杨虹
- 作品数：6 被引量：16H指数：2
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- 北桑寄生内生真菌Penicillium sp. ZS108原生质体的制备与紫外诱变被引量：1
- 2024年
- 鼠李素-3-O-鼠李糖苷(alpha-rhamnetin-3-O-rhamnoside, ARR)是从北桑寄生Loranthus tanakae中分离得到的黄酮类化合物,有良好的抗炎药理活性,具有较大的研究价值。从北桑寄生中分离出的内生菌能够产生与北桑寄生相同或相似的化学成分,其中有6种内生菌具备产鼠李素-3-O-鼠李糖苷的能力。由于微生物发酵具有高效、绿色可持续的优点,北桑寄生内生菌可以作为北桑寄生植物的替代资源。本研究以一株北桑寄生青霉属内生真菌ZS108为研究对象,利用酶解法制备其原生质体,探究了原生质体制备的适宜条件,采用聚乙二醇(PEG)转化法对不同酶解时间的原生质体进行初步转化,经DNA提取及PCR验证表明质粒成功整合到内生真菌ZS108基因组中。然后对原生质体进行紫外诱变,经过筛选最终得到14株鼠李素-3-O-鼠李糖苷产量比出发菌株高的突变菌株,正突变率为16.47%。其中突变菌株UV39产量最高,达到3.93 mg/L,比出发菌株高6.02倍。最后采用薄层色谱法和LC-MC法对突变菌株产鼠李素-3-O-鼠李糖苷的能力进行了验证。通过原生质体紫外诱变的方法选育高产鼠李素-3-O-鼠李糖苷菌株,为微生物发酵法生产鼠李素-3-O-鼠李糖苷早日实现工业化生产打下了坚实的基础。
- 颜丽涵赵博荣杨虹邓丹丹杨飞杨官娥
- 关键词：内生真菌原生质体转化
- 北桑寄生总黄酮对硫代乙酰胺诱导斑马鱼急性肝损伤的保护作用
- 2024年
- 目的探讨北桑寄生总黄酮(total flavonoids of Loranthus tanakae,LTF)对硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)诱导的斑马鱼急性肝损伤(acute liver injury,ALI)的保护作用。方法采用TAA诱导AB品系与转基因品系斑马鱼建立ALI模型,通过对斑马鱼的生长发育、肝脏形态、肝功能酶活性、脂质积累情况及氧化应激指标进行检测,考察LTF是否具有保肝活性。结果25、50μg/mL LTF可以明显抑制TAA引起的斑马鱼发育毒性,促进幼鱼生长及减缓卵黄囊的吸收滞后现象(P<0.05、0.01)。与模型组比较,LTF可以明显增加斑马鱼幼鱼肝脏面积,提高肝脏的荧光强度(P<0.05、0.01)。苏木素-伊红染色结果显示,LTF处理后斑马鱼肝脏病理状态得到缓解,空泡化现象明显减少。LTF显著降低TAA诱导的斑马鱼丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活性(P<0.05、0.01)。油红O染色结果显示,LTF显著降低幼鱼肝脏区域脂质积累程度(P<0.05、0.01)。氧化应激指标测定结果显示,LTF处理后幼鱼体内的活性氧(reactive oxygen species,ROS)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平明显降低(P<0.05、0.01),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(catalase,CAT)和还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)含量显著升高(P<0.05、0.01)。结论LTF在防治ALI方面具有较大的潜力,其肝脏保护活性可能与抗氧化作用有关。
- 邓丹丹赵博荣颜丽涵周江韬王松松杨虹杨飞杨官娥韩利文
- 关键词：急性肝损伤氧化应激黄酮类化合物斑马鱼
- 北桑寄生产黄酮内生菌的分离鉴定及其抗氧化和抑菌活性评价被引量：11
- 2022年
- 【背景】北桑寄生(Loranthus tanakae)植物中黄酮类化合物成分含量较高,生物活性较好。由于植物资源短缺,导致其生物活性成分的研究受限。【目的】从北桑寄生中分离、筛选和鉴定产黄酮类化合物的内生菌,并评估其体外抗氧化和抑菌活性。【方法】以北桑寄生枝条为研究对象分离内生菌,通过显色反应和薄层色谱法(thin-layer chromatography,TLC)筛选产黄酮类化合物的内生菌,并采用NaNO2-Al(NO3)3比色法测定其总黄酮含量。利用清除自由基和抑菌的体外实验来初步评估产黄酮内生菌的生物活性。【结果】共筛选出4株产黄酮内生菌,其中3株为内生真菌,1株为内生细菌,通过形态学和分子生物学方法将其分别鉴定为Botryosphaeria sp.(ZC020)、Phoma sp.(ZZ105)、Nemania sp.(ZS042)和Pseudomonas sp.(ZC026)。4株菌中ZC020和ZS042的总黄酮含量较高,分别为(44.58±0.72)mg/L和(31.98±0.18)mg/L(P<0.05,n=3),并且ZS042可产生与北桑寄生植物相同类型的黄酮类化合物。