余霜
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：西南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 人凝血X因子的DNA适配体筛选及抗凝作用研究
- 背景:心脑血管疾病是导致人类死亡的首要原因,血栓可诱发心脑血管疾病,心脑血管疾病患者又常常会产生血栓,从而导致残疾甚至死亡事件的发生。抗凝药物可通过直接或间接抑制凝血级联中一种或多种凝血因子来预防或治疗血栓,从而减少心脑...
- 余霜
- 关键词：适配体抗凝解毒剂
- 家蚕血细胞特异表达新基因Bm04862的鉴定及表达被引量：2
- 2016年
- 通过家蚕组织芯片数据筛选得到家蚕血细胞特异表达基因Bm04862,并首次对该基因进行了克隆与鉴定。应用RACE技术获得该基因全长,并对其进行生物信息学分析。Bm4862基因开放阅读框819 bp,共编码273个氨基酸残基,预测其为跨膜蛋白;通过q RT-PCR技术对其时空表达情况进行分析;结果显示Bm04862基因在家蚕血细胞中特异高表达,并在4龄眠期和预蛹2 d时达到表达高峰;构建Bm04862真核表达载体,转染Sf9细胞分析其蛋白的亚细胞定位情况,结果表明其定位于细胞核膜和部分细胞质中。此外,用大肠杆菌刺激蚕体24 h后,Bm04862基因表达水平显著上调,表明大肠杆菌可以诱导该基因的表达,由此推测该基因可能参与家蚕的免疫应答。这为深入研究该基因在家蚕免疫反应中的功能提供了参考。
- 余霜苏晶晶徐曼张奎崔红娟
- 关键词：家蚕亚细胞定位
- 家蚕血细胞特异启动子的筛选与鉴定
- 家蚕是一种具有重要经济价值的鳞翅目模式生物，在理论研究和生产应用方面都具有重要作用。家蚕基因组框架图、精细图和全基因组表达芯片等研究工作的完成，为家蚕基因的鉴定与功能研究提供了丰富的数据资源。家蚕血细胞在家蚕代谢、先天免...
- 余霜
- 关键词：家蚕血细胞启动子杆状病毒
- 文献传递
- 家蚕血细胞特异表达基因组织蛋白酶O调控元件的鉴定
- 本发明涉及家蚕血细胞特异性表达基因的筛选方法及由蛋白酶O基因启动子的克隆，分析发现其血细胞特异表达调控元件的方法。通过下述步骤制得：1、首先通过家蚕组织芯片表达数据、转录组数据和定量RT-PCR等方法，筛选出血细胞特异表...
- 崔红娟余霜杨丽群张奎徐曼
- 文献传递
- 家蚕组织蛋白酶O(BmCatO)基因鉴定及表达分析被引量：7
- 2015年
- 【目的】克隆家蚕(Bombyx mori)蛋白酶O基因Cathepsin O(Bm Cat O),分析其m RNA表达特征,通过原核表达、蛋白纯化和多次免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,为进一步探究组织蛋白酶O在家蚕变态发育中的功能奠定基础。【方法】利用RACE技术克隆获得家蚕组织蛋白酶O的全长c DNA序列,然后采用RT-PCR对其时空表达特征进行研究。从NCBI下载其他物种组织蛋白酶O基因序列,利用Clustalx和MEGA 6.0软件进行同源比对和进化分析。选取特异性较高的片段设计特异性引物,将PCR扩增产物连接至PET32a质粒,转化至E.coil表达菌株Rosetta(DE3),经IPTG诱导获得组织蛋白酶O重组蛋白,然后利用Ni+亲和层析方法对重组蛋白进行纯化,最后多次免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体。【结果】家蚕组织蛋白酶O基因存在于家蚕第14号染色体上,scaffold为nscaf2943,基因编号BGIBMGA009231。该基因有两种剪切形式,剪切体1开放阅读框(ORF)全长为1 071 bp,编码356个氨基酸,预测蛋白分子量36 k D,等电点8.594;剪切体2 ORF全长为942 bp,编码313个氨基酸,预测蛋白分子量40 k D,等电点7.951。两种剪切体均有6个外显子和5个内含子构成,剪切体2的第六外显子出现部分缺失。两种剪切体编码的蛋白结构相似,均含有信号肽、Inhibitor129和Pept-C1结构域。进化分析结果表明,无脊椎动物组织蛋白酶单独聚为一类,且家蚕组织蛋白酶O与同为鳞翅目成员的二化螟(Chilo suppressalis)组织蛋白酶O最为接近。RT-PCR结果显示该基因特异性持续表达于幼虫血细胞,剪切体1的表达水平明显高于剪切体2,但这两种剪切体在幼虫血细胞发育时期表达趋势一致。构建家蚕组织蛋白酶O原核表达系统,利用亲和层析纯化获得高纯度的家蚕组织蛋白酶O重组蛋白,并利用纯蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,ELISA显示其效价高达到1﹕1 280 000。Western印迹结果表明,该抗血清
- 苏晶晶陈思源张奎余霜李钰添梁航华赵羽卒晁会娟崔红娟
- 关键词：家蚕克隆抗体制备
