刁文涛
- 作品数：63 被引量：52H指数：5
- 供职机构：河南省科学院更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项河南省科技攻关计划郑州市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学农业科学化学工程更多>>
- 黑曲霉β-甘露聚糖酶ManA耐热突变体的筛选被引量：3
- 2022年
- 为了改造黑曲霉(Aspergillus niger)来源的β-甘露聚糖酶ManA,获得耐热性高的突变体。利用易错聚合酶链式反应(PCR)技术对构建的表达质粒pGAPZαA-manA进行随机突变,将突变文库转化至毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,表达筛选耐热性高的突变体,并进一步对突变位点进行定点突变,筛选其他耐热性高的突变体。结果表明,ManA的H283R与H283K突变体相对于野生型在耐热性方面有显著提升,75℃加热30 min其相对酶活由26.66%分别提升至76.95%和83.57%;在pH 3.0~9.0的条件下,50℃保存24 h,H283K突变体与野生型的相对酶活均在90%以上,H283R突变体在pH 3.0时的相对酶活下降到了84.72%,两个突变体的最适温度、pH及比酶活与野生型没有明显差异。说明β-甘露聚糖酶ManA的283位组氨酸(H283)对其耐热性较为关键,将该位点突变为精氨酸(R)和赖氨酸(K)时,ManA的耐热性得到显著提升。
- 李珊珊刘德海刁文涛陈晓飞权淑静
- 关键词：甘露聚糖酶易错PCR定点突变
- 一株产乳酸的格氏乳球菌WBT0008及其应用
- 本发明涉及产乳酸的格氏乳球菌WBT0008及其应用，可有效解决高产乳酸及制备保鲜剂，抑制有害菌的问题，一株产乳酸的格氏乳球菌WBT0008，分类命名为格式乳球菌（<I>Lactococcus </I><I>garviea...
- 王佰涛刘德海杨文玲雷高权淑静李珊珊刁文涛王继雯陈国参李寒冰
- 一株基因克隆干扰菌的鉴定及其发酵液降解DNA活性分析
- 2016年
- 旨在寻找导致基因克隆失败的原因,检测整个电泳环境中是否存在对DNA有强降解力的菌株。依据菌体形态,革兰氏反应以及16S rDNA序列对DNA降解菌株进行鉴定,琼脂糖凝胶电泳分析菌株对DNA的降解活性。结果显示,从DNA电泳槽中分离到了一株菌,革兰氏染色鉴定为阴性菌,对该菌进行液体培养,利用质粒pUC19作为底物,检测该菌发酵液对DNA的降解能力,发现该菌发酵液能够迅速并彻底地降解DNA,其最佳降解温度为45℃,将该菌命名为DD(DNA degrading)。对该菌的16S rDNA进行测序比对后,发现其与粘质沙雷氏菌(Serrtia marcescens)的16S rDNA序列同源性高达100%。结合菌体形态,革兰氏反应以及16S rDNA序列结果,DD菌株为一株粘质沙雷氏菌,DNA降解活性分析显示其具有很强的DNA降解能力。
- 刁文涛王雪妍陈晓飞冯菲宁萌周伏忠
- 关键词：DNA降解粘质沙雷氏菌
- 一种固态发酵制备饲用β-甘露聚糖酶的方法
- 本发明涉及固态发酵制备饲用β‑甘露聚糖酶的方法，有效解决饲用β‑甘露聚糖酶的生产，满足对β‑甘露聚糖酶的实际需要问题，制备马铃薯葡萄糖琼脂斜面培养基，无菌操作将黑曲霉HKS016菌株接种于PDA斜面培养基上，恒温培养，直...
