王欢欢
- 作品数：8 被引量：6H指数：1
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：温州市科技局资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- F11基因复合杂合变异导致遗传性凝血因子Ⅺ缺陷症一个家系的分析被引量：1
- 2023年
- 目的探讨1个F11基因新变异导致复合杂合性遗传性凝血因子Ⅺ(FⅪ)缺陷症家系的分子致病机制。方法选取2020年11月30日因"尿路结石"就诊于温州医科大学附属第一医院的1例遗传性凝血因子Ⅺ缺陷症男性先证者及其家系成员(3代7人)作为研究对象,收集先证者的临床资料,检测先证者及其家系成员的相关凝血指标。提取外周血基因组DNA进行PCR扩增,用DNA直接测序法分析先证者F11基因的全部外显子、侧翼序列、5′和3′端非翻译区序列及家系成员相应的变异位点区域。用生物信息学软件分析氨基酸变异位点的保守性,分析变异对蛋白质功能的影响。根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)相关变异评级指南对变异位点进行评级。结果先证者为36岁男性,其活化部分凝血活酶时间(APTT)为89.2 s,明显延长,FⅪ活性(FⅪ:C)和FⅪ抗原(FⅪ:Ag)分别为2.0%和3.5%,均极度降低。基因测序发现先证者和其姐姐的F11基因第7外显子存在父源c.689G>T(p.Cys230Phe)杂合错义变异,第13外显子存在母源c.1556G>A(p.Trp519*)杂合无义变异。保守性分析结果表明Cys230呈高度保守。c.1556G>A(p.Trp519*)为已报道的致病性变异。依据ACMG变异评级指南,c.689G>T评级为可能致病变异(PM2_Supporting+PM5+PP1+PP3+PP4)。结论F11基因第7外显子c.689G>T杂合错义变异及第13外显子c.1556G>A杂合无义变异考虑是该FⅪ缺陷症家系的致病原因。
- 王欢欢蒋淑婷夏慧南杨丽红金艳慧王明山
- 关键词：生物信息学家系
- 一个复合杂合突变导致的遗传性凝血因子Ⅺ缺陷症家系
- 2021年
- 遗传性凝血因子Ⅺ(FⅪ)缺陷症是一种罕见的常染色体遗传病,全球年发病率约为百万分之一,在德系犹太人中高达1/450[1]。其主要临床表现为创伤或手术后出血难止,尤其是在口腔、泌尿道等高纤溶部位较为多见,自发性出血少见,无性别差异[2,3]。本文报告一个遗传性FⅪ缺陷症家系凝血表型和F11基因检测结果并初步探讨其分子致病机制。
- 郑晓勇金艳慧徐瑶瑶杨丽红朱丽青王欢欢蒋淑婷王明山
- 关键词：自发性出血手术后出血缺陷症泌尿道
- 凝血因子Ⅺ基因变异致下消化道出血病因分析被引量：3
- 2022年
- 目的:对1例遗传性凝血因子Ⅺ(FⅪ)缺陷症患者行内镜下直肠息肉摘除术后出现下消化道异常出血进行病因分析,探讨FⅪ基因变异与治疗后下消化道出血的关系。方法:家系调查(共3代5人)。检测患者及其家系成员相关凝血指标。提取外周血基因组DNA进行PCR扩增,采用DNA直接测序法分析患者FⅪ基因的全部外显子、侧翼序列、5’和3’端非翻译区序列,及家系成员相应的变异位点区域。用PyMol软件构建基因变异前后蛋白模型。结果:患者因“直肠息肉摘除术后3 d,血便2 d”入院。凝血指标检查显示患者的活化部分凝血活酶时间(APTT)、FⅪ活性(FⅪ:C)和FⅪ抗原(FⅪ:Ag)分别为50.9 s、53%和47.2%;其父亲上述3项指标分别为45.4 s、44%和43.1%。DNA测序发现患者及其父亲的FⅪ基因第8号外显子均存在c.841C>T杂合无义变异(p.Gln281*)。蛋白模型分析显示p.Gln281*变异会产生截短蛋白。结论:该家系FⅪ基因第8号外显子c.841C>T(NM_000128)杂合无义变异与其FⅪ水平减低有关,可能也是该患者行内镜下直肠息肉摘除术后出现下消化道异常出血的主要原因。
- 王欢欢刘媚娜谢海啸贾恺琦曾蔓霖王明山
- 关键词：基因变异内镜下治疗下消化道出血
- 纯合子p.Met527Ile错义突变导致遗传性FⅫ缺陷症家系分析
- 2021年
