陈翰卿
- 作品数:7 被引量:9H指数:1
- 供职机构:苏州大学医学部基础医学与生物科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- B7分子在胶质瘤干细胞上的表达及意义研究
- 目的 :获得U87来源的肿瘤干细胞,并分析其B7家族负性共刺激分子的表达情况。方法 :有限稀释法筛选出细胞形态发生明显变化的非CD133依赖的肿瘤干细胞,通过添加b FGF、EGF、b-27的DMEM/F12干性培养基培...
- 陈翰卿傅丰庆孙静张学光
- 关键词:脑胶质瘤肿瘤干细胞B7
- 文献传递
- B7分子在胶质瘤干细胞上的表达及意义研究
- 目的:获得U87来源的肿瘤干细胞,并分析其B7家族负性共刺激分子的表达情况.方法:有限稀释法筛选出细胞形态发生明显变化的非CD133依赖的肿瘤干细胞,通过添加bFGF、EGF、b-27的DMEM/F12干性培养基培养,形...
- 陈翰卿傅丰庆孙静张学光
- 关键词:脑胶质瘤肿瘤干细胞B7
- B7-H4促进B细胞凋亡被引量:1
- 2015年
- 目的:检测B7-H4受体在B细胞表面的表达,研究B7-H4蛋白对细胞增殖和细胞凋亡的影响,探讨B7-H4通过未知受体传递的下游信号机制。方法分选扁桃体中CD19+B细胞,流式细胞术检测CD19+B细胞的受体的表达情况;采用CCK8法和annexinⅤ/PI凋亡试剂盒分别检测细胞增殖和细胞凋亡;进一步采用Western blot检测凋亡信号通路的AKT、MAPK信号通路的磷酸化变化。结果 CD19+B细胞表面存在B7-H4未知受体,经LPS与anti-CD40刺激受体表达增加;B7-H4蛋白抑制B细胞增殖,促进B细胞的凋亡,并抑制AKT和MAPK的信号通路。结论 B7-H4蛋白通过B细胞表面表达的受体促进细胞凋亡,这为B7-H4未知受体的寻找及其进一步介导的信号研究奠定了理论基础。
- 时正朋陈翰卿孙静樊明月傅丰庆
- 关键词:扁桃体B细胞B7-H4凋亡磷酸化
- U87细胞来源的脑胶质瘤干细胞样细胞B7-H6表达上调且与其生物学特性相关被引量:1
- 2016年
- 目的探讨B7家族分子B7-H6在脑胶质瘤干细胞样细胞(GSLC)中的表达及其意义。方法使用亚克隆的方法并利用GSLC在体外形成神经细胞球的特性,从U87细胞株中筛选得到脑GSLC;通过实时定量PCR和流式细胞术检测干细胞标志分子c-myc、性别决定区基因Y盒2(Sox2)、CD133、神经上皮干细胞蛋白(nestin)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)的表达;通过化疗药物多柔比星、顺铂、卡铂杀伤鉴定其是否具有耐药特性;通过实时定量PCR及流式细胞术获得脑GSLC中B7家族的表达;采用小干涉RNA(si RNA)干扰下调B7-H6表达,CCK-8法检测细胞增殖的变化。结果使用亚克隆方法分离获得的脑GSLC能在体外形成神经细胞球,上调表达多种干细胞标志分子CD133、nestin、CXCR4,具有显著的耐药特性。B7家族分子B7-H1、B7-H3、B7-H4和B7-H6在得到脑GSLC中均表达,与原代U87细胞相比,细胞膜上的B7-H6的表达发生显著上调,使用si RNA干扰B7-H6表达后,细胞的增殖受到抑制,且c-myc基因的表达也下调。结论 U87细胞来源的脑GSLCB7-H6表达上调,并且与GSLC生物学特性相关。
- 陈翰卿时正朋高兵傅丰庆张学光
- 关键词:脑胶质瘤
- 一株特异性识别B7-H3杂交瘤单克隆抗体Y4F11的分析和鉴定
