAC1高表达对h UC-MSCs增殖的影响.结果显示成功扩增人HDAC1 ORF序列并构建p Ad-HDAC1重组腺病毒;病毒感染后h UC-MSCs中HDAC1 mRNA和蛋白表达水平明显增高,并且促进h UC-MSCs的增殖.成功构建HDAC1高表达的腺病毒,可有效提高h UC-MSCs中HDAC1的表达并促进细胞增殖.
- 马珊珊张琨邢衢黄团结程康关方霞
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶1腺病毒载体脐带间充质干细胞增殖
- β-胡萝卜素对食管癌细胞凋亡与Cav-1表达的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:观察β-胡萝卜素对食管癌细胞凋亡的影响,并分析食管癌细胞对β-胡萝卜素的敏感性与小窝蛋白-1(Cav-1)表达的关系。方法:采用Western blot法检测正常食管上皮细胞株Het-1A及食管癌细胞(TE1、EC1和Eca109)中Cav-1蛋白的表达;CCK-8法检测不同浓度(0、1、5、10、20、30、50μmol/L)β-胡萝卜素处理食管癌细胞12、24、36、48、60、72 h后,对食管癌细胞增殖抑制的影响,筛选出β-胡萝卜素的最佳处理时间及浓度;在筛选条件下处理食管癌细胞,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;qRT-PCR检测Cav-1 mRNA表达水平的变化;Western blot检测Cav-1蛋白表达水平的变化。结果:Cav-1蛋白在食管癌细胞中呈过表达(TE1>Eca109>EC1),而Het-1A细胞中无Cav-1表达。β-胡萝卜素对正常食管上皮细胞的增殖无抑制作用,而对食管癌细胞(TE1、EC1和Eca109)的增殖抑制作用具有时间和剂量依赖性,且食管癌细胞对β-胡萝卜素的敏感性与Cav-1的表达有关。分别采用30、50、50μmol/Lβ-胡萝卜素处理48 h后,TE1、Eca109和EC1细胞凋亡率显著提高(P<0.05),Cav-1mRNA和蛋白质表达水平均明显下降。结论:β-胡萝卜素能够有效促进食管癌细胞凋亡,而对正常食管上皮细胞无毒性作用,且食管癌细胞对β-胡萝卜素的敏感性可能受到Cav-1的调节。
- 朱相展张彦婷韩康李庆华张楠楠马珊珊张琨关方霞
- 关键词：Β-胡萝卜素食管癌小窝蛋白-1细胞凋亡ECA109
- β-胡萝卜素对食管鳞癌EC1细胞增殖、凋亡、迁移及细胞周期的影响被引量：4
- 2016年
- 目的:观察β-胡萝卜素对食管鳞癌EC1细胞增殖、凋亡、迁移及细胞周期的影响。方法:用不同浓度(1、5、10、20、30、50μmol/L)β-胡萝卜素分别处理EC1细胞12、24、36、48、60、72 h后,CCK-8法检测β-胡萝卜素对EC1细胞增殖率的影响,筛选β-胡萝卜素的最佳处理时间及浓度;随后,在此条件下将EC1细胞分为3组(阴性对照组、空白对照组和实验组),采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期的变化,Transwell迁移实验检测细胞迁移能力的变化,Western blot检测小窝蛋白1(Cav-1)、p-Akt、p-NF-κB、Bcl-2、Caspase-3、E-cadherin蛋白表达水平的变化。结果:经筛选,选用50μmol/Lβ-胡萝卜素作用EC1细胞48 h进行后续实验。与阴性对照组和空白对照组相比,实验组EC1细胞凋亡率显著提高(P<0.001),G0/G1期细胞比例增加(P<0.001),而S期细胞比例降低(P<0.001),发生迁移的细胞数量减少(P<0.001),且细胞黏附因子E-cadherin的表达显著增加(P<0.001),Cav-1及AKT信号通路关键蛋白p-Akt、p-NF-κB、Bcl-2表达量明显下调,而Caspase-3的表达被激活(P<0.001)。结论:β-胡萝卜素能够有效促进EC1细胞的凋亡,推测可能是通过抑制Cav-1介导的AKT/NF-κB信号通路发挥作用。
- 朱相展张彦婷杨露张楠楠李庆华马珊珊张琨薛乐勋关方霞
- 关键词：Β-胡萝卜素食管鳞癌凋亡
