潘宏
- 作品数：13 被引量：10H指数：2
- 供职机构：广西大学更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生金属学及工艺更多>>
- 利用TMT标记结合2D LC-MS/MS技术分析不同时期水牛睾丸曲精细管差异蛋白质组被引量：3
- 2014年
- 旨在采用TMT标记结合二维高效液相色谱/串联质谱联用的技术对不同时期水牛睾丸曲精细管的差异蛋白质组进行分析。分别提取不同时期(幼年期、老年期)水牛睾丸曲精细管总蛋白,TMT试剂标记后进行强阳离子交换柱分离多肽、nano LC分离,同时在线连接电喷雾串联(rbitrap质谱进行分析,通过SEQUEST软件搜库并对鉴定的差异蛋白数据进行生物信息学分析。结果表明:共筛选出定量差异倍数≥2倍的差异蛋白89个,以幼年期水牛睾丸曲精细管作为对照,上调蛋白质51个,下调蛋白质38个。生物信息学分析表明,TMT标记技术结合二维液相色谱串联质谱可以对不同发育时期水牛睾丸曲精细管蛋白进行有效地分离和鉴定。本研究结果为探索精子发生过程中蛋白质表达的变化规律提供了试验依据,找出可能与精子发生相关的标志性蛋白:谷胱甘肽S转移酶P(GSTP1)、过氧化氢酶(CAT)、热休克蛋白(HSP90AA1和HSPA)。
- 黄愉淋付强黄德伦潘宏黄凤玲梁贤威张明
- 关键词：蛋白质组
- CRISPR基因编辑相关新技术的优化与完善研究
- CRISPR系统已经成为生物研究中不可或缺的工具之一。至今为止，CRISPR-Cas9不再仅仅是一种基因编辑工具，它的应用领域范围扩展到基因调控、表观遗传编辑、染色质工程和成像等方面，已远远超过了野生型(WT)Cas9本...
- 潘宏
- 关键词：同源重组疾病治疗
- 小鼠Iqcf5基因干扰载体的构建及筛选
- 2016年
- 本试验旨在构建4条针对Iqcf5(IQ motif containing F5)基因的sh RNA干扰载体,并进行有效干扰靶点的筛选,为以后进一步对Iqcf5基因功能的研究奠定基础。提取成年小鼠睾丸组织的RNA,进行反转录,扩增Iqcf5基因的编码区,并将其克隆到真核表达载体HP362-PBL-PBR-CAG-m Cherry-WPRE上。设计针对Iqcf5基因的sh RNA序列,应用基因重组技术插入到p GPU6/GFP/Neo载体中,将其与Iqcf5基因的真核表达载体共转染293T细胞,进行有效干扰靶点的筛选。构建了Iqcf5基因的真核表达载体和4条针对目的基因Iqcf5的sh RNA,分别是Iqcf5-107、Iqcf5-257、Iqcf5-425和Iqcf5-500和一个阴性对照质粒,经测序鉴定正确,共转染293T细胞,经过筛选Iqcf5-257和Iqcf5-500在293T细胞中对Iqcf5基因表达的干扰效果最佳。成功构建了Iqcf5基因的真核表达载体及其sh RNA干扰载体,并在工具细胞293T中进行了有效干扰靶点的筛选,这为下一步对Iqcf5基因功能的研究奠定了基础。
- 赵秀玲潘宏濮黎萍张鹏飞王焕景张明
- 关键词：SHRNA钙调蛋白RNAI
- 利用TMT标记结合2D LC-MS/MS技术分析不同时期水牛睾丸曲精细管差异蛋白质组
- 引言/目的 睾丸内曲精细管是精子发生的重要场所,曲精细管组织中支持细胞对于精母细胞最终发育成具有完整形态的精子具有至关重要的作用.曲精细管中的多种蛋白在精子生成过程中发挥了重要作用,但究竟有哪些蛋白参与以及这些蛋白之间的...
- 黄愉淋付强黄德伦潘宏黄凤玲梁贤威张明卢克焕
- 抑制小鼠Iqcf5基因表达的shRNA及其干扰重组表达载体、构建方法和应用
- 张明赵秀玲潘宏王焕景濮黎萍张鹏飞陈富
- 精子发生是一个复杂精细的过程，在此过程中存在着严格的同源群现象和周期变化规律，受众多因素的协同调控。然而，对于哺乳动物精子发生的分子事件人们依然知之甚少。近年来，受各种因素影响，越来越多的人受到不育症的困扰，其中一半左右...