ZC026和ZS042表现出优异的抗氧化活性,其1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和2,2′-联氮-二(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2′-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)diammonium salt,ABTS]自由基清除率分别为72.85%±0.66%(ZC026)、57.01%±0.89%(ZS042)和85.36%±0.75%(ZC026)、88.17%±0.15%(ZS042)(P<0.05,n=3)。ZZ105对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抑制作用。【结论】从北桑寄生枝条中分离出4株产黄酮类化合物的内生菌,其中有一株为内生细菌。这项工作为北桑寄生黄酮类化合物的生产提供了新的资源,也为其他珍稀药用植物和材料的开发和保护提供了参考。
- 郑紫云柴书彤陈婕杨虹白红娟杨官娥
- 关键词：内生菌黄酮类化合物抗氧化活性抑菌活性
- 光合细菌菌剂对栽培党参质量的影响
- 2022年
- 目的:探究两种光合细菌菌剂(沼泽红假单胞菌菌剂及混合光合细菌菌剂)对栽培党参质量的影响。方法:喷施不同浓度沼泽红假单胞菌菌剂及混合光合细菌菌剂,对栽培党参的生长特性(单根干重、单根鲜重、根长、根直径)、有效成分(党参炔苷、党参多糖)、常量元素(氮、磷、钾)及重金属(铅、镉、汞、砷、铜)含量进行测定,并进行两两相关性分析,筛选合适的菌剂使用浓度。结果:经不同浓度沼泽红假单胞菌菌剂及混合光合细菌菌剂喷施后,党参根长、多糖含量及全氮、全磷含量均有所提升,全钾含量有所降低;重金属铅、汞、铜的含量显著降低,镉含量升高;所有光合细菌菌剂处理组的党参炔苷含量、砷含量与对照组之间无显著差异;所有处理组重金属含量均符合国家及行业限量标准;经多因素相关性分析发现,部分指标之间存在相关性。结论:光合细菌菌剂能够改善栽培党参的质量,也有利于药材的安全性,以沼泽红假单胞菌200倍稀释菌剂效果较好。
- 柴书彤杨虹常佳钰陈婕白红娟杨官娥
- 关键词：光合细菌沼泽红假单胞菌党参
- 不同浓度葡萄糖对多药耐药鲍氏不动杆菌生物膜形成能力的影响被引量：3
- 2016年
- 目的探索多药耐药鲍氏不动杆菌在不同浓度葡萄糖环境中其生物膜形成能力的变化,为糖尿病患者预防与治疗感染提供理论依据。方法用测定MIC方法筛选2012年4月-2013年10月临床分离的多药耐药鲍氏不动杆菌,用含有不同葡萄糖浓度的胰蛋白胨大豆肉汤培养,分别测定其570nm处吸光度值,采用激光共聚焦显微镜（CLSM）观察和测定生物膜在不同浓度、不同时间形成的形态及厚度,不同浓度下膜生成能力采用Kruskal-Wallis H检验及t检验法进行统计。结果 30株多药耐药鲍氏不动杆菌对头孢他啶、哌拉西林、阿米卡星的耐药率均为96.7%;葡萄糖浓度为11.1~30.0mmol/L时膜形成能力与无糖培养比较吸光度值差异有统计学意义（P〈0.05）,但≥11.1mmol/L的各浓度吸光度值比较差异无统计学意义;CLSM观察显示,多药耐药鲍氏不动杆菌葡萄糖浓度在11.1~30.0mmol/L时菌株荧光强度均在大约24h基本达到最强,48h有一个强度维持,比无糖环境提前24h;生物膜厚度数据统计显示,加糖培养12~36h膜厚度达到最大,加糖培养膜厚度最大值与无糖培养膜厚度最大值相比差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论多药耐药鲍氏不动杆菌在环境中葡萄糖浓度≥11.1mmol/L时,形成生物膜的能力明显增强,形成生物膜的厚度增加,形成生物膜的周期明显缩短。
- 杨虹药飞李晓霞王姝云段金菊
- 关键词：多药耐药鲍氏不动杆菌生物膜葡萄糖
- 葡萄糖对铜绿假单胞菌生物膜形成能力的影响被引量：2
- 2016年
- 目的探索不同浓度的葡萄糖对铜绿假单胞菌生物膜形成能力的影响。方法用含有不同葡萄糖浓度的胰蛋白胨大豆肉汤培养铜绿假单胞菌,测定其570 nm处光密度,通过函数Linest进行线性回归拟合,用激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察不同浓度葡萄糖培养铜绿假单胞菌生物膜的形成过程及厚度。结果 22株细菌不同浓度葡萄糖的A_(570)拟合直线的斜率均大于0,其中4株菌上升趋势明显。与无糖组及低浓度葡萄糖组相比,当葡萄糖浓度≥11.1mmol·L^(-1)时,生物膜成熟速度加快、成熟时间减少、粘附能力增强、厚度增加(P<0.05)。结论葡萄糖浓度≥11.1 mmol·L^(-1)时对铜绿假单胞菌生物膜形成有明显的诱导作用,并且随葡萄糖浓度的升高,诱导作用增强。
- 徐静静郭阳杨虹李晓霞王姝云段金菊
- 关键词：细菌铜绿假单胞菌生物膜葡萄糖
