李慧
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 供职机构：华侨大学化工学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金福建省厦门市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 阿魏酸酯酶O42807在毕赤酵母GS115中的表达被引量：2
- 2016年
- 研究阿魏酸酯酶O42807基因(fae)在巴斯德毕赤酵母GS115中的表达及重组阿魏酸酯酶的酶学特性.化学合成fae基因序列,构建分泌型重组质粒pPIC9K-fae,经线性化后电转化至毕赤酵母GS115,对筛选出的高活性转化子进行诱导表达.SDS-PAGE分析显示:发酵上清液为单一条带,表观相对分子质量为42ku,酶活为78.49nkat·mL-1,比活力为524.38nkat·mg-1,最适反应温度为50℃,在40~45℃温度范围内较稳定,最适反应pH值为5.0~5.5,且在pH值为6.0时,稳定性较好;金属离子K+,Ca^(2+),Na+对其活性有促进作用,Fe^(2+),Zn^(2+)有一定的抑制作用,而Mn^(2+),Cu^(2+)对其有明显的抑制作用.
- 陈云华李慧张光亚葛慧华李夏兰
- 关键词：阿魏酸酯酶毕赤酵母酶学性质
- 黄鳍金枪鱼抗菌肽YFGAP在大肠杆菌中融合表达及其活性检测被引量：3
- 2015年
- 【目的】抗菌肽YFGAP由32个氨基酸组成,分子量为3.4 k D,对革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)表现出强效的抑制作用,不具有溶血活性。在大肠杆菌中表达抗菌肽YFGAP,分离纯化抗菌肽并鉴定其生物学活性。【方法】化学合成EK-YFGAP和L-EK-YFGAP基因序列,构建表达载体p ET22b-ELP20-EK-YFGAP、p ET22b-ELP40-EK-YFGAP和p ET22b-ELP40-L-EKYFGAP,分别转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,可逆相变循环纯化融合蛋白。肠激酶酶切,经Vivaspin Turbo纯化柱纯化,测定重组抗菌肽的抑菌活性和溶血活性。【结果】纯化出两种融合蛋白ELP40-EK-YFGAP和ELP40-L-EK-YFGAP,肠激酶酶切纯化后获得重组抗菌肽YFGAP,对4种病原菌均有抑制效果,溶血活性较低。【结论】以ELPs作为非色谱纯化标签,实现了抗菌肽YFGAP的融合表达,具有操作简单、成本低、易于扩大的优势,为重组抗菌肽的量化制备及应用提供了理论基础和技术支持。
- 李慧陈云华张光亚李夏兰
- 关键词：抗菌肽融合蛋白抑菌活性