- 目的对一个近亲结婚导致的遗传性凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺陷症家系进行表型和基因突变分析,初步探讨其分子发病机制。方法检测先证者及其家系成员(共3代5人)活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)、FⅫ活性(FⅫ:C)和FⅫ抗原(FⅫ:Ag)以明确表型诊断。采用DNA直接测序分析F12基因的所有外显子、侧翼、5′和3′非翻译区及家系成员相应的突变位点区域,用反向测序进一步证实所发生的突变。通过多个生物信息学软件(clustalx-2.1-win、Mutation Taster、PolyPhen-2、PROVEAN、SIFT和Swiss-Pdb Viewer 4.1.0)分析突变氨基酸的保守性和对蛋白质可能的影响,构建突变前后的蛋白结构模型分析突变对蛋白质空间结构的改变及影响。结果先证者APTT延长,较正常对照显著延长为101.0νs 36 s,FⅫ:C和FⅫ:Ag极度降低,均为1.0%(正常范围为72%~113%)。基因分析显示,先证者第13外显子存在c.1638G>A纯合错义突变,导致527位异亮氨酸取代蛋氨酸(p.Met527Ile);其母亲、儿子和女儿均携带了p.Met527Ile杂合子。生物信息学和突变模型分析表明,Met527在人类与7种同源物种间呈高度保守,p.Met527Ile可能是有害的,并改变了蛋白质的结构和功能。结论 p.Met527Ile错义突变国内外鲜见报道,并可能与该家系FⅫ水平降低有关。
- 姜也郑晓勇谢海啸刘媚娜王欢欢王明山
- 一个Ⅱ型遗传性抗凝血酶缺陷导致深静脉血栓形成的家系分析被引量：1
- 2022年
- 目的对一个Ⅱ型遗传性抗凝血酶(AT)缺陷症家系进行表型及基因突变分析,探讨该症与深静脉血栓形成的关系。方法回顾2020年2月于温州医科大学附属第一医院神经内科确诊的1例发生深静脉血栓的患者(先证者)临床资料;同时采用随机抽样法选取本院100名健康体检者作为正常对照。检测先证者及其家系成员(共3代11人)的血浆AT活性(AT:A)、AT抗原(AT∶Ag)、蛋白C活性(PC∶A)及蛋白S活性(PS∶A)等指标并进行分析。采用Sanger测序法分析SERPINC1基因全部外显子、侧翼序列、5’和3’端非编码区,寻找基因突变位点以及通过反向测序予以证实。运用3个在线生物信息学软件(MutationTaster、PolyPhen-2、LRT)分析突变氨基酸的致病性。结果先证者及其大儿子、二女儿和外孙女的AT∶A均显著降低,分别为正常对照的32%、43%、52%和48%,先证者及其家系成员PC∶A、PS∶A及AT∶Ag指标均无明显异常,表现为Ⅱ型AT缺陷症。基因分析显示:先证者SERPINC1基因第7号外显子存在c.1346T>A杂合错义突变(p.Leu417Gln),其大儿子、二女儿和外孙女也携带该突变。同源性分析表明Leu417残基在同源物种间高度保守;MutationTaster、PolyPhen-2和LRT生物信息学软件分析均显示p.Leu417Gln突变为“致病的、有害的”;蛋白模型分析显示,p.Leu417Gln突变会引起AT蛋白内部的氢键发生改变。结论该先证者及家系成员AT∶A降低与SERPINC1基因p.Leu417Gln错义突变有关;先证者出现深静脉血栓形成可能与p.Leu417Gln错义突变导致机体抗凝功能降低有关。
- 薛雁谢海啸徐琦煜谢耀盛蒋淑婷王欢欢王明山杨丽红
- 关键词：静脉血栓形成突变
- 脑源性神经营养因子与精神分裂症患者的精神症状及认知功能的相关性研究
- 王欢欢
- 文献传递
- p.Gly86Asp变异导致遗传性蛋白C缺陷症的致病机制分析被引量：1
- 2022年
- 目的通过体外表达实验分析p.Gly86Asp变异导致遗传性蛋白C(protein C,PC)缺陷症的分子致病机制。方法构建野生型和p.Gly86Asp变异型PC表达质粒,分别转染HEK 293FT细胞。提取转染细胞内的总RNA,将RNA逆转录成cDNA,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测转染细胞内PROC基因的转录水平。收集细胞培养上清液和细胞裂解液,通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测PC抗原(PC antigen,PC:Ag)含量;采用蛋白免疫印迹试验(Western blotting,WB)检测PC含量以及相对分子质量。结果qRT-PCR结果显示野生型PC和p.Gly86Asp变异型PC在转录水平没有明显差异。与野生型PC:Ag含量相比,变异型PC:Ag含量在细胞培养上清液和细胞裂解液中分别为81.3%±2.6%和110.0%±2.8%。WB结果表明,野生型PC和变异型PC的相对分子质量没有明显差异;变异型PC的含量在细胞裂解液中明显高于野生型PC,而在细胞培养上清液中明显低于野生型PC。结论PC分泌障碍可能是p.Gly86Asp变异导致遗传性PC缺陷症的分子致病机制。
- 蒋淑婷王欢欢刘媚娜杨丽红金艳慧谢海啸徐琦煜王明山
- 关键词：基因变异