- 刘德海王佰涛陈晓飞刁文涛李珊珊雷高杨文玲权淑静李亮亮胡虹胡宜亮陈国参
- 文献传递
- 鹰嘴豆浆液蛋白发酵与酶解效果的对比分析被引量：2
- 2015年
- 为对比观察国产蛋白酶酶解和益生菌发酵降解鹰嘴豆浆液蛋白的效果,比较酶解法、发酵法降解鹰嘴豆浆液蛋白为小分子蛋白肽的能力,采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶分别酶解,纳豆芽孢杆菌、植物乳酸菌、蛹虫草分别发酵鹰嘴豆浆液蛋白,测定不同处理时间时的可溶性氮、DH、电泳条带等的变化情况。研究结果发现,国产碱性蛋白酶酶解鹰嘴豆浆液蛋白240 min,上清液的可溶性氮含量可达到0.1389%,DH为6.43%;木瓜蛋白酶酶解240 min时的上清液可溶性氮含量达到0.0972%,DH为4.41%;而发酵法处理以纳豆芽孢杆菌效果最显著,纳豆芽孢杆菌发酵处理鹰嘴豆浆液蛋白8 h时的上清液可溶性氮含量为0.0895%,DH为4.03%。本研究表明,酶解法降解鹰嘴豆浆液蛋白的效果要比微生物发酵法处理时间短,降解效果更好。
- 周伏忠冯菲宁萌王雪妍刁文涛陈晓飞
- 关键词：酶解可溶性氮水解度
- 结合利用pGAPZαA和pPICZαA构建目的蛋白的多拷贝载体并在毕赤酵母中表达被引量：2
- 2017年
- 结合利用载体pGAPZαA和pPICZαA构建目的蛋白的可线性化多拷贝表达载体,并转化毕赤酵母表达目的蛋白.首先将目的蛋白基因构建到组成型表达载体pGAPZαA中,然后依据载体自身特性,用同尾酶BglⅡ和Bam HⅠ切取其表达盒并连接到甲醇诱导型载体pPICZαA中的Bam HⅠ位点处,经多次重复后获得目的蛋白多拷贝表达载体,线性化后电转化毕赤酵母表达目的蛋白.灵芝免疫调节蛋白LZ8是一个已成功在毕赤酵母中表达的蛋白,作为检验该方法的样本其基因被首先构建到载体pGAPZαA中得到质粒pGAPZαA-LZ8,切取其表达盒构建到载体pPICZαA中,经过4次重复得到了多拷贝表达载体pPICZαA-[GAPZαA-LZ8]4,然后利用pPICZαA特有的限制性内切酶位点SacⅠ进行线性化,最终电转化到毕赤酵母GS115中进行组成型表达蛋白LZ8,其表达量达到pGAPZαA-LZ8转化菌株表达量的2~3倍.经检验,结合利用载体pGAPZαA和pPICZαA可以构建目的蛋白的多拷贝表达载体,并且可以对载体进行线性化而不影响转化酵母时的转化效率.
- 冯菲王雪妍陈晓飞宁萌周伏忠刁文涛
- 关键词：多拷贝毕赤酵母
- 一种利用毕赤酵母表达系统生产云芝免疫调节蛋白的方法
- 本发明涉及利用毕赤酵母表达系统生产云芝免疫调节蛋白的方法，有效解决云芝免疫调节蛋白的制备问题，按照毕赤酵母密码子偏好性合成云芝免疫调节蛋白FIP-tvc基因的核苷酸序列SEQ？ID？NO.1；用限制性内切酶酶切合成的云芝...
- 周伏忠李锋解复红刁文涛王雪妍陈晓飞冯菲
- 文献传递
- 一种大蒜片加工废水除臭复合菌剂
- 本发明涉及大蒜片加工废水除臭复合菌剂，可有效减轻大蒜片加工废水的臭味，缓解环境污染的问题，其解决的技术方案是，该复合菌剂由解淀粉芽孢杆菌WS3‑1菌剂、地衣芽孢杆菌WS3‑2菌剂、酿酒酵母CXMJ菌剂和米根霉JG3菌剂组...
- 王继雯慕琦陈国参李磊李亮亮甄静王斌刘德海杨文玲杜志敏刁文涛王佰涛于珊珊
- 一种致病性沙门氏菌测试条的制备方法
- 本发明涉及致病性沙门氏菌测试条的制备方法，可有效解决现有检测方法费时、繁琐的问题，技术方案是，包括基材PVC、玻璃纤维和硝酸纤维膜，基材PVC板上固定有第一覆膜、引水玻璃纤维、载体玻璃纤维、硝酸纤维膜和吸水棉浆板，硝酸纤...
- 杨书豪王玉金李珊珊刘丽杜迅刁文涛胡宜亮宁萌向凌云王雪研冯菲
- 文献传递
- 一种通过共表达血红蛋白来提高毕赤酵母工程菌中α-半乳糖苷酶甲醇诱导表达量的方法
- 本发明涉及通过共表达血红蛋白来提高毕赤酵母工程菌中<I>α</I>‑半乳糖苷酶甲醇诱导表达量的方法，可有效解决提高毕赤酵母工程菌中<I>α</I>‑半乳糖苷酶甲醇诱导表达量及其应用的问题，方法是，构建表达质粒pPIC9K...
- 刁文涛李珊珊陈国参王雪妍周伏忠陈晓飞马焕杨文玲杜志敏权淑静刘德海王继雯张英涛解复红
- 文献传递
