- 用重组酶介导等温核酸扩增技术检测烟曲霉被引量：5
- 2015年
- 目的建立检测烟曲霉的重组酶介导等温核酸扩增技术（RPA）方法。方法筛选针对烟曲霉ITS1-2靶DNA序列的特异性引物。建立RPA快速检测烟曲霉方法并进行条件优化。分析RPA特异性和敏感性并与Taq PCR结果进行比较。结果RPA检测烟曲霉的优化条件为：引物长度：18-30 bp;产物长度：200-700 bp;扩增温度：37-42℃,最低在27℃也可实现扩增;扩增时间：15-40 min,15 min即可达到凝胶电泳可检测的产物量;只需简单的恒温加热设备。RPA和Taq PCR可检测到的最低DNA浓度均为100 ng/m L。RPA仅对烟曲霉有特异性扩增,对黄曲霉、土曲霉、黑曲霉、构巢曲霉、中国红酵母均无交叉扩增反应。结论建立的针对烟曲霉ITS1-ITS2靶DNA序列的RPA检测方法,可以快速、特异、灵敏地鉴定和检测烟曲霉。
- 廖新辉易浔飞崔智慧兰小鹏
- 关键词：烟曲霉
- 曲霉菌PCR检测方法标准化的探讨被引量：1
- 2014年
- 近年来,随着器官移植、艾滋病、恶性肿瘤放化疗等引起的免疫低下患者的增多,侵袭性曲霉菌病（IAD）的发病率也大幅度增加.尽管目前检测曲霉菌的方法很多,但尚未有一种能满足临床对曲霉菌病早期、快速、准确诊断的要求,致使曲霉菌病的病死率仍居高不下.PCR检测技术在生物基因相关方面的研究有很多突出优点,已有多种类型的PCR技术被广泛应用于临床诊断曲霉菌病,但一些方法的检测环节及检测性能仍存争议,以致尚未有被公认作为临床曲霉菌检测的标准化参考方法.该综述主要对曲霉菌PCR检测方法标准化的相关要素进行探讨,为今后曲霉菌PCR检测方法的研究及其标准化提供参考.
- 廖新辉易浔飞兰小鹏
- 关键词：曲霉菌
- 重组酶介导等温核酸扩增技术快速检测烟曲霉菌
- 目的：以烟曲霉内转录间隔区(ITSD)为靶序列，筛选烟曲霉菌特异性的引物对，应用重组酶介导的等温核酸扩增(RPA)技术建立快速检测烟曲霉的新方法并对该检测方法进行方法学优化。 方法： (1)以烟曲霉菌的易变区内转录间...
- 廖新辉
- 关键词：烟曲霉菌内转录间隔区
- 文献传递
