白图雅
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:深圳市第二人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 异种器官移植中猪内源性逆转录病毒的检测
- 2015年
- 猪来源的细胞、组织和器官可用于多种疾病治疗。但存在猪传染性病原体感染人体宿主的风险,包括含有3种亚型的猪内源性逆转录病毒(PERVs):PERV-A,PERV-B和PERV-C。异种器官移植的检测应包含筛选猪群的来源(PERV-A和PERV-B和PERV-C表达水平的检测)和受体的筛选(区分PERV之间的转递性和嵌合性)。这些测有助于降低PERV传播感染的可能性并对提高异种器官移植的安全性具有重大的意义。
- 牟丽莎白图雅谢崇伟蔡志明
- 关键词:异种器官移植猪内源性逆转录病毒实时RT-PCR
- 通过CRISPR-Cas9系统敲减PAEC中GGTA1和CMAH基因的效果检测被引量:1
- 2015年
- 目的:检测由短回文重复序列(CRISPR)-Cas9系统敲减猪动脉内皮细胞(PAEC)中基因α1,3半乳糖基转移酶(GGTA1)和CMP-N-乙酰神经氨酸羟化酶(CMAH)的效果。方法:通过CRISPR-Cas9系统,用已设计好的GGTA1和CMAH基因的guide RNA(g RNA)构建质粒,以慢病毒为载体包装病毒和感染PAEC,对成功感染的细胞进行单克隆培养并挑选收集单克隆细胞,提取细胞基因组,进行PCR,琼脂糖凝胶电泳,退火、酶切,测序等方法对GGTA1和CMAH基因敲减的效果进行检测。结果:对单克隆细胞进行选择性测序,选择V2-g-a1、V2-c-b1、V2-c-d4单克隆细胞测序结果分别为:V2-g-a1细胞基因组突变位点在第205位;V2-c-b1细胞基因组突变位点在第240位;V2-c-d4细胞基因组突变位点在第246位。结论:CRISPR-Cas9系统成功构建质粒,完成慢病毒包装和感染细胞,成功敲减目的基因。
- 牟丽莎白图雅谢崇伟蔡志明