- 关键词：
- 关键词：精子发生基因表达男性不育症
- 抑制小鼠Iqcf5基因表达的shRNA及其干扰重组表达载体、构建方法和应用
- 本发明公开了抑制小鼠Iqcf5基因表达的shRNA，该shRNA为shRNA‑Iqcf5‑107、shRNA‑Iqcf5‑257、shRNA‑Iqcf5‑425或shRNA‑Iqcf5‑500，它们分别具有序列表ＳEQ....
- 张明赵秀玲潘宏王焕景濮黎萍张鹏飞陈富美
- 文献传递
- CRISPR/Cas系统的概述及其在干扰基因表达研究中的应用及存在的问题被引量：5
- 2016年
- CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)/Cas系统是源于原核生物的一种获得性免疫防御系统,与Cas蛋白协同作用保护细菌等免受病毒或者质粒的二次感染,广泛存在于细菌和古细菌中。科学家们通过改造CRISPR/Cas系统,使其成为一种新型的基因编辑工具。最近,科学家们又通过突变Cas9这个核酸酶的切割活性区域,使其成仍可结合到特定的核酸序列上,但却失去核酸切割活性的d Cas9(dead Cas9)蛋白,利用这个空间位阻效应达到抑制基因表达的效果,实现基因的沉默。这就是利用CRISPR系统干扰基因表达基本原理。本文主要综述CRISPR/Cas系统的结构、种类、作用机制及其在干扰基因表达中的应用和存在的问题。
- 赵秀玲黄愉淋潘宏张明
- 关键词：基因表达
- 水牛精液蛋白质组表达谱构建和高低活率精子的差异蛋白质组分析
- 付强官俊良潘宏王志强黄愉淋张明
- EGCG对水牛卵母细胞体外成熟的影响被引量：2
- 2016年
- 【目的】探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对水牛卵母细胞体外成熟质量与早期胚胎发育能力的影响,为优化水牛体外胚胎生产体系及提高其体外胚胎生产效率提供参考。【方法】在水牛卵母细胞体外成熟液中添加不同浓度的EGCG,以排出第一极体为细胞核成熟标志,观察卵母细胞核成熟情况,检测MII期卵母细胞内活性氧（ROS）和谷胱甘肽（GSH）含量,并统计经孤雌激活及体外受精后早期胚胎的发育情况。【结果】在体外成熟液中添加10~20μmol/L EGCG有利于水牛卵母细胞体外成熟过程中卵丘扩展,卵丘扩展指数（CEI）分别为2.49%和2.42%,卵母细胞成熟率（59.31%和50.98%）显著高于未添加EGCG的CK组（P〈0.05,下同）,MII期卵母细胞的GSH含量（3.21和3.25 pmol/枚）也显著高于CK组;添加20~30μmol/L EGCG可显著降低水牛MII期卵母细胞的ROS水平。以体外成熟培养获得的水牛MII期卵母细胞分别进行孤雌激活及体外受精,结果发现以在体外成熟液中添加10μmol/L EGCG的效果最佳,其对应的卵裂率和囊胚发育率均显著高于CK组。【结论】EGCG可用于优化水牛卵母细胞体外成熟体系,能有效提高卵母细胞的成熟率和体外发育潜力,且以水牛体外成熟液中添加10μmol/L EGCG的效果最佳。
- 李敏玲陈富美廖碧云潘宏黄德伦黄凤玲陆阳清张明
- 关键词：水牛卵母细胞体外成熟
- 抑制小鼠Iqcf5基因表达的shRNA及其干扰重组表达载体、构建方法和应用
- 本发明公开了抑制小鼠Iqcf5基因表达的shRNA，该shRNA为shRNA‑Iqcf5‑107、shRNA‑Iqcf5‑257、shRNA‑Iqcf5‑425或shRNA‑Iqcf5‑500，它们分别具有序列表ＳEQ....
- 张明赵秀玲潘宏王焕景濮黎萍张鹏飞陈富美