- 2016年
- 目的研制小鼠抗人恶性胸水细胞表面分子的单克隆抗体(m Ab),并对其中Y4F11识别的抗原进行鉴定和验证。方法以胸水细胞为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠、采用杂交瘤技术进行细胞融合和筛选阳性杂交瘤克隆;选取Y4F11为实验对象,采用流式细胞术分析其在初始和活化免疫细胞(T细胞、B细胞、NK细胞和单核细胞)上的结合情况;通过免疫共沉淀法获得与Y4F11特异性结合的条带、割胶、蛋白质谱测序后拼接出肽段,并进行BLAST分析比对;采用Western blot法、Dot-blot法及流式细胞术验证Y4F11与B7同源物3(B7-H3)的抗体抗原关系。结果获得78株能持续分泌识别恶性胸水细胞表面表达分子的抗体的杂交瘤细胞株,其中Y4F11与胸水细胞结合最高;Y4F11特异识别的条带相对分子质量(Mr)大小约为50 000,质谱结果经BLAST比对为B7-H3分子;继而的结合实验显示,Y4F11可以与B7-H3的转基因细胞结合,也可以与B7-H3融合蛋白有效地结合,B7-H3在免疫细胞表面表达的模式与Y4F11抗体在这些细胞上的结合一致,表明Y4F11识别的抗原分子为B7-H3。结论成功获得1株持续表达B7-H3 m Ab的杂交瘤细胞株Y4F11,为进一步研究分析B7-H3的生物学功能提供了物质基础。
- 时正朋胡玉敏陈翰卿傅丰庆张学光
- 关键词:恶性胸水B7-H3单克隆抗体
- MiR-29a下调共刺激分子B7-H3的表达及其对脑胶质瘤细胞侵袭的影响被引量:7
- 2015年
- 目的:探讨miR-29a调控共刺激分子B7-H3在脑胶质瘤中的表达及其对脑胶质瘤细胞侵袭能力的影响。方法:通过Real-time PCR检测miR-29a和B7-H3在正常脑组织、脑胶质瘤组织及人胶质瘤细胞株U87中的表达,并利用脂质体将miR-29a的模拟物(mimics)和抑制剂(inhibitors)转入U87细胞,流式术验证miR-29a对B7-H3表达的调节效果;采用CCK-8和Transwell实验观察miR-29a对U87细胞的增殖和侵袭能力的影响,并通过流式术分析miR-29a干预前后U87细胞上与细胞侵袭相关的化学趋化因子的表达变化,以miRtarbase等软件预测miR-29a与CXCR4的结合能力。结果:胶质瘤组织及细胞株中miR-29a低表达而B7-H3 mRNA高表达,且均与瘤组织病理分级相关。转染miR-29a mimics可以有效下调U87细胞中B7-H3 mRNA的表达。转染miR-29a mimics可以显著抑制U87细胞的侵袭能力(P<0.05),但对细胞增殖并无显著影响。miR-29a过表达可同时下调U87细胞中CXCR4的表达,但软件分析CXCR4基因上并不存在miR-29a的结合位点。结论:miR-29a可有效下调B7-H3分子的表达,进而抑制脑胶质瘤细胞的侵袭能力,其作用机制可能与CXCR4途径相关。
- 高兵陈翰卿时正鹏孙静严茹红傅丰庆张学光
- 关键词:B7-H3胶质瘤U87细胞CXCR4
- 共刺激分子B7-H6在脑胶质瘤干样细胞的表达及生物学意义的研究
- 脑胶质瘤是常见的中枢神经系统的恶性肿瘤,其恶性程度高、患者生存期短、易复发。胶质瘤最多发的区域是大脑,占大脑和中枢神经系统肿瘤的30%以及大脑恶性肿瘤的80%。也已表明,脑胶质瘤的恶性生物学特征与一群具有增殖、自我更新和...
- 陈翰卿
- 关键词:脑胶质瘤生物学
- 文献传递