- β-淀粉样蛋白(1-42)寡聚体制备、鉴定及神经毒性研究
- 目的:1.探讨不同制备条件对 Aβ寡聚体合成的影响,以及利用原子力显微镜(AFM)观察β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)的不同聚集形态结构;2. Aβ寡聚体对大鼠记忆学习能力损害及神经毒性研究。 方法:1.寡聚体合成、形态...
- 樊里根
- 关键词:AΒ寡聚体Β-淀粉样蛋白原子力显微镜神经毒性
- 原子力显微镜对不同聚集状态的β-淀粉样蛋白(1-42)的形态结构研究被引量:1
- 2016年
- 目的:利用原子力显微镜(AFM)观察β-淀粉样蛋白(Aβ_(1-42))在不同聚集状态下的形态结构。方法:制备寡聚体:用六氟异丙醇溶解Aβ_(1-42)单体,通风干燥后重悬于二甲基亚砜,以PBS稀释后4℃孵育24 h;按常规方法制备Aβ单体和纤维体;用AFM的轻敲模式及相位成像技术观察不同聚集状态Aβ的形态结构,并与单体和纤维体进行比较。结果:在制备寡聚体样本中,可观察到不同形状的Aβ_(1-42)聚集体,包括球状寡聚体、环状结构、初级原纤维、成熟原纤维体等。初级原纤维呈串珠样链状结构,成熟原纤维呈致密的绳状结构。寡聚体高度为2~6nm,均值为4.39 nm;原纤维的长度约1μm,高度为1.5 nm^4 nm。单体分布均匀,呈颗粒状,平均高度为0.65±0.16 nm。纤维长度为2μm以上,高度为2~4 nm。结论:1用AFM可观察到Aβ单体、纤维和不同聚集状态的中间体,AFM技术是研究蛋白质聚集过程中动态变化的较好工具;2Aβ经PBS处理,可孵育出多种Aβ_(1-42)中间体:球状体、环状结构和原纤维;3本实验将为研究阿尔茨海默病(AD)的发病机制和开发治疗AD新疗法提供实验依据。
- 樊里根俸军林陈雪杨丽娟吕高萍蒋常